目錄:合肥恩派爾貿(mào)易有限公司>>Abnbio感受態(tài)細(xì)胞>>表達(dá) 感受態(tài)細(xì)胞>> ABG712-50SMD1163 酵母感受態(tài)細(xì)胞
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更新時(shí)間:2024-03-28 14:58:47瀏覽次數(shù):804評(píng)價(jià)
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供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 50X100ul |
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貨號(hào) | ABG712-50 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 環(huán)保,食品,化工,生物產(chǎn)業(yè),制藥 |
主要用途 | 感受態(tài)細(xì)胞 |
操作說明
1、取需轉(zhuǎn)化質(zhì)粒5µg,酶切,回收;
2. 取一支無菌的1.5ml EP管,依次加入預(yù)冷的線性質(zhì)粒1-5µg(體積不高于15 µl),酵母促轉(zhuǎn)化劑10µl,100µl冰上融化的SMD1163感受態(tài)細(xì)胞,畢赤酵母轉(zhuǎn)化液500µl,輕輕翻轉(zhuǎn)混勻6-8次;
3. 30℃水浴30min,每15min輕輕翻轉(zhuǎn)混勻6-8次;
4. 每支加入20µl的二甲基亞砜;(用于提高轉(zhuǎn)化效率,也可不做)
5. 42℃水浴15min,每7.5min輕輕翻轉(zhuǎn)混勻6-8次;
6. 12000rpm瞬時(shí)離心棄上清,每支加1ml的YPGPlus(或YPG)于30℃復(fù)蘇1h;(用于提高轉(zhuǎn)化效率,也可不做)
7. 12000rpm瞬時(shí)離心棄上清,用100µl 0.9%NaCl重懸,涂板,30℃培養(yǎng)3-7d。
注意事項(xiàng)
1、.使用酵母促轉(zhuǎn)化劑前,請(qǐng)把裝有酵母促轉(zhuǎn)化劑的管子在沸水中煮沸5min,然后立即放在冰上,用后放在-20℃儲(chǔ)存?zhèn)溆谩?/p>
2.轉(zhuǎn)化液低溫環(huán)境下會(huì)析出,請(qǐng)于常溫下溶解后使用。
3.轉(zhuǎn)化全程要無菌操作。
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