分子雜交箱的工作原理
Techne分子雜交箱可調(diào)節(jié)支腳保證的平衡;溫度范圍:高于室溫10°C-100°C ;*的雙面玻璃門(mén);無(wú)聲安全,提供長(zhǎng)久保護(hù);大容量,可以容納多達(dá)24個(gè)小試管或6個(gè)*的大試管。
核酸分子雜交技術(shù)根據(jù)堿基互補(bǔ)配對(duì)原則,在一定條件下用標(biāo)記的已知DNA或RNA片段(探針)來(lái)檢測(cè)樣本中是否有待測(cè)的核酸序列 [1] 。
生理?xiàng)l件下DNA呈穩(wěn)定的雙鏈螺旋結(jié)構(gòu),在體外,當(dāng)有變性因素存在時(shí)(如溫度超過(guò)65℃、含胺或pH時(shí)),DNA分子內(nèi)部的氫鍵斷裂,解離成兩條單鏈DNA,這種現(xiàn)象稱為變性。在除去變性因素后,單鏈DNA能通過(guò)堿基互補(bǔ)再結(jié)合成穩(wěn)定的雙鏈螺旋結(jié)構(gòu),此過(guò)程稱為復(fù)性或退火。
在復(fù)性過(guò)程中,若存有與樣本核酸某部分序列相同或高度同源的外源性單鏈DNA片段或寡核苷酸(一般為17~45個(gè)堿基)時(shí),兩者可通過(guò)互補(bǔ)堿基形成雜交體,即雙鏈DNA分子,這一過(guò)程稱為雜交。用一段已知的DNA片段加入復(fù)性的DNA中,若能夠結(jié)合成雙鏈分子,說(shuō)明樣本中含有已知的DNA序列。
核酸分子雜交不僅發(fā)生在DNA與DNA之間,也可發(fā)生在RNA與RNA、RNA與DNA之間。生成的雜交體分別為 DNA-DNA、 RNA-RNA或 RNA-DNA的雙鏈結(jié)構(gòu)。