在細(xì)胞培養(yǎng)中遇到培養(yǎng)液pH值變化太快,怎么辦
培養(yǎng)液pH值變化太快,怎么辦?
可能造成的原因:
1.CO2張力不對(duì);
2.培養(yǎng)瓶蓋擰得太緊;
3.NaHCO3 緩沖系統(tǒng)緩沖力不足;
4.培養(yǎng)液中鹽濃度不正確;
5.細(xì)菌、酵母或真菌污染。
解決方法:
1.按培養(yǎng)液中NaHCO3濃度增加或減少培養(yǎng)箱內(nèi)CO2濃度,2.0g/L到3.7g/L濃度NaHCO3對(duì)應(yīng)CO2濃度為5%到10%或者改用不依賴CO2培養(yǎng)液
2.松開瓶蓋1/4圈
3.加HEPES緩沖液至10到25mM終濃度
4.在CO2培養(yǎng)環(huán)境中改用基于Hank’s鹽配制的培養(yǎng)液,在大氣培養(yǎng)環(huán)境中培養(yǎng)改用Hank’s鹽配制的培養(yǎng)液
5.丟棄培養(yǎng)物或用抗生素除菌