上海徠同生物科技有限公司

CELL-WISE 293 培養(yǎng)基(貨號:CW001)具體說明

時間:2025-7-8閱讀:56
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CELL-WISE 293 培養(yǎng)基(貨號:CW001)具體說明

產(chǎn)品特性

  • 應(yīng)用場景:專為HEK293 細(xì)胞(如 293-F、293-T、Expi-293F 等)的高密度懸浮培養(yǎng)及瞬時轉(zhuǎn)染設(shè)計,支持細(xì)胞高效擴增與外源基因表達(dá)。

  • 成分優(yōu)勢

    • 無蛋白、無動物源成分、化學(xué)成分wan全限定,排除血清批次差異及病毒污染風(fēng)險,保障實驗穩(wěn)定性與可重復(fù)性。

    • 即用型配方,無需額外添加成分,開瓶后可直接使用,簡化實驗操作流程。

技術(shù)參數(shù)

項目

指標(biāo)

外觀

澄清透明紅色液體

滲透壓

275±15 mOSM

pH

6.9~7.4

無菌檢測

無菌(通過無菌培養(yǎng)驗證)

內(nèi)毒素

<5 EU/mL

儲存條件

2~8℃,避光保存

有效期

12 個月(未開封)

產(chǎn)品用途

僅限科學(xué)研究使用(如重組蛋白生產(chǎn)、病毒載體包裝等),嚴(yán)禁用于人類或動物的診斷、治療及臨床應(yīng)用。

細(xì)胞馴化操作指南

一、直接馴化(適用于多數(shù)細(xì)胞株)

若細(xì)胞已適應(yīng)無血清懸浮培養(yǎng)體系,可直接通過常規(guī)傳代稀釋更換為 Balance CD 293 培養(yǎng)基,無需逐步過渡。

二、漸進式馴化(適用于敏感細(xì)胞或傳統(tǒng)培養(yǎng)基培養(yǎng)的細(xì)胞)

注意事項:選擇 ** 低代次(≤P10)、處于對數(shù)生長期(活率 > 95%** 的細(xì)胞進行馴化。

 

操作步驟



  1. 基礎(chǔ)傳代階段

    • 在原培養(yǎng)基中復(fù)蘇細(xì)胞,連續(xù)傳代2~3 至生長狀態(tài)穩(wěn)定。

    • 當(dāng)細(xì)胞密度達(dá) 2×10? cells/mL 時,以 0.5~0.6×10? cells/mL 的密度傳代,使用 75% 原培養(yǎng)基 + 25% Balance       CD 293 培養(yǎng)基 的混合體系。

  2. 培養(yǎng)條件

    • 環(huán)境:37℃,5% CO?,恒溫?fù)u床轉(zhuǎn)速 110~175 rpm(根據(jù)培養(yǎng)體積調(diào)整)。

  3. 比例遞增階段

    • 培養(yǎng) 3~4 天后,若細(xì)胞密度達(dá) 3×10? cells/mL 且活率 > 90%,傳代時調(diào)整混合比例為 50% 原培養(yǎng)基 + 50% Balance       CD 293 培養(yǎng)基,接種密度維持 0.5×10? cells/mL。

    • 若細(xì)胞生長緩慢:可離心保留 20% 條件培養(yǎng)基,加入 80% 新配的 75% 原培養(yǎng)基 + 25% Balance       CD 293 培養(yǎng)基 繼續(xù)培養(yǎng)。

  4. wan全切換階段

    • 重復(fù)上述步驟,逐步提高 Balance CD 293 培養(yǎng)基比例(如 25:75→10:90),直至wan全使用 100% 目標(biāo)培養(yǎng)基。

  5. 適應(yīng)驗證

    • 細(xì)胞在 100% 培養(yǎng)基中傳代3~4 次后,若密度達(dá) 2~3×10? cells/mL 且活率 > 90%,即完成馴化。

    • 后續(xù)傳代起始密度可降至 0.3×10? cells/mL,建議再傳代2~3 后進行轉(zhuǎn)染實驗。

 

重要提示



  • 馴化初期(前 3 代)細(xì)胞狀態(tài)可能波動,通常從 4 代起逐漸改善。

  • 馴化過程中需定期監(jiān)測細(xì)胞密度、活率及形態(tài),避免污染或代謝物積累影響細(xì)胞適應(yīng)。

 


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