產(chǎn)品名稱:Gibco美國間充質(zhì)干細胞胎牛血清FBS
英文名稱:mesenchymal stem cell-qualified, USDA-approved regions.
產(chǎn)品貨號:12662029, 12662-029
處理方式:標(biāo)準(zhǔn),三次0. 1 um濾膜過濾
地區(qū)來源:美國
物種來源:胎牛
內(nèi)毒素水平:<=50 EU/ml (levels routinely <=10 EU/ml)
血紅素水平:<=25 mg/dl
熱滅活:未滅活
病毒和支原體:陰性
產(chǎn)品規(guī)格:500 ML
保存條件:-5 to -20°C
運輸方式:干冰運輸
Gibco美國間充質(zhì)干細胞胎牛血清FBS產(chǎn)品應(yīng)用:Gibco胎牛血清質(zhì)量非常好,用途比較廣,適用于各種癌細胞株,嬌貴細胞,原代細胞,干細胞(胚胎干細胞,間充質(zhì)干細胞等)培養(yǎng),可以用于體外診斷。
心肌細胞原代培養(yǎng)時血清的使用問題。
1、問:在進行心肌細胞原代培養(yǎng)時,需要用含血清的培養(yǎng)基中止胰酶的消化作用,我現(xiàn)在使用的是含血清 10%的培養(yǎng)液,但近日看北醫(yī)一個細胞培養(yǎng)的課件發(fā)現(xiàn),有用1%血清培養(yǎng)液進行中止消化的,想問一下,1%的是否可 以,效果是否有保證?這樣確實能節(jié)省不少血清的。
答:關(guān)于心肌細胞元代培養(yǎng)的FBS問題:
(1)1%的血清*培養(yǎng)基可不可以,得看你胰酶的用量。但是在心肌細胞元代培養(yǎng)就不行。 10%的FBS* 培養(yǎng)基效果都不太好,開始心肌細胞元代培養(yǎng)需要高濃度的FBS,20%左右,但這就有出現(xiàn)另一個問題,在FBS*培 養(yǎng)基中,成纖維細胞呈優(yōu)勢細胞,須得在培養(yǎng)基加入適量的BrdU以抑制其生長,純化心肌細胞。
(2)FBS的作用不僅僅是拿來中和胰酶,只是FBS中的一些蛋白質(zhì)如α-巨球蛋白等有抑制胰酶活性作用 。
(3)元代心肌細胞培養(yǎng)的FBS使用,有講究:剛開始使用20%左右的高濃度的FBS,后逐漸遞減為無血清的 DMEM/F-12培養(yǎng)基培養(yǎng)。
2、問:我胰酶的用量是0.08% ,并混和了0.08%的膠原酶。FBS要高濃度遞減是否是說的在細胞培養(yǎng)中啊, 難道在消化時終止也需要如此高的濃度嗎,還有,我的BRDU只用到48小時就不用了,因為擔(dān)心其損傷太大,可以持續(xù) 用多久呢?
答:我用10%FBS終止的,然后差速1h,然后還是用10%FBS的HG-dmem養(yǎng)的,沒有用brdu,心肌細胞還是比 較多和穩(wěn)定的,我第3天就可以用,第2天晚上看就會有搏動。
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