γδT細胞高效擴增試劑盒*格產(chǎn)品簡介

γδT細胞具有在體內(nèi)快速反應的特性，在受到刺激時，會先于αβ-T細胞釋放促炎性細胞因子（IFN-γ和TNF-α等）。  γδT細胞能夠激活NK細胞的腫瘤細胞毒作用，與DC細胞互刺激成熟， APC細胞抗原呈遞的功能，激活αβ-T 細胞的免疫效應， γδT細胞的殺傷作用具有非MHC限制性，廣泛的殺瘤譜，已知對至少十幾種腫瘤細胞有殺傷作用。 γδT細胞在人外周血含量很少（1-5%），本產(chǎn)品能夠?qū)⑼庵苎械膯蝹€核細胞大規(guī)模擴增成γδT細胞，具有擴增效率高，目的細胞百分比高的特點，起始單個核細胞經(jīng)過14天培養(yǎng)，總細胞數(shù)可以擴增約50-100倍左右，γδT細胞數(shù)可以擴增500-1000倍，其純度高于85%，并且全程無血清培養(yǎng)，為基礎和臨床研究使用γδT細胞提供 一個有力的武器。

產(chǎn)品特點

1 擴增效率高：起始單個核細胞經(jīng)過14天培養(yǎng)，總細胞可以擴增約50-100倍左右，目的細胞（γδT細胞）數(shù)可以擴增500-1000倍；

2 目的細胞百分比高： γδT細胞純度可以達到85%以上；

3 全程無血清培養(yǎng)。 

γδT細胞高效擴增試劑盒*格試劑盒成份

使用說明

1 在血液采集前一天將100μL GD-I試劑加入4mL PBS，包被于T-75瓶，用錫紙包好，平放于4°C冰箱過夜；

注意： 確保T-175瓶平放以保證含有GD-I試劑的PBS溶液能夠均勻分布于T-75瓶底。

2 D0 用PBS溶液洗滌前一天包被的T-75瓶一次，將制備好的單個核細胞（MNC）按0.5-1M/mL細胞密度鋪于洗滌后的T-75瓶中，加入GD-IV 47.5mL， GD-II 85μL，GD-III 2.5mL以及IL-2 1000U/mL；

注意：1）洗滌時用移液管吸取20ml PBS注入T-75瓶，輕微震蕩后倒出/吸出，切忌用沖力較大的移液器或移液槍反復沖洗以免破壞包被面；

2）本試劑盒所配試劑均為整支加入，可先用移液槍移取試劑管中試劑后再用培養(yǎng)基沖洗試劑管確保管內(nèi)剩余試劑能夠充分利用。

 3）D3 補加90mL GD-IV（含IL-2 1000U/mL）和10mL GD-III，轉(zhuǎn)入細胞培養(yǎng)袋，此時袋子含150mL培養(yǎng)基；

4 ）D5 往培養(yǎng)袋補加135mL GD-IV(含IL-2 1000U/mL)和15mL GD-III，此時袋子含300mL培養(yǎng)液；

5 ）D7 往培養(yǎng)袋補加270mL GD-IV(含IL-2 1000U/mL)和30mL GD-III，此時袋子含600mL培養(yǎng)液；

 6 ）D9 每個培養(yǎng)袋補加460mL GD-IV(含IL-2 1000U/mL)和40mL GD-III，此時袋子含1100mL培養(yǎng)液；

注意： 確保T-175瓶平放以保證含有GD-I試劑的PBS溶液能夠均勻分布于T-75瓶底。

 7 ）D12-14 收獲γδT細胞。

培養(yǎng)效果

培養(yǎng)細胞14天后，細胞總數(shù)及目的細胞（γδ T cell）擴增倍數(shù)以及流式表型分析（N=4）

產(chǎn)品保存

1 本產(chǎn)品需避光保存；

2 GD-I，GD-IV置于2-8°C保存，有效期為12個月，其它成份包括GD-II, GD-III置于-20°C保存，有效期為24個月；

3 請于保質(zhì)期內(nèi)使用本產(chǎn)品，超過保質(zhì)期，請勿使用；

4 為確保本產(chǎn)品的質(zhì)量，請避免對其反復凍融。