液相色譜儀對流動相性質(zhì)的要求有哪些
液相色譜儀對流動相性質(zhì)的要求:
HPLC中,強(qiáng)溶劑使溶質(zhì)在填料表面的吸附減少,相應(yīng)的容量因子k值減??;較弱的溶劑使溶質(zhì)在填料表面的吸附增加,相應(yīng)的容量因子k值增大。因此,k值是流動相組成的函數(shù)。理論塔板數(shù)一般與流動相的粘度成反比。
1、流動相應(yīng)不改變填料的任何性質(zhì):
低交聯(lián)度的離子交換樹脂和排阻色譜填料有時遇到某些有機(jī)相會溶脹或收縮,從而改變色譜柱填床的性質(zhì)。
堿性流動相不能用于硅膠柱系統(tǒng)。
酸性流動相不能用于氧化鋁和氧化鎂等吸附劑的柱系統(tǒng)。
2、純度高:
色譜柱的壽命與大量流動相通過有關(guān),特別是當(dāng)溶劑所含雜質(zhì)在柱上積累時。
3、必須與檢測器匹配:
當(dāng)使用UVD時,所用流動相在檢測波長下應(yīng)沒有吸收或吸收很小。
當(dāng)使用RID時,應(yīng)選擇折光系數(shù)與樣品差別較大的溶劑作流動相,以提高靈敏度。
4、粘度低:
高粘度溶劑會影響溶質(zhì)的擴(kuò)散和傳質(zhì),使柱效降低,還會使柱壓增加,分離時間延長。選擇沸點在100℃以下的流動相。
5、對樣品的溶解度要適宜:
如果溶解度欠佳,樣品會在色譜柱內(nèi)沉淀,不但影響純化分離,而且會使色譜柱惡化。
6、樣品易于回收:
應(yīng)選用揮發(fā)性溶劑。