毛細管色譜柱柱壓過高怎么解決?
毛細管色譜柱柱壓過高怎么解決?
毛細管色譜柱的色譜柱壓過高是HPLC用戶常碰到的問題。其原因有多方面,而且常常并不是柱子本身的問題,可按下面步驟檢查問題的起因:
1.拆去保護柱,看柱壓是否還高,否則是保護柱的問題,若柱壓仍高,再檢查;
2.把色譜柱從儀器上取下,看壓力是否下降,否則是管路堵塞,需清洗,若壓力下降,再檢查;
3.將柱子的進出口反過來接在儀器上,用10倍柱體積的流動相沖洗柱子(此時不要連接檢測器,以防固體顆粒進入流動性)。這時,如果柱壓仍不下降,再檢查;
4.更換柱子入口篩板,若柱壓下降,說明你的溶劑或樣品含有顆粒雜質,正是這些雜質將篩板堵塞引起壓力上升。若柱壓還高,請告知供應商廠家。
毛細管色譜柱若受損肯定是要更換的,這里介紹下更換色譜柱的操作方法:
先用95%乙腈+5%水沖洗舊柱子(沖去柱子中殘留的緩沖鹽和之前難以洗脫的組分),關掉流速,待流速降至0后,把柱子兩邊的PEAK頭擰下來,用配套的塞子將換下的柱子兩頭堵上,密封保存。更換新的色譜柱時,應先將需換上的柱子兩邊的塞子旋開,確定好柱子標示的方向后,先接柱子入口端,并使柱子出口端略高于入口端,這樣就使流動相流過柱子時能將其中的氣泡排出,待氣泡排盡后,再接上柱子的出口端,用純的乙腈小流速沖洗半小時,再用流動相按0.2、0.5、1.0逐漸加大流速來沖洗。