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小鼠直腸黏膜上皮原代細(xì)胞

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更新時(shí)間:2025-05-21 11:23:05瀏覽次數(shù):69

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產(chǎn)品簡介

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 5×10?
貨號(hào) YS-01X8546 應(yīng)用領(lǐng)域 化工,生物產(chǎn)業(yè)
主要用途 僅供科研實(shí)驗(yàn)    
小鼠直腸黏膜上皮原代細(xì)胞公司出售的產(chǎn)品:人原代鼻黏膜成纖維細(xì)胞 人結(jié)直腸腺癌細(xì)胞 英文 HCT-15 TSHR1 樹鼩肌肉成纖維樣細(xì)胞 1ml/T75 RBE, 人肝膽管癌細(xì)胞 RabbitS2 黑家兔皮膚成纖維樣細(xì)胞 小鼠原代心肌細(xì)胞

詳細(xì)介紹

小鼠直腸黏膜上皮原代細(xì)胞

小鼠直腸黏膜上皮原代細(xì)胞

小鼠直腸黏膜上皮細(xì)胞分離自直腸組織;直腸為大腸的未段,位于小骨盆內(nèi)。上端平第3骶椎處接續(xù)乙狀結(jié)腸,沿骶骨和尾骨的前面下行,穿過盆膈,下端以門而終。直腸上端的大小似結(jié)腸,其下端擴(kuò)大成直腸壺腹,是糞便排出前的暫存部位,下端變細(xì)接管。直腸在盆腔內(nèi)的位置與骶椎腹面關(guān)系密切,與骶椎有相同的曲度。直腸周圍多脂肪、無縱帶,位于膀胱和生殖器官的背側(cè)。直腸的動(dòng)脈血供主要是來自腸系膜下動(dòng)脈的直腸上動(dòng)脈,來自髂內(nèi)動(dòng)脈的直腸中動(dòng)脈和來自髂內(nèi)動(dòng)脈的直腸下動(dòng)脈。腸黏膜上皮細(xì)胞是機(jī)體內(nèi)外環(huán)境的重要屏障,持續(xù)暴露于大量抗原中,也是機(jī)體面對(duì)病原微生物的第一道防線。因此,腸黏膜上皮細(xì)胞除有吸收、分泌和轉(zhuǎn)運(yùn)等重要生理功能之外,在黏膜先天性和獲得性免疫防御機(jī)制中也起著重要作用。腸黏膜上皮細(xì)胞作為首先接觸抗原的細(xì)胞,在黏膜免疫反應(yīng)的起始階段發(fā)揮關(guān)鍵作用,它決定黏膜免疫反應(yīng)的發(fā)生、性質(zhì)和強(qiáng)度。

英文名稱

Mouse Rectal   Mucosal Epithelial Cells

組織來源

直腸

產(chǎn)品規(guī)格

5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶

產(chǎn)品貨號(hào)

YS-01X8546

細(xì)胞形態(tài)

上皮細(xì)胞樣

生長特性

貼壁

產(chǎn)品名稱:小鼠直腸黏膜上皮細(xì)胞

組織來源:直腸

產(chǎn)品規(guī)格:5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶

小鼠直腸黏膜上皮原代細(xì)胞小鼠直腸黏膜上皮原代細(xì)胞

包被條件:鼠尾膠原Ⅰ(2-5μg/cm2

培養(yǎng)基:含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin

換液頻率:每2-3天換液一次

生長特性:貼壁

細(xì)胞形態(tài):上皮細(xì)胞樣

傳代特性:可傳1-2

消化液:0.25%

培養(yǎng)條件:氣相:空氣,95%;CO25%

小鼠直腸黏膜上皮細(xì)胞體外培養(yǎng)周期有限;建議使用配套的專用生長培養(yǎng)基及正確的操作方法來培養(yǎng),以此保證該細(xì)胞的佳培養(yǎng)狀態(tài)。

方法簡介

實(shí)驗(yàn)室分離的小鼠直腸黏膜上皮采用先機(jī)械分離法、后膠原酶消化法并通過上皮細(xì)胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來,細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。

質(zhì)量檢測(cè)

實(shí)驗(yàn)室分離的小鼠直腸黏膜上皮經(jīng)Cytokeratin-18免疫熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。

小鼠直腸黏膜上皮原代細(xì)胞

1、細(xì)胞傳代:細(xì)胞密度達(dá)到80-90%時(shí)即可傳代

①棄去培養(yǎng)上清,用PBS或生理鹽水清洗1-2次;

②加入2ml0.25%(T25瓶),使覆蓋整個(gè)瓶或皿,蓋好放入培養(yǎng)箱消化;

③1-2min后,顯微鏡下觀察細(xì)胞,若大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落,輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化;若細(xì)胞還是貼壁,放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止;

④將細(xì)胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,棄上清;

⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中,T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基;

⑥懸浮細(xì)胞直接離心收集,細(xì)胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中。

2、細(xì)胞復(fù)蘇:

①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化,時(shí)間1min左右,加入4-5ml培養(yǎng)基混勻。

②在1000RPM左右條件下離心4min,棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻,將細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中,補(bǔ)加適量培養(yǎng)基。

3、細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時(shí)進(jìn)行細(xì)胞凍存保種

①棄去培養(yǎng)上清,用PBS或生理鹽水清洗1-2次,加入1mL 0.25%(T25瓶)

②1-2min后,顯微鏡下觀察細(xì)胞,大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落,輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化;

③將細(xì)胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,棄上清,加1ml凍存液重懸細(xì)胞;

④將凍存管放入程序降溫盒,放入-80℃冰箱,4小時(shí)后將凍存管轉(zhuǎn)入液氮罐儲(chǔ)存。

小鼠直腸黏膜上皮原代細(xì)胞

小鼠直腸黏膜上皮原代細(xì)胞

1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有 1mL 細(xì)胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍,加 入 4mL 培養(yǎng)基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘,棄去上清液,補(bǔ) 加 1-2mL 培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培 養(yǎng)過夜(或?qū)?細(xì)胞懸液加入 10cm 皿中,加入約 8ml 培養(yǎng)基,培養(yǎng)過夜)。第二天換液并 檢查細(xì)胞密度。

2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá) 80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤洗細(xì)胞 1-2 次。

2. 加 1ml 消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于 37℃培 養(yǎng)箱中消化 1-2 分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分 變圓并脫落,迅速拿回操作臺(tái),輕敲幾下培養(yǎng) 瓶后加少量培養(yǎng)基終止消 化。

3. 按 6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘,棄去上清液,補(bǔ)加 1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻。

4. 將細(xì)胞懸液按 1:2 比例分到新的含 8ml 培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

3)細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時(shí),可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面 T25 瓶為類;

1. 細(xì)胞凍存時(shí),棄去培養(yǎng)基后,PBS 清洗一遍后加入 1ml ,細(xì)胞變圓 脫 落后,加入 1ml 含血清的培養(yǎng)基終止消化,可使用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)。

小鼠直腸黏膜上皮原代細(xì)胞

二氫還原酶缺陷型中國倉鼠卵巢細(xì)胞;CHO/dhFr- 食管癌細(xì)胞,TE-11細(xì)胞 B82細(xì)胞,鼠細(xì)胞系

核糖核酸酶Dicer抗體

T細(xì)胞調(diào)控相關(guān)蛋白抗體

細(xì)胞外基質(zhì)底物反應(yīng)蛋白1抗體

錨定蛋白B抗體

電壓依賴性鈣通道Cav3.1抗體

腫瘤Nova2抗原抗體

氫鉀ATP酶通道蛋白抗體

血管緊張素Ⅱ2型受體相互作用蛋白抗體

甲狀腺轉(zhuǎn)錄因子-2抗體

B16-F10, 小鼠黑色素瘤高轉(zhuǎn)移細(xì)胞 Mouse

IMR-32 人母細(xì)胞瘤細(xì)胞

CEM/C1人急性淋巴細(xì)胞白血病細(xì)胞   CEM/C1 human acute lymphoblastic leukemia cells RPMI-1640(GIBCO)+10%FBS

VEGFA Protein Mouse 重組小鼠 VEGFA / VEGF164 蛋白

人骨骼肌成肌細(xì)胞RNAHSkMM miRNA5 μg

L-O2(人正常肝細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2

家兔骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞;2012083MSC

CL-0300NCI-H661(人大細(xì)胞肺癌細(xì)胞)5×106cells/瓶×2

ScaBER細(xì)胞,人膀胱鱗癌細(xì)胞 小鼠結(jié)腸癌細(xì)胞,C26細(xì)胞 RLFs, 大鼠肺成纖維細(xì)胞

小鼠直腸黏膜上皮原代細(xì)胞電壓依賴性鈣通道Cav3.1抗體

猴腎細(xì)胞;Vero IgCD4

NAMALWAButt's淋巴瘤細(xì)胞 NAMALWA human Butt's lymphoma cells RPMI-1640(GIBCO)+10%FBS

PA317(小鼠成纖維細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 食蟹猴   CD1E & B2M Heterodimer 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照)

白細(xì)胞介素-17超家族

大鼠關(guān)節(jié)軟骨細(xì)胞培養(yǎng)基 100mL

調(diào)節(jié)染色體組裝激酶1抗體

鈣調(diào)酸酶B亞基B1抗體

人細(xì)胞;Hela

原鈣粘附蛋白α3抗體

丙型肝炎NS2反式調(diào)節(jié)蛋白/衰老相關(guān)的基因10蛋白抗體

類皰疹病毒8 ORF14抗體

B16-F10, 小鼠黑色素瘤高轉(zhuǎn)移細(xì)胞 Mouse

 


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