氧化應(yīng)激檢測——氧化損傷生物標記物解決方案

氧化應(yīng)激（Oxidative Stress，OS）是指體內(nèi)氧化與抗氧化作用失衡的一種狀態(tài)，傾向于氧化，導(dǎo)致中性粒細胞炎性浸潤，蛋白酶分泌增加，產(chǎn)生大量氧化中間產(chǎn)物。氧化應(yīng)激是由自由基在體內(nèi)產(chǎn)生的一種負面作用，并被認為是導(dǎo)致衰老和疾病的一個重要因素。

氧化應(yīng)激可通過測量活性氧（ROS）來直接評估，或通過過度產(chǎn)生的ROS對脂質(zhì)，蛋白質(zhì)和核酸造成的相關(guān)損害來間接評估。盡管直接測量ROS是理想的方法，但是與ROS的瞬時特性相比，通常更依賴于間接方法因為生物分子上的損傷標記相對穩(wěn)定。

為了幫助您確定在實驗系統(tǒng)中適合使用的方法，艾美捷科技作為專業(yè)的生命科學(xué)領(lǐng)域解決方案供應(yīng)商，為您推薦Cayman Chemical品牌的氧化損傷相關(guān)產(chǎn)品。以下是用于檢測常見的氧化損傷生物標記物的分析技術(shù)的分類。

ROS：氧氣作為正常代謝的一部分被電子還原，導(dǎo)致形成各種ROS，包括過氧化氫（H2O2）和超氧化物（O2•-）。當不受控制的氧化對生物系統(tǒng)造成壓力時，會對細胞大分子造成損害。ROS的測定不能識別ROS產(chǎn)生的來源（即正常狀態(tài)與疾病狀態(tài)），但是如果實驗?zāi)Ｐ吞幱趬毫ο?，則ROS可能增加并且分子成分改變。

過氧化氫分析試劑盒Hydrogen Peroxide Cell-Based Assay Kit，#600050 利用ADHP（靈敏穩(wěn)定的H2O2探針），并包含過氧化氫酶以檢查試驗的特異性。

RNS：在氧化應(yīng)激過程中也會產(chǎn)生活性氮（RNS）。由一氧化氮合酶（NOS）和O2•-合成的高含量一氧化氮（NO•）導(dǎo)致過氧亞硝酸鹽的形成。NO•本身也與硫醇和鐵硫酶反應(yīng)，而過氧亞硝酸鹽與酪氨酸殘基反應(yīng)形成硝基酪氨酸。

Nitrate/Nitrite Colorimetric Assay試劑盒 Nitrate/Nitrite Colorimetric Assay Kit，#780001 將少量添加的NADPH與催化系統(tǒng)結(jié)合使用，將用過的NADP+循環(huán)回NADPH以避免NADPH干擾Griess試劑的化學(xué)性質(zhì)；對于血漿和尿液等液體的分析非常有效，但不能通過體外NOS分析（添加了過量的NADPH）進行NO2-和NO3-分析。

DNA/RNA損傷：鳥嘌呤是DNA和RNA損傷時容易氧化的堿基。為糾正這種損傷而啟動的修復(fù)過程將下列氧化的鳥嘌呤類釋放到尿液中：

8-羥基鳥嘌呤——無核糖的堿

8-羥基鳥苷——RNA的核苷

8-羥基-2-脫氧鳥苷——DNA的脫氧核苷

可以檢測多種氧化鳥嘌呤種類的測定法比只限于分析一種（例如8-羥基-2-脫氧鳥苷）的測定法能捕獲更多的氧化損傷生物學(xué)相關(guān)產(chǎn)物。

8-OHdG ELISA檢測試劑盒 8-hydroxy-2-deoxy Guanosine EIA Kit，#589320 單克隆抗體能夠檢測8-羥基-2-脫氧鳥苷（DNA氧化損傷標記物），8-羥基鳥苷（RNA損傷標記物）和8-羥基鳥嘌呤（DNA/RNA損傷標記物），對8-羥基-2-脫氧鳥苷有高的選擇性和靈敏度；盡管高斜率表明檢測到其他未知物質(zhì)，但與LC/MS測量的8-羥基-2-脫氧鳥苷相關(guān)

蛋白質(zhì)氧化和硝化：蛋白質(zhì)氧化的常見標志是蛋白質(zhì)羰基含量。氧化還原循環(huán)陽離子與蛋白質(zhì)結(jié)合，并與ROS的攻擊結(jié)合，導(dǎo)致形成含有羰基（酮，醛）的氨基酸衍生物。香煙煙霧和醛類也會將羰基引入蛋白質(zhì)中。另外，ROS暴露于蛋白質(zhì)的蛋氨酸殘基會產(chǎn)生蛋氨酸亞砜（MetO），這是一種氧化修飾，如果未被MetO還原酶逆轉(zhuǎn)，則會進一步氧化為蛋氨酸砜，并可能導(dǎo)致蛋白質(zhì)功能障礙。

蛋白質(zhì)上硝基酪氨酸的存在用作NO•與 O2•−反應(yīng)時體內(nèi)形成的過氧亞硝酸鹽的標志物。當過氧亞硝酸鹽經(jīng)歷雜化裂解時，釋放出的硝化氮離子硝酸鹽蛋白酪氨酸殘基。NO•可以通過RNS介導(dǎo)的S-亞硝基化過程直接修飾蛋白質(zhì)，其中NO•基團與蛋白質(zhì)半胱氨酸殘基的硫醇基結(jié)合，從而形成S-NO部分。

脂質(zhì)過氧化：脂質(zhì)過氧化導(dǎo)致不飽和脂質(zhì)的高反應(yīng)性和不穩(wěn)定的氫過氧化物的形成。 它們可以通過不穩(wěn)定的氫過氧化物的各種分解產(chǎn)物（例如烷烴，酮，醛）直接或間接評估。通過組織脂質(zhì)的隨機氧化產(chǎn)生的8-異前列腺烷目前被認為是體內(nèi)脂質(zhì)過氧化可靠的生物標記之一。它是脂質(zhì)過氧化作用的特定產(chǎn)物，其穩(wěn)定且在所有正常生物體液和組織中的含量均可檢測到。磷脂中酯化水平的測量可用于確定目標靶位點脂質(zhì)過氧化的程度。

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