艾美捷RBOHD丨呼吸爆發(fā)氧化酶同源蛋白D應(yīng)用舉例

RBOHD（呼吸爆發(fā)氧化酶同源蛋白D）是一種鈣依賴性NADPH氧化酶，產(chǎn)生超氧化物。參與與病原體不相容相互作用過程中活性氧（ROS）的產(chǎn)生以及UV-B和脫落酸ROS依賴的信號轉(zhuǎn)導(dǎo)。

中文名稱：RBOHD|呼吸爆發(fā)氧化酶同源蛋白D

英文名字：RBOHD | Respiratory burst oxidase homolog protein D

Agrisera編號：AS15-2962

應(yīng)用類型：Immunofluorescence (IF), Western blot (WB)

免疫原：KLH-conjugated peptide chosen from Arabidopsis thaliana RBOHD sequence, UniProt:Q9FIJ0, TAIR: AT5G47910

來源宿主：兔

反應(yīng)性：擬南芥, Solanum sp.

保存建議：Store lyophilized/reconstituted at -20°C; once reconstituted make aliquots to avoid repeated freeze-thaw cycles. Please remember to spin the tubes briefly prior to opening them to avoid any losses that might occur from material adhering to the cap or sides of the tube.

艾美捷RBOHD|呼吸爆發(fā)氧化酶同源蛋白D#AS15-2962應(yīng)用舉例：

圖：從10或12株7日齡擬南芥Col-0（野生型）和rbohd空突變體（Nühse）幼苗中分離得到總蛋白等人，2007年）。16µl總蛋白在65℃變性5分鐘，在8%SDS-PAGE上分離。并使用儲罐輸送系統(tǒng)至硝化纖維素膜。用1xPBS+0.1%吐溫20+5%牛奶（PBS-T）或TBS+0.1%吐溫20阻斷雜交（TBS-T）+5%牛奶，室溫（RT）攪拌2 h。一級抗體稀釋至1:2500和1:5000分別在4oC和1xPBS-T pr TBS-T+5%牛奶中攪拌培養(yǎng)。傾析一級抗體溶液，并在1xPBS-T或TBS-T中攪拌RT洗滌印跡3次（每次7分鐘）。根據(jù)制造商的建議，用二級抗體山羊-兔HRP偶聯(lián)物（AS09 602，Agrisera）稀釋至1:20，000培養(yǎng)，并用化學(xué)發(fā)光檢測試劑顯影。X射線膠片曝光時間為2分鐘。作為同一膜的對照部分，用抗CNX1/2抗體（AS12 2365，Agrisera）孵育。