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細(xì)胞衰老是細(xì)胞停止分裂的現(xiàn)象。衰老可由內(nèi)部(氧化應(yīng)激、DNA損傷等)和外部(毒素、紫外線等)因素誘導(dǎo)。衰老是一種生長(zhǎng)停滯的狀態(tài),細(xì)胞在這種狀態(tài)下保持活力但停止分裂。衰老細(xì)胞表現(xiàn)出細(xì)胞大小增加,β-半乳糖苷酶、p53和P16活性的衰老相關(guān)表達(dá),以及基因表達(dá)模式的改變。
AkrivisBio 的衰老檢測(cè)試劑盒旨在檢測(cè)β-Gal活性。β-Gal主要存在于衰老細(xì)胞中,但在正常表達(dá)β-Gal的細(xì)胞(如成熟巨噬細(xì)胞)中可能出現(xiàn)假陽(yáng)性。
艾美捷AkrivisBio 細(xì)胞衰老染色試劑盒:
Catalog:COS-0102
Size: Includes reagents for staining 24-, 12-, 6- well plates
Sample Type:Cultured Adherent Cells
Species:All
Method of Detection:Light Microscopy
Assay Type:Qualitative
Application:To detect β-Gal activity in senescent cells under a light microscope.
Storage Conditions:4°C
Shipping Temperature:Gel Pack
Shelf Life:One year from the date of delivery
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目錄:COS-0102
尺寸:包括用于染色24、12、6孔板的試劑
樣品類型:培養(yǎng)的粘附細(xì)胞
物種:全部
檢測(cè)方法:光學(xué)顯微鏡
化驗(yàn)類型:定性
應(yīng)用:在光學(xué)顯微鏡下檢測(cè)衰老細(xì)胞中β-Gal的活性。
儲(chǔ)存條件:將試劑盒儲(chǔ)存在4°C溫度下。溶解X-gal后,將溶液儲(chǔ)存在-20°C,避光。
運(yùn)輸溫度:凝膠包裝
保質(zhì)期:一年
AkrivisBio 細(xì)胞衰老染色試劑盒組成:
固定液125 ml NM COS-0102-A
X-Gal(150 mg,凍干)1小瓶綠色COS-0102-B
含液125 ml WM COS-0102-C
含補(bǔ)充劑1.5 ml紅色COS-0102-D
-以下協(xié)議是為12孔板中的每個(gè)孔設(shè)計(jì)的。如果使用不同的板,則相應(yīng)地調(diào)整體積(例如,對(duì)于6孔板,將體積加倍,對(duì)于24孔板,將體積減半)。
-制備PBS溶液(未提供)。每孔3毫升。
-X-gal溶液:X-gal具有吸濕性。在打開小瓶之前,讓其達(dá)到室溫30分鐘。稱取20 mg X-gal至琥珀色或鋁箔包裹的管,加入1ml N,N-二甲基甲酰胺,制備20X儲(chǔ)備溶液。未使用的X-gal溶液可以在–20°C(避光)下儲(chǔ)存1-2個(gè)月。始終使用裝有X-gal溶液的聚丙烯或玻璃容器。請(qǐng)勿使用聚苯乙烯。
-固定液、染色液和染色補(bǔ)充劑(100X)可在4°C下儲(chǔ)存。
-如果使用染色溶液或染色補(bǔ)充液發(fā)生沉淀,將溶液加熱至37°C,使沉淀物重新溶解。如果沉淀仍然存在,離心小瓶并使用上清液。
衰老檢測(cè):
1.通過在孔邊緣抽吸從孔中取出培養(yǎng)基,并用1ml PBS洗滌細(xì)胞一次。
2.在室溫下用0.5ml固定液固定細(xì)胞10-15分鐘。細(xì)胞固定時(shí)準(zhǔn)備染色。準(zhǔn)備充分要染色的孔數(shù)的溶液。對(duì)于每口井,準(zhǔn)備:染色溶液470µl染色補(bǔ)充劑5µlX-gal在25µl DMF中
3.用1ml PBS洗滌細(xì)胞兩次。
4.向每個(gè)孔中加入0.5 ml的染色溶液混合物。蓋住盤子。在37°C下培養(yǎng)過夜。
5.在顯微鏡下觀察細(xì)胞是否出現(xiàn)藍(lán)色(40–400 X)。
6.對(duì)于染色板的長(zhǎng)期儲(chǔ)存,去除染色溶液并向細(xì)胞中添加70%甘油。在4°C下儲(chǔ)存。
艾美捷科技是AkrivisBio的中國(guó)代理商,為科研工作者提供優(yōu)質(zhì)的產(chǎn)品與服務(wù)。
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