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當(dāng)前位置:武漢艾美捷科技有限公司>>技術(shù)文章>>艾美捷AkrivisBio β-半乳糖苷酶染色試劑盒:簡(jiǎn)單、靈敏
大腸桿菌LacZ基因是用于檢測(cè)載體介導(dǎo)的基因轉(zhuǎn)移的表達(dá)效率的常用報(bào)告基因。它也經(jīng)常用于研究基因啟動(dòng)子調(diào)控。LacZ編碼β-半乳糖苷酶,這是一種幾乎完-全理想的表達(dá)選擇,因?yàn)樗浅7€(wěn)定,對(duì)蛋白水解降解具有抗性,能夠利用多種底物,并且易于原位檢測(cè)。
AkrivisBio 的β-半乳糖苷酶染色試劑盒是一種簡(jiǎn)單、靈敏的檢測(cè)方法,它利用X-Gal(一種無(wú)色底物),產(chǎn)生強(qiáng)烈的藍(lán)色不溶性靛藍(lán)產(chǎn)物,在顯微鏡下很容易觀察到。
艾美捷AkrivisBio β-半乳糖苷酶染色試劑盒:
Catalog:COS-0104
Size: Includes reagents to stain 20 x 12-well plates or the equivalent volume of 6 or 24-well plates.
Sample Type:Adherent Cells, Suspension Cells
Species:All
Method of Detection:Light Microscopy
Assay Type:Qualitative
Application:For visualizing β-Galactosidase activity in cells under a light microscope.
Range The response is highly linear between 10000 – 100000 cells per well
Storage Conditions:-20°C
Shipping Temperature:Gel Pack
Shelf Life:One year from the date of delivery
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目錄:COS-0104
尺寸:包括用于染色20 x 12孔板或等效體積的6或24孔板的試劑。
樣品類(lèi)型:粘附細(xì)胞、懸浮細(xì)胞
物種:全部
檢測(cè)方法:光學(xué)顯微鏡
化驗(yàn)類(lèi)型:定性
應(yīng)用:用于在光學(xué)顯微鏡下觀察細(xì)胞中β-半乳糖苷酶的活性。范圍反應(yīng)高度線(xiàn)性,每孔10000–100000個(gè)細(xì)胞
儲(chǔ)存條件:-20°C
運(yùn)輸溫度:凝膠包裝
保質(zhì)期:一年
AkrivisBio β-半乳糖苷酶染色試劑盒組成:
固定劑125 ml NM COS-0104-A
X-Gal凍綠COS-0104-B
染色緩沖液125 ml WM COS-0104-C
染色補(bǔ)充1.5 ml紅色COS-0104-D
用戶(hù)提供的材料:
PBS~1L
DMSO或DMF
聚丙烯管,如Eppendorf和類(lèi)似的帶帽錐形微管。不要使用聚苯乙烯容器。70%甘油
染色方案:
A.一般考慮:
該方案是為12孔培養(yǎng)板中的孔設(shè)計(jì)的。如果使用其他板,則按比例增加或減少體積。
B.試劑制備:
將20 mg X-Gal溶解在1 ml DMSO或DMF中,提供20倍儲(chǔ)備溶液。未使用的X-Gal溶液可以在–20°C下儲(chǔ)存長(zhǎng)達(dá)一個(gè)月。
注意:一定要使用聚丙烯容器或玻璃制作和儲(chǔ)存X-gal。不要使用聚苯乙烯。如果發(fā)生沉淀,只需加熱溶液即可重新溶解沉淀。
C.污點(diǎn):
取出培養(yǎng)基并用1ml PBS洗滌細(xì)胞一次。在室溫下用0.5毫升Fixative固定細(xì)胞10-15分鐘。當(dāng)細(xì)胞處于固定劑中時(shí),僅使用聚丙烯管制備以下染色溶液。每個(gè)孔需要0.5 ml。準(zhǔn)備足夠的染色溶液,用于使用:染色緩沖液:470µl染色補(bǔ)充液:5µl20 mg/ml X-gal在DMF 25µl4中染色的孔數(shù)。用1ml PBS洗滌細(xì)胞兩次。向每個(gè)孔中加入0.5 ml染色溶液,蓋上平板,在37°C.6下孵育過(guò)夜。第二天,在顯微鏡下以約200倍的放大倍數(shù)觀察細(xì)胞的藍(lán)色。為了長(zhǎng)期保存染色板,去除染色溶液并用70%甘油覆蓋細(xì)胞。在4°C下儲(chǔ)存。
艾美捷科技是AkrivisBio的中國(guó)代理商,為科研工作者提供優(yōu)質(zhì)的產(chǎn)品與服務(wù)。
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