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細(xì)胞增殖的檢測對于評估細(xì)胞健康、確定基因毒性或評估抗癌藥物至關(guān)重要。到目前為止,直接測量DNA合成是最準(zhǔn)確的方法,通常通過將核苷類似物如[3H]胸苷或5-溴-2'-脫氧尿苷摻入細(xì)胞復(fù)制來進(jìn)行,然后分別通過放射自顯影或用抗BrdU抗體檢測或觀察。
EdUCellProliferation試劑盒,用于成像(綠色熒光)是BrdU測定的一種新的替代品。EdU(5-乙炔基-2′-脫氧尿苷)是胸苷的核苷類似物,在活性DNA合成過程中被摻入DNA。與BrdU測定相比,EdU點(diǎn)擊分析不是基于抗體的,因此不需要DNA變性(通常使用HCl或加熱或用DNase消化)來檢測結(jié)合的核苷。檢測基于點(diǎn)擊反應(yīng),這是疊氮化物和萘醌之間銅催化的共價反應(yīng),在30分鐘內(nèi)完成。
艾美捷EdU法細(xì)胞增殖成像分析試劑盒(綠色熒光)基本參數(shù):
目錄號:D-AKK2030
規(guī)格:100T
儲存:在-20°C下儲存12個月,避光
EdU法細(xì)胞增殖成像分析試劑盒(綠色熒光)供應(yīng)材料和儲存條件:
EdU法細(xì)胞增殖成像分析試劑盒(綠色熒光)試劑準(zhǔn)備:
EdU(10 mM):隨附隨用。使用前將其平衡至室溫。儲存溫度為-20°C。
BSA洗滌液(1×):加入PBS將BSA洗滌溶液(5×)稀釋成1×工作溶液(最終濃度為3%BSA/PBS),混合均勻。等分后,溶液可在-20°C下穩(wěn)定儲存6個月。
AbFluor 488疊氮化物:供應(yīng)即用。使用前將其平衡至室溫。儲存溫度為-20°C,避光。
10×反應(yīng)緩沖液:供應(yīng)時即可使用。使用前將其平衡至室溫。儲存在20°C的溫度下。銅試劑:隨附即用。使用前將其平衡至室溫。儲存溫度為4℃。
還原劑(10x)的制備:向還原劑中加入去離子水,制備最終濃度為100 mg/mL的還原劑(10 x),并攪拌至化合物完-全溶解。等分后,溶液可在-20°C下儲存6個月。如果溶液變?yōu)樽厣?,則表示組件已降級,不建議繼續(xù)使用。
Hoechst 33342(1x):使用前用PBS以1:1000的比例稀釋1×Hoechst 333 42工作溶液。保存溫度為20℃,等分后避光。
羥基脲:DNA合成抑制劑。隨附隨用。使用前將其平衡至室溫。儲存溫度為4°C,等分后避光。
該試劑僅用于科學(xué)研究領(lǐng)域,不適用于臨床診斷或其他用途。
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