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已知 PARP1 催化 NAD 依賴性聚(ADP-核糖)添加到組蛋白上。
PARP1 化學(xué)發(fā)光檢測(cè)試劑盒設(shè)計(jì)用于測(cè)量 PARP1 活性,用于篩選和分析應(yīng)用。已知 PARP1 可催化 NAD 依賴性聚(ADP-核糖)添加到組蛋白上。PARP1 化學(xué)發(fā)光檢測(cè)試劑盒的關(guān)鍵是生物素化的 NAD+。使用該試劑盒,PARP1 反應(yīng)只需三個(gè)簡(jiǎn)單步驟。首先,將組蛋白包被在 96 孔板上。接下來,將生物素化的 NAD+ 混合物(稱為 PARP 底物混合物)與 PARP1 酶和活化的 DNA 模板在優(yōu)化的測(cè)定緩沖液中孵育。最后,用鏈霉親和素-HRP處理板,然后加入ELISA ECL底物以產(chǎn)生可以使用化學(xué)發(fā)光讀數(shù)儀測(cè)量的化學(xué)發(fā)光。
圖 1.PARP1 化學(xué)發(fā)光檢測(cè)試劑盒示意圖
艾美捷PARP1化學(xué)發(fā)光檢測(cè)試劑盒:
英文名稱:PARP1 Chemiluminescent Assay Kit
貨號(hào):80551
同義詞:聚(ADP-核糖)聚合酶1,聚(ADP-核糖基)轉(zhuǎn)移酶,ADPRT,PARP1,PARP-1
檢測(cè)試劑盒形式:化學(xué)發(fā)光
提供方式:PARP1 檢測(cè)試劑盒采用方便的 96 孔規(guī)格,包含純化的 PARP1 酶、組蛋白混合物、活化的 DNA 模板和用于 100 次酶反應(yīng)的 PARP 檢測(cè)緩沖液。
需要但未提供的材料:
DTT(10 mM水溶液,新鮮制備)
1x PBS(磷酸鹽緩沖液鹽水)緩沖液
PBST緩沖液(1x PBS,含有0.05%吐溫-20)
能夠讀取化學(xué)發(fā)光的光度計(jì)或酶標(biāo)儀
可調(diào)節(jié)微量移液器和無菌吸頭
旋轉(zhuǎn)或搖臂平臺(tái)
存儲(chǔ)和使用:
儲(chǔ)存/穩(wěn)定性:當(dāng)材料按照指示儲(chǔ)存時(shí),該檢測(cè)試劑盒將在收到之日起長(zhǎng)達(dá) 6 個(gè)月內(nèi)發(fā)揮最佳性能。
使用說明:有關(guān)詳細(xì)實(shí)驗(yàn)方案,請(qǐng)參閱檢測(cè)試劑盒數(shù)據(jù)表。
應(yīng)用:研究酶動(dòng)力學(xué)并篩選用于藥物發(fā)現(xiàn)和高通量 (HTS) 應(yīng)用的小分子抑制劑。
運(yùn)輸溫度:-80°攝氏度
*該試劑盒也適用于細(xì)胞提取物,但可檢測(cè)到非特異性核糖基化活性。
PARP1化學(xué)發(fā)光檢測(cè)試劑盒文獻(xiàn)引用:
Brown, J.A., Marala, R.B., J. Pharmacol. Toxicol. Methods. 2002;47:137-41.
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