AAT Bioquest生物偶聯(lián)：生物素和鏈霉親和素丨染料和試劑盒方案

AAT Bioquest致力于光譜學檢測領域，包括吸收（顏色），熒光和發(fā)光技術。AAT Bioquest的產(chǎn)品幫助科學家和生物醫(yī)藥研究者更好的了解生物化學，免疫學，細胞生物學和分子生物學等領域。AAT Bioquest會不斷介紹新產(chǎn)品，快速的豐富各個領域的產(chǎn)品。

艾美捷AAT Bioquest生物偶聯(lián)相關研究：

生物素和鏈霉親和素

染料到蛋白質偶聯(lián)

iFluor® 染料和試劑盒

mFluor™ 染料和試劑盒

蛋白質間偶聯(lián)

1、生物素-鏈霉親和素偶聯(lián)系統(tǒng)：

生物素-鏈霉親和素偶聯(lián)系統(tǒng)的廣泛采用主要歸因于兩個因素。首先是生物素和鏈霉親和素分子本身的尺寸相對較小，這允許與生物活性大分子（如抗體）廣泛結合，而不會阻抗其功能（即抗體的結合位點）。其次是生物素和鏈霉親和素相互結合的特異性以及隨后結合的強度，這使得強大的、流線型的生物測定應用成為可能。鏈霉親和素四聚體對生物素具有非常高的結合親和力，解離常數(shù) （Kd） 約為 ~10-14mol/L。這種緊密而特異性的結合速度很快，可以承受ji端的pH值、溫度、有機溶劑和變性試劑。

優(yōu)勢

生物素-鏈霉親和素系統(tǒng)的一個關鍵優(yōu)勢是它能夠提高檢測靈敏度。這在很大程度上是由于鏈霉親和素的四聚體構象。一種鏈霉親和素蛋白可以結合四個生物素分子，具有高親和力和選擇性。這種多重性能夠放大微弱信號，并通過簡單的工作流程提高哺乳動物細胞或組織中中等和低豐度靶標的檢測靈敏度。

另一個關鍵優(yōu)勢是生物素-鏈霉親和素系統(tǒng)的多功能性。由于鏈霉親和素可以與各種報告基因標簽偶聯(lián)，因此它可以很容易地摻入幾乎所有免疫測定中。例如，鏈霉親和素的酶偶聯(lián)物廣泛用于酶聯(lián)免疫吸附測定 （ELISA），而熒光標記的鏈霉親和素（如 iFluor® 488 鏈霉親和素）則廣泛用于細胞表面標記、熒光激活細胞分選 （FACS） 和其他熒光成像應用。

應用

酶聯(lián)免疫吸附試驗（ELISA）

免疫組化 （IHC）

功率苯胺信號放大，酪胺™的優(yōu)質替代品

免疫印跡

免疫熒光顯微鏡

細胞表面標記

親和純化

熒光激活細胞分選 （FACS）

流式細胞術

2、生物素：

生物素是一種 244 道爾頓半抗原小分子。其對鏈霉親和素的高結合親和力通常用于檢測和監(jiān)測感興趣的生物靶標。生物素具有兩個特性，使其成為生物偶聯(lián)物開發(fā)的理想選擇。首先，生物素的體積相對較小。這允許將多個生物素標簽標記到單個蛋白質或抗體上，而不會顯著阻礙其生物反應性。第二個是生物素分子的戊酸側鏈。該鏈可以衍生化，以促進用于將生物素與蛋白質偶聯(lián)的各種反應性基團摻入，而不會改變生物素對鏈霉親和素的結合親和力。

AAT Bioquest 提供生物素化的二抗、蛋白質、核苷酸和其他小分子，用于基于鏈霉親和素的擴增技術。對于無法獲得生物素化探針的檢測，我們提供了許多生物素化試劑和試劑盒，使研究人員能夠對蛋白質、核酸和表面材料進行化學標記，以制造定制的生物素化試劑。

特色產(chǎn)品

熒光生物素衍生物

生物素化次級

生物素化核苷酸

生物素化氨基酸

反應性生物素衍生物

ReadiLink™ 蛋白生物素化試劑盒

Amplite® 比色生物素定量試劑盒

3、熒光生物素衍生物

熒光生物素衍生物在同一分子中含有熒光團和生物素部分。這些試劑用于通過熒光檢測和定量生物素結合蛋白。與鏈霉親和素與熒光生物素結合相關的強猝滅可用于精確測量鏈霉親和素（或親和素）的濃度。

4、生物素化二抗

AAT Bioquest生物素化的二抗，用于基于鏈霉親和素的擴增技術。使用生物素化二抗的一個關鍵優(yōu)勢是，通過使用不同的鏈霉親和素偶聯(lián)物，可以靈活地在多種應用中使用相同的二抗。

現(xiàn)成的鏈霉親和素偶聯(lián)物

HRP-鏈霉親和素（成像需要 HRP 底物)

AP-鏈霉親和素（成像需要 AP 底物)

iFluor®-鏈霉親和素

mFluor™-鏈霉親和素

APC、PE和串聯(lián)染料鏈霉親和素（藻膽蛋白的強烈明亮熒光和快速光漂白非常適合流式細胞術應用）

5、生物素化核苷酸

生物素修飾的三磷酸核苷類似物，如 dUTP 和 dCTP，可以酶促摻入 DNA 或 RNA 片段中，用于熒光原位雜交 （FISH）、DNA 陣列、微陣列和其他雜交技術。標準的酶促非放射性 DNA 標記反應包括 3 端標記、cDNA 標記、缺口翻譯、PCR 和隨機引物標記。每個生物素化核苷酸在生物素與其在核苷酸上的附著點之間含有一個 11、14、16 或 20 原子間隔區(qū)。這有助于通過熒光團和鏈霉親和素偶聯(lián)物或瓊脂糖和磁珠進行檢測和信號放大。

6、生物素化氨基酸

生物素化肽適用于免疫檢測研究和生物醫(yī)學篩選測定，這些研究需要固定在鏈霉親和素或親和素包被的微量滴定板、微球或膜上。在Fmoc固相合成過程中，生物素可以與肽的N端或賴氨酸（Lys）、谷氨酸（Glu）或天冬氨酸（Asp）的側鏈連接。在 FMOC-Glu（生物素基-PEG）-OH 和 FMOC-Asp（生物素-PEG）-OH 中摻入 PEG 間隔區(qū)可減少靶肽和鏈霉親和素之間的空間位阻，從而更好地結合生物素。PEG間隔區(qū)的親水性可最大限度地減少非特異性相互作用，并提高試劑和生物素化肽的溶解度。

7、反應性生物素衍生物

反應性生物素衍生物含有反應性部分，如琥珀酰亞胺酯或馬來酰亞胺，有助于將生物素標記到蛋白質、抗體和其他大分子上。選擇反應性生物素衍生物時，請考慮以下幾點：

功能基團靶向 - 特定的反應性部分靶向并結合其各自的官能團，以實現(xiàn)蛋白質和其他大分子的靶向或非選擇性生物素化（例如，琥珀酰亞胺酯靶向伯胺，馬來酰亞胺靶向硫醇或巰基）。

溶解度 - 這會影響目標蛋白或大分子的生物素化。

間隔臂長度 （PEG） - 提高靶蛋白的檢測靈敏度并減少空間位阻。

ReadiView™ 生物素化試劑

確定蛋白質的生物素化程度是相當具有挑戰(zhàn)性的，因為生物素的內在吸收很難從蛋白質和核酸中辨別出來。為了促進這種測定，我們提供了一系列發(fā)色團反應性生物素衍生物ReadiView™生物素。

這些新型生物素化試劑包含一個專門設計的“色標 （CT）"，該標簽最佳位置位于兩個間隔臂之間。這些間隔臂可減少空間位阻并提高水溶性，而 CT 標簽可通過計算 280 nm/385 nm 的吸收比輕松量化生物素化程度。CT標簽不影響生物素與鏈霉親和素的絡合，并且對熒光鏈霉親和素偶聯(lián)物的淬滅作用最小。ReadiView™ 生物素有胺反應性、巰基反應性和點擊化學形式。

8、酶標記的鏈霉親和素偶聯(lián)物

酶標記的鏈霉親和素偶聯(lián)物通常用于酶聯(lián)免疫吸附測定 （ELISA）、免疫組化、免疫印跡和原位雜交技術。辣根過氧化物酶 （HRP） 和堿性磷酸酶 （ALP） 因其高周轉率、穩(wěn)定性、易于偶聯(lián)和低成本而被廣泛用作報告基因標簽。

為了最大限度地保留酶和蛋白質活性，我們的 HRP-鏈霉親和素和 AP-鏈霉親和素偶聯(lián)物以 1：1（酶與鏈霉親和素）標記比制備。顯色、熒光和化學發(fā)光底物可用于這些酶偶聯(lián)物。

9、熒光鏈霉親和素偶聯(lián)物

熒光鏈霉親和素偶聯(lián)物廣泛用于熒光成像，以檢測生物素化抗體、配體和 DNA 探針，用于原位雜交技術、免疫組化和多色流式細胞術。我們提供用 iFluor 染料、mFluor®™ 染料、藻膽蛋白、串聯(lián)染料等標記的熒光鏈霉親和素的綜合產(chǎn)品組合。我們的 iFluor® 鏈霉親和素偶聯(lián)物的優(yōu)點包括異常明亮的熒光、出色的光穩(wěn)定性和在較寬摩爾范圍內對 pH 值不敏感的熒光。

iFluor® 鏈霉親和素偶聯(lián)物

用 iFluor 染料標記的鏈霉親和素偶聯(lián)物表現(xiàn)出異常明亮且光穩(wěn)定的熒光，優(yōu)于 Alexa Fluor®® 和其他光譜相似的偶聯(lián)物。iFluor® 鏈霉親和素偶聯(lián)物設計用于各種細胞分析和蛋白質分析應用，包括成像、流式細胞術和熒光免疫印跡。作為預防措施，在檢測低豐度靶標時避免使用藍色熒光鏈霉親和素偶聯(lián)物。與其他染料相比，藍色熒光染料具有較低的熒光，并且可以經(jīng)歷更高的非特異性背景。

10、用于流式細胞術的mFluor™鏈霉親和素偶聯(lián)物

用 mFluor™ 染料標記的鏈霉親和素偶聯(lián)物表現(xiàn)出最小的自淬滅，可產(chǎn)生用于流式細胞術的強烈熒光和光穩(wěn)定偶聯(lián)物。mFluor™ 鏈霉親和素偶聯(lián)物設計用于流式細胞儀中常用的主要激光譜線之一（如 405 nm、488 nm、532 nm、561 nm 或 633 nm 激光譜線）的最佳激發(fā)。

11、用于流式細胞術的鏈霉親和素 APC、PE、PerCP 和串聯(lián)染料偶聯(lián)物

鏈霉親和素 PE、APC 和 PerCP 偶聯(lián)物通常用于需要高靈敏度但不具有光穩(wěn)定性的應用，主要是流式細胞術、流式細胞儀、免疫表型分析和微陣列。藻膽蛋白異常明亮的熒光是由于其異常高的消光系數(shù)和量子產(chǎn)率。

串聯(lián)染料偶聯(lián)了標記的供體藻膽蛋白（例如 APC 或 PE）與受體 iFluor 染料的妥協(xié)，這些受體 iFluor® 染料以更長的波長發(fā)出熒光。使用熒光共振能量轉移 （FRET），供體藻膽蛋白吸收的光導致受體的熒光發(fā)射。在流式細胞術中，串聯(lián)染料非常適合細胞的多色參數(shù)分析，因為它們利用了單一激發(fā)源和顯著較大的斯托克斯位移。

12、鏈霉親和素-Xtra™ 偶聯(lián)物

鏈霉親和素-Xtra™ iFluor® 偶聯(lián)物的最佳標記程度可產(chǎn)生最明亮的熒光鏈霉親和素偶聯(lián)物，用于在細胞成像、流式細胞術和蛋白質印跡應用中檢測生物素化抗體。鏈霉親和素-Xtra™ iFluor 偶聯(lián)物對低豐度靶標成像，比傳統(tǒng)鏈霉親和素 Alexa Fluor®® 偶聯(lián)物具有更高的靈敏度和細節(jié)。

優(yōu)勢

明亮且光穩(wěn)定的熒光，無明顯的自猝滅

高信噪比：信號比 Alexa Fluor® 提高 3~5 倍

在較寬的摩爾范圍內對 pH 值不敏感的熒光

艾美捷科技是AAT Bioquest的中國代理商，為科研工作者提供優(yōu)質的產(chǎn)品與服務。