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三維凝膠可以用于研究細胞發(fā)育、遷移和形態(tài)的機械性質對細胞外基質(ECM)的影響,如密度和剛度。與二維系統(tǒng)不同,三維環(huán)境使細胞伸展能夠同時與細胞表面的整合素相互作用,從而激活特定的信號通路。凝膠的剛度或剛性在三維環(huán)境與二維環(huán)境中對細胞遷移產(chǎn)生不同的影響。此外,在三維系統(tǒng)中,還可能出現(xiàn)與整合素無關的機械相互作用,這是由于基質纖維與細胞伸展物相互交織,而在二維系統(tǒng)中,細胞附著在平坦表面上,無法發(fā)生這種情況。
Advanced BioMatrix/艾美捷PhotoCol 甲基丙烯酸膠原蛋白,100 毫克,含LAP套件(ABM-5270-1KIT),一種純化的甲基丙烯酰化I型牛膠原套裝,可在不同濃度下制備,并通過藍光交聯(lián),提供類似天然的可調(diào)節(jié)的三維膠原凝膠。PhotoCol®套裝由純化的甲基丙烯?;?span style="font-family: Calibri;">I型牛膠原作為核心成分,配合套裝中的其他支持試劑。
甲基丙烯?;?span style="font-family: Calibri;">I型膠原蛋白是由保留端肽完整的牛膠原產(chǎn)生的,其中膠原蛋白經(jīng)過改性反應,主要是對賴氨酸殘基的ε-氨基基團以及N-末端的α-氨基基團進行反應修飾。膠原蛋白分子中超過20%的賴氨酸殘基已經(jīng)進行了甲基丙烯酰化。
膠原蛋白是從牛皮中提取的,含有高含量的單體。膠原蛋白的起始原料是從一個封閉的養(yǎng)殖群體中分離出來的,并通過受控制的制造過程進行純化。20毫摩爾乙酸溶液用于在濃度范圍為3至8毫克/毫升的情況下使凍干的甲基丙烯酰化膠原蛋白溶解。中和溶液由堿性的10倍磷酸鹽緩沖鹽溶液(PBS)組成,在最終混合物中提供生理鹽和中性pH值。光引發(fā)劑溶液由LAP組成,可以在1倍PBS或細胞培養(yǎng)基中配制,以便在405納米處對膠原蛋白進行藍光光交聯(lián)。為了進行滅菌處理,需要重新懸浮并通過0.2微米的按鈕過濾器進行過濾。
Advanced BioMatrix PhotoCol 甲基丙烯酸膠原蛋白,100 毫克,含LAP套件存儲說明:
存儲/穩(wěn)定性:產(chǎn)品在冷凍凝膠包裝上發(fā)貨。收到后,將膠原蛋白、乙酸和光引發(fā)劑存放在2至10攝氏度的溫度下,不要冷凍。將中和溶液存放在室溫下。產(chǎn)品標簽和適用的分析證書上印有有效期限。有效期適用于按照指示進行處理和儲存的產(chǎn)品。在使用乙酸溶解膠原蛋白后,當在2至10攝氏度下儲存時,膠原溶液可以穩(wěn)定保存2個月。
凝膠硬度:PhotoCol®試劑盒旨在提供基于膠原蛋白濃度和交聯(lián)的不同硬度的膠凝膠。光強度、蛋白質濃度、光引發(fā)劑濃度、光交聯(lián)時間和其他變量將影響聚合性能。
制備說明:
注意:在制備和處理膠原蛋白和其他溶液的過程中,采用無菌操作以保持產(chǎn)品的無菌性。
注意:建議在制備膠原蛋白時將膠原蛋白和其他工作溶液冷藏并放在冰上。
注意:不建議在任何步驟中使用渦旋混合。
注意事項和免責聲明:
本產(chǎn)品僅供研發(fā)使用,不用于人類或其他用途。有關危險和安全操作規(guī)程的信息,請參閱材料安全數(shù)據(jù)表。
文獻參考:
1. Gaudet, I. D., Characterization of MethacryatedType-I Collagen as a Dynamic PhotoactiveHydrogel, Biointerphases, 2012 Dec; 7(1): 25.
2. Drzewiecki K. E., Methacrylation Induces Rapid,Temperature-Dependent, Reversible Self-Assemblyof Type-I Collagen, Langmuir. 2014 Sep 23; 30(37):11204–11211.
Advanced BioMatrix是3D組織培養(yǎng)、細胞檢測和細胞增殖等領域實驗解決方案的佼-佼-者,在分離、純化、凍干、細胞培養(yǎng)和蛋白檢測、多肽粘附、附著因子、基質硬度和其他3D matrix 產(chǎn)品開發(fā)方面有著豐富的經(jīng)驗。競爭優(yōu)勢:
提供高純度和成分確定的胞外基質;
超過1000余篇文獻引用PureCol 膠原產(chǎn)品,品質非常均一;
在3D培養(yǎng)基領域可提供全面的產(chǎn)品線;
可提供特異性剛性有機硅基板的公司(CytoSoft);
可提供可溶性絲纖蛋白的供應商(可運用于多種3D培養(yǎng));
如果客戶首-次接觸3D膠原凝膠,Advanced BioMatrix是預制膠原蛋白(PureCol EZ gel)供應商。
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