Advanced BioMatrix丨HyStem巰基改性透明質(zhì)酸使用說明

HyStem巰基改性透明質(zhì)酸基于交聯(lián)巰基修飾透明質(zhì)酸技術(shù)。透明質(zhì)酸是存在于結(jié)締組織、上皮組織和神經(jīng)組織的胞外基質(zhì)中的天然成分。通過HyStem®，研究人員可以創(chuàng)建可定制的3D水凝膠，用于培養(yǎng)細(xì)胞，其自然環(huán)境富含透明質(zhì)酸。HyStem®水凝膠套裝包括：- Glycosil®（巰基修飾透明質(zhì)酸）- Extralink®-Lite（PEGDA，聚乙二醇丙烯酸二丙烯酯）- 重組緩沖液（PBS）HyStem®套裝組分混合后形成透明水凝膠。除了重組緩沖液外，其余組分均以凍干固體包裝，被氮?dú)獍⒃谳p微真空下長期儲(chǔ)存。

艾美捷HyStem巰基改性透明質(zhì)酸（ABM-GS310F）細(xì)胞附著：

HyStem®水凝膠系統(tǒng)提供了一種可變剛度的粘彈性基質(zhì)，支持干細(xì)胞的擴(kuò)張（迄今已測試了人類胚胎干細(xì)胞、CD34+和肝細(xì)胞前體細(xì)胞）。HyStem®水凝膠不支持表面細(xì)胞附著。細(xì)胞必須被封裝在水凝膠內(nèi)。細(xì)胞外基質(zhì)（ECM）蛋白或肽可以與Glycosil在交聯(lián)之前混合，以提供附著信號，并允許細(xì)胞附著在水凝膠表面。然而，添加的ECM蛋白類型取決于細(xì)胞類型和期望的結(jié)果（擴(kuò)張而無分化或伴隨分化）。

儲(chǔ)存Glycosil：儲(chǔ)存在-20°C，可保存一年。重組溶液必須在同一天使用，不能重新冷凍。Extralink-Lite：儲(chǔ)存在-20°C，可保存一年。重組溶液可在-20°C保存一個(gè)月。重組緩沖液：儲(chǔ)存在4°C或室溫，可保存一年。

HyStem巰基改性透明質(zhì)酸使用說明：

Glycosil和Extralink-Lite溶液通過用重組緩沖液溶解凍干固體來準(zhǔn)備。重組后，Glycosil和Extralink-Lite將在pH約為7.4的1X磷酸鹽緩沖液（PBS）中。按照說明重組后，套裝將能夠產(chǎn)生2.5、7.5或12.5毫升的材料以形成3D水凝膠。1）讓套裝組分室溫恢復(fù)1小時(shí)。2）使用注射器和針頭用重組緩沖液重組套裝組分。如果在重組過程中移除瓶塞，請盡量減少暴露在氧氣中，以避免潛在的自交聯(lián)。3）在加入重組緩沖液后，立即將每個(gè)小瓶渦旋幾秒鐘。將小瓶水平放置在搖床或搖床上。每隔15分鐘快速渦旋樣品。有些組分可能需要>2小時(shí)才能完-全溶解。加熱至37°C并輕輕渦旋將加速溶解。組分將變清澈且略帶黏稠。4）將Extralink-Lite以1:4的體積比例加入到Glycosil中形成3D水凝膠。1. - 對于2.5毫升和7.5毫升套裝：0.25毫升Extralink-Lite到1.0毫升Glycosil，對于2.5毫升和7.5毫升套裝- 對于12.5毫升套裝：2.5毫升Extralink-Lite到10.0毫升Glycosil2. 用移液器混合。3. 如果封裝細(xì)胞，請?jiān)诩尤?span style="font-family: Calibri;">Extralink-Lite之前將細(xì)胞沉淀重懸于Glycosil溶液中。來回移液以混合。4. 將所有組分混合后，等待5分鐘，然后再次用移液器混合以確保細(xì)胞均勻分布。5）將HyStem注入所需的培養(yǎng)皿。凝膠化將在約15分鐘內(nèi)開始，完-全凝膠化將在約90分鐘內(nèi)發(fā)生。