TeloCol-3，牛膠原蛋白溶液--一種高度純化的無氨酸膠原蛋白溶液

Advanced BioMatrix TeloCol-3，牛膠原蛋白溶液是一種高度純化的無氨酸膠原蛋白溶液，濃度約為3 mg/mL，pH值為2，經(jīng)過無菌過濾。TeloCol®-3約為97%的I型膠原蛋白，其余部分為III型膠原蛋白。TeloCol®膠原蛋白的純度≥99%。SDS-PAGE電泳顯示出膠原蛋白的典型α、β和γ帶狀圖案。實際膠原蛋白濃度已印在產(chǎn)品標簽和每個特定批次的分析證書上。TeloCol®-3是通過酸提取過程獲得的，保持了具有端肽的膠原鏈兩端的前肽區(qū)域，即N-端和C-端肽區(qū)域。

I型膠原蛋白是皮膚、骨骼、肌腱和其他纖維結締組織的主要結構組分，與其他膠原蛋白不同之處在于其低賴氨酸羥基化和低碳水化合物組成。盡管已經(jīng)確定了多種類型的膠原蛋白，但所有類型均由三肽鏈分子組成，這些鏈以三螺旋構象排列。主要結構（氨基酸序列）的輕微差異決定了不同類型之間的差異。主要結構的氨基酸序列主要是一個重復的基序，其中每三個位置都有甘氨酸，前面經(jīng)常是脯氨酸或4-羥脯氨酸。I型膠原蛋白是由兩條α1(I)鏈和一條α2(I)鏈組成的異源三聚體，在中性pH值和37°C時會自發(fā)形成三螺旋支架。

多細胞生物體內(nèi)的細胞生長、分化和凋亡取決于細胞與細胞外基質（ECM）的粘附。鑒于I型膠原蛋白是ECM的豐富組分，培養(yǎng)在三維（3D）膠原凝膠中的細胞比傳統(tǒng)的二維系統(tǒng)更好地模擬體內(nèi)細胞環(huán)境。已經(jīng)證明對多種細胞類型有效，包括心臟和角膜成纖維細胞、肝星狀細胞（HSCs）和神經(jīng)母細胞瘤細胞等。

許多疾病可能影響ECM的機械性能，而其他疾病狀態(tài)可能是由于ECM的密度或剛度變化引起的。由于I型膠原蛋白是ECM抗張性能的關鍵決定因素，3D膠原凝膠在機械傳導研究中非常有用，涉及將機械信號轉化為生化信號的細胞信號傳導。3D凝膠允許研究ECM的機械性能（如密度和剛度）對細胞發(fā)育、遷移和形態(tài)的影響。與2D系統(tǒng)不同，3D環(huán)境使細胞伸展能夠同時與所有細胞表面的整合素相互作用，從而激活特定的信號通路。凝膠的硬度或剛度也會在3D與2D環(huán)境中對細胞遷移產(chǎn)生不同影響。此外，由于在3D系統(tǒng)中細胞伸展與基質纖維的交織可能會導致整合素無關的機械相互作用，在2D系統(tǒng)中，細胞附著在平坦表面上，這種情況是不可能發(fā)生的。

細胞表面受體識別膠原三螺旋，不同類型的膠原亞型被一群結構和功能多樣的細胞表面受體識別。比較出名的是膠原受體是整合素α1β1和α2β1。α1β1是平滑肌細胞上的主要整合素，而α2β1是上皮細胞和血小板上的主要形式。這兩種形式在許多細胞類型上表達，包括成纖維細胞、內(nèi)皮細胞、成骨細胞、軟骨細胞和淋巴細胞。某些細胞類型還可能表達其他膠原受體，如介導血小板粘附和信號傳導的糖蛋白VI（GPVI）。其他膠原受體包括圓盤結構域受體、白細胞相關IG樣受體-1以及甘露糖受體家族的成員。

該產(chǎn)品是由從牛皮中提取的膠原蛋白制備而成，含有高單體含量。起始材料來自封閉牧場，并使用符合cGMP的制造工藝進行純化。該過程包含內(nèi)置的、經(jīng)過驗證的步驟，以確?？赡艿碾迷w和/或病毒污染物的滅活。

艾美捷TeloCol-3，牛膠原蛋白溶液（ABM-5026-1KIT）儲存/穩(wěn)定性：

儲存在2-10°C，并在冷凍膠冰包上發(fā)貨。不要冷凍。每個特定批次的產(chǎn)品標簽和分析證書上列有過期日期。只有在按照指示處理和儲存產(chǎn)品時，過期日期才適用。

注意事項和免責聲明：本品僅供研發(fā)使用，不適用于人類或其他用途。請參閱材料安全數(shù)據(jù)表以獲取有關危害和安全操作規(guī)范的信息。

TeloCol-3，牛膠原蛋白溶液涂層程序：

注意：采用無菌操作規(guī)范以保持產(chǎn)品在準備和處理過程中的無菌性。

1. 如有需要，將所需體積的TeloCol®-3膠原蛋白溶液從瓶中轉移至稀釋容器。使用無菌0.01 N HCl溶液進一步稀釋至所需濃度。典型的工作濃度可能在50至100微克/毫升之間。

注意：使用這些建議作為指導，確定您培養(yǎng)系統(tǒng)的最佳涂層條件。

2. 輕輕旋轉混合物，直至完-全混合。

3. 添加適量稀釋后的TeloCol®-3物質至培養(yǎng)表面，確保整個表面都被涂覆。

4. 在室溫下蓋上，孵育1-2小時。吸去任何剩余物質。或者在室溫下孵育，直至表面干燥。

5. 孵育后，吸去任何剩余物質。

6. 小心用無菌培養(yǎng)基或PBS仔細沖洗涂層表面，避免劃傷表面。

7. 涂層表面已準備就緒。如果保持無菌性，它們也可以在2-8°C潮濕或風干保存。