Advanced BioMatrix 鼠尾膠原溶液Ⅰ型在細(xì)胞培養(yǎng)中的作用

Advanced BioMatrix提供RatCol®膠原蛋白溶液，這是高度純化的約4毫克/毫升的端尾膠原蛋白，pH值為3-4，并經(jīng)過(guò)無(wú)菌過(guò)濾。RatCol®約97%為I型膠原，其余為III型膠原。RatCol®膠原的純度≥99%。SDS-PAGE電泳顯示了膠原的典型α、β和γ條帶圖案。每個(gè)特定批次的產(chǎn)品標(biāo)簽和分析證書上都印有實(shí)際的膠原蛋白濃度。RatCol®來(lái)源于酸提取過(guò)程，產(chǎn)生了在0.2M乙酸緩沖液中保持端肽完整的膠原蛋白。膠原鏈的兩端，N-端和C-端肽區(qū)域的原肽區(qū)域得以保留。

I型膠原是皮膚、骨骼、肌腱和其他纖維結(jié)締組織的主要結(jié)構(gòu)成分，與其他膠原蛋白不同之處在于其低賴氨酸羥基化和低碳水化合物組成。盡管已經(jīng)確定了多種類型的膠原蛋白，但它們都由三肽鏈分子組成，排列成三股螺旋構(gòu)象。主要結(jié)構(gòu)（氨基酸序列）中的細(xì)微差異形成了不同類型之間的區(qū)別。主要結(jié)構(gòu)的氨基酸序列主要是一個(gè)重復(fù)的基序，其中每三個(gè)位置都是甘氨酸，脯氨酸或4-羥脯氨酸常常位于甘氨酸殘基之前。I型膠原是由兩個(gè)α1(I)鏈和一個(gè)α2(I)鏈組成的異源三聚體，在中性pH和37°C下自發(fā)形成三股螺旋支架。

多細(xì)胞生物中的細(xì)胞生長(zhǎng)、分化和凋亡的控制取決于細(xì)胞與細(xì)胞外基質(zhì)（ECM）的粘附。鑒于I型膠原是ECM的豐富組成部分，培養(yǎng)在三維（3D）膠原凝膠中的細(xì)胞比傳統(tǒng)的二維系統(tǒng)更好地模擬體內(nèi)細(xì)胞環(huán)境。這已經(jīng)針對(duì)多種細(xì)胞類型進(jìn)行了證明，包括心臟和角膜成纖維細(xì)胞、肝星狀細(xì)胞（HSCs）和神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞。

一些疾病可能會(huì)影響ECM的機(jī)械特性，而其他疾病狀態(tài)可能是由于ECM密度或剛度的變化引起的。由于I型膠原是ECM拉伸特性的關(guān)鍵決定因素，3D膠原凝膠在機(jī)械傳導(dǎo)研究中很有用，涉及將機(jī)械信號(hào)轉(zhuǎn)化為生化信號(hào)的細(xì)胞信號(hào)傳導(dǎo)。

細(xì)胞表面的一群結(jié)構(gòu)和功能多樣的受體識(shí)別不同的膠原亞型，這些受體識(shí)別膠原三股螺旋。膠原受體是整合素α1β1和α2β1。α1β1是平滑肌細(xì)胞上的主要整合素，而α2β1是上皮細(xì)胞和血小板上的主要形式。這兩種形式在許多細(xì)胞類型上表達(dá)，包括成纖維細(xì)胞、內(nèi)皮細(xì)胞、成骨細(xì)胞、軟骨細(xì)胞和淋巴細(xì)胞。有些細(xì)胞類型還可能表達(dá)其他膠原受體，如糖蛋白VI（GPVI），它在血小板中介導(dǎo)粘附和信號(hào)傳導(dǎo)。其他膠原受體包括圓盤結(jié)構(gòu)域受體、白細(xì)胞相關(guān)IG樣受體-1以及甘露醛受體家族的成員。這種產(chǎn)品是從大鼠尾腱提取的膠原制備的，含有高單體含量。起始材料來(lái)自Sprague Dawley大鼠的受控群體，并使用符合cGMP的制造過(guò)程進(jìn)行純化。這個(gè)過(guò)程包含內(nèi)置的、經(jīng)過(guò)驗(yàn)證的步驟，以確保可能的朊原體和/或病毒污染物的滅活。這種產(chǎn)品非常適合涂覆表面，提供為培養(yǎng)細(xì)胞準(zhǔn)備薄層的操作。

艾美捷鼠尾膠原溶液Ⅰ型#ABM-5056-20ML參數(shù)說(shuō)明：

中文名稱：鼠尾膠原蛋白溶液，I 型，4 mg/ml，20 mL（2D 細(xì)胞培養(yǎng)）

英文名字：Rat Tail Collagen Solution, Type I, 4 mg/ml, 20 mL (2D Cell Culture)

貨號(hào)：ABM-5056-20ML

規(guī)格：20mL

存儲(chǔ)/穩(wěn)定性：該產(chǎn)品存放在2-10°C，并在冷凍凝膠包裝上發(fā)貨。不要冷凍。產(chǎn)品標(biāo)簽和每個(gè)特定批次的分析證書上列有有效期限。產(chǎn)品在按照指示處理和存儲(chǔ)時(shí)適用有效期限。

本品僅供研發(fā)用途，不適用于人類或其他用途。請(qǐng)查閱有關(guān)危害和安全操作規(guī)范的材料安全數(shù)據(jù)表。

鼠尾膠原溶液Ⅰ型涂層程序注意：

采用無(wú)菌操作規(guī)范以維持產(chǎn)品在膠原和其他溶液制備和處理過(guò)程中的無(wú)菌性。

1.如有需要，將所需體積的膠原溶液從瓶中轉(zhuǎn)移至稀釋容器。使用無(wú)菌0.1%乙酸溶液進(jìn)一步稀釋至所需濃度。典型的工作濃度范圍可能在50至100μg/ml之間。注意：請(qǐng)將這些建議作為指導(dǎo)，確定您培養(yǎng)系統(tǒng)的合適涂層條件。

2.向培養(yǎng)表面加入適量稀釋的大鼠尾膠原。

3.在室溫或37°C下蓋好孵育1-2小時(shí)。

4.孵育后，吸去任何剩余物質(zhì)。

5.用無(wú)菌培養(yǎng)基或PBS仔細(xì)沖洗涂層表面，避免刮傷表面。

6.涂層表面已準(zhǔn)備就緒。如果保持無(wú)菌性，也可以在2-8°C下潮濕或風(fēng)干存放。

艾美捷科技是Advanced BioMatrix的中國(guó)代理商，為科研工作者提供優(yōu)質(zhì)的產(chǎn)品與服務(wù)。