Jena Bioscience/艾美捷CuAAC細(xì)胞反應(yīng)緩沖液套件的組成及應(yīng)用探究

銅 ( Cu (I)) 催化的疊氮化物-炔烴 C 反應(yīng) ( CuAAC )描述了疊氮化物官能化分子 A 與末端炔烴官能化分子 B 的反應(yīng)，通過該反應(yīng)產(chǎn)生穩(wěn)定的綴合物 AB三唑部分。

由于末端炔烴對(duì)疊氮化物相當(dāng)不活潑，因此 CuAAC 反應(yīng)的效率很大程度上取決于金屬催化劑的存在，例如 +1 氧化態(tài)的銅離子 (Cu(I))。

可以使用不同的銅源、還原劑和 Cu(I) 穩(wěn)定配體，但是，對(duì)于大多數(shù)生物共軛應(yīng)用，可將 Cu(II) 鹽 CuSO 4作為銅源、水溶性 Cu(I) 穩(wěn)定配體（例如 BTTAA）和推薦使用抗壞血酸鈉作為還原劑。[1-3]

使用Picolyl-Azide試劑代替?zhèn)鹘y(tǒng)的Azide試劑可以進(jìn)一步提高反應(yīng)效率，并由于內(nèi)部銅螯合部分而降低所需的最終CuSO 4濃度。[4]

CuAAC 細(xì)胞反應(yīng)緩沖液試劑盒（基于 BTTAA）適用于對(duì)含有代謝功能化炔烴或疊氮化物修飾生物分子的細(xì)胞進(jìn)行銅 (Cu(I)) 催化疊氮化物-炔點(diǎn)擊化學(xué)反應(yīng) (CuAAC)。

Jena Bioscience試劑盒提供足夠的量以進(jìn)行50 次 CuAAC 實(shí)驗(yàn) à 500 µl，使用 2 mM CuSO 4（銅源）、10 mM BTTAA（Cu(I) 穩(wěn)定配體）和 100 mM 抗壞血酸鈉（還原劑）在 100 mM Na-溶液中進(jìn)行。磷酸鹽反應(yīng)緩沖液。

艾美捷Jena Bioscience CuAAC細(xì)胞反應(yīng)緩沖液套件（基于BTTAA）#CLK-073參數(shù)：

適合一般實(shí)驗(yàn)室使用。

運(yùn)輸：在環(huán)境溫度下運(yùn)輸

儲(chǔ)存條件：儲(chǔ)存在 4 °C 下

可以短期暴露于環(huán)境溫度（累計(jì)最多 1 周）。

保質(zhì)期：交貨后12個(gè)月

Jena Bioscience-CuAAC細(xì)胞反應(yīng)緩沖液套件含量：

銅源：

2 x 10 mg CuSO 4 (M = 159.6 g/mol)，#CLK-MI004)

Cu(I) 穩(wěn)定配體：

5 x 25 mg BTTAA（M= 430.5 g/mol，#CLK-067）

還原試劑：

4 x 200 mg 抗壞血酸鈉（M = 198.1 g/mol，#CLK-MI005）

反應(yīng)緩沖液：

2 x 30 ml 無菌 100 mM 磷酸鈉緩沖液，pH 7

10 ml 無菌 ddH 2 O

需要但未提供的材料：

炔或疊氮化物功能化的底物，例如含有代謝功能化的炔或疊氮化物修飾的生物分子的固定和透化細(xì)胞。

(吡啶基)-疊氮化物或炔烴檢測試劑和適當(dāng)?shù)娜軇ɡ?/span>DMSO）

用于標(biāo)記固定和透化的細(xì)胞：

洗滌溶液，例如含有 3% BSA 的 PBS

固定溶液，例如含有 3.7% 甲醛的 PBS

透化溶液，例如含有 0.5% Triton X-100 的 PBS

用于成像的封固劑

其他標(biāo)記試劑，例如核染色劑或抗體

Jena Bioscience-CuAAC細(xì)胞反應(yīng)緩沖液套件文獻(xiàn)參考：

[1] Presolski et al. (2011) Copper-Catalyzed Azide-Alkyne Click Chemistry for Bioconjugation. Current Protocols in Chemical Biology 3:153.

[2] Hong et al. (2011) Analysis and Optimization of Copper-Catalyzed Azide-Alkyne Cycloaddition for Bioconjugation. Angew. Chem. Int. Ed. 48:9879.

[3] Besanceney-Webler et al. (2011) Increasing the Efficiacy of Bioorthogonal Click Reactions for Bioconjugation: A Comparative Study. Angew. Chem. Int. Ed. 50:8051.

[4] Uttamapinant et al. (2012) Fast, Cell-Compatible Click Chemistry with Copper-Chelating Azides for Biomolecular Labeling. Angew. Chem. Int. Ed. 51:5852.

JenaBioscience的主要產(chǎn)品包括核苷/核酸制品系列（包括合成的類似物）、重組蛋白及蛋白表達(dá)系統(tǒng)、點(diǎn)擊化學(xué)產(chǎn)品系列、在結(jié)構(gòu)學(xué)研究方面全面提供晶體篩選試劑盒、優(yōu)化試劑、工具和各類耗材等。此外，還提供分子生物學(xué)和生物化學(xué)研究的定制試劑與研究服務(wù)。艾美捷科技是Jena Bioscience的中國代理商，為科研工作者提供優(yōu)質(zhì)的產(chǎn)品與服務(wù)。