二硝基苯酚修飾的核苷酸Digoxigenin-11-dUTP

Digoxigenin-11-dUTP，通過(guò)PCR，Nick Translation等應(yīng)用整合到DNA / cDNA中，用于DNA / cDNA探針的制備，測(cè)序等方面。

Digoxigenin-11-dUTP可通過(guò)以下方法整合到DNA/cDNA中：

1.用Taq聚合酶進(jìn)行PCR

2.用DNAse I / DNA聚合酶I進(jìn)行Nick Translation

3.用Klenow exo-進(jìn)行引物延伸

4.用末端脫氧核苷酸轉(zhuǎn)移酶（TdT）標(biāo)記寡核苷酸3'末端

5.用MMLV逆轉(zhuǎn)錄酶進(jìn)行逆轉(zhuǎn)錄

Digoxigenin-11-dUTP可通過(guò)以下方法整合到RNA中：

用末端脫氧核苷酸轉(zhuǎn)移酶（TdT）標(biāo)記3'末端

推薦的用于PCR和Nick Translation的Digoxigenin-11-dUTP / dTTP比例：35％ 高辛-11-dUTP / 65％dTTP

請(qǐng)注意：Digoxigenin-11-dUTP的終濃度取決于應(yīng)用和實(shí)驗(yàn)條件。為獲得良好的產(chǎn)品收率和高摻入率，建議單獨(dú)優(yōu)化Digoxigenin-11-dUTP / dTTP比率

艾美捷Digoxigenin-11-dUTP，高辛/二硝基苯酚（NU-803-DIGXS）：

運(yùn)輸：通過(guò)凝膠包進(jìn)行運(yùn)輸。

存儲(chǔ)條件：應(yīng)在-20°C的環(huán)境下保存。

短期（累計(jì)最多1周）暴露于室溫下是可行的。

保質(zhì)期：12個(gè)月。

分子式：C43H65N4O21P3（自由酸形式）。

分子量：1066.91克/摩爾（自由酸形式）。

精確質(zhì)量：1066.34克/摩爾（自由酸形式）。

純度：高于或等于95%（通過(guò)高效液相色譜法測(cè)定）。

形態(tài)：在10 mM Tris-HCl溶液中的過(guò)濾溶液，分子量截留30 kDa。

顏色：無(wú)色至淡黃色。

濃度：1.0 mM至1.1 mM。

pH值：7.5，誤差范圍±0.5。

光譜特性：zui大吸收波長(zhǎng)λmax為290納米，摩爾吸光系數(shù)ε為8.8 L·摩爾^-1·厘米^-1（Tris-HCl，pH 7.5）。

應(yīng)用：

生物素-11-dUTP可以通過(guò)以下方法嵌入到DNA或cDNA中：

使用Taq聚合酶進(jìn)行聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)（PCR）。

利用DNA酶I/DNA聚合酶I進(jìn)行缺口翻譯（Nick Translation）。

使用Klenow exo-進(jìn)行引物延伸（Primer Extension）。

使用末端脫氧核苷酸轉(zhuǎn)移酶（Terminal deoxynucleotidyl Transferase，簡(jiǎn)稱TdT）進(jìn)行3'端標(biāo)記。

使用MMLV逆轉(zhuǎn)錄酶進(jìn)行逆轉(zhuǎn)錄。

此外，生物素-11-dUTP還可以通過(guò)以下方法嵌入到RNA中：

使用末端脫氧核苷酸轉(zhuǎn)移酶（TdT）進(jìn)行3'-端標(biāo)記。

Digoxigenin-11-dUTP相關(guān)產(chǎn)品：

HighFidelity Digoxigenin PCR Labeling Kit, #APP-101-DIGX

Digoxigenin NT Labeling Kit, #PP-310-DIGX