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亞硫酸氫鹽轉(zhuǎn)化的基因組DNA的PCR設計中Z重要的挑戰(zhàn)之一是引物的設計和優(yōu)化,以減少PCR偏差。當旨在為定量甲基化保留甲基化和非甲基化CpG位點的定量比率時,引物設計必須不帶偏見,這樣它就不會選擇一種類型的片段而不是另一種類型。
甲基化分析的本質(zhì)是,甲基化和非甲基化的DNA分子將以截然不同的效率被擴增。這是由于二級結構的形成(引物環(huán)和二聚體、模板環(huán)、錯序)以及CpG位點的T和G以及C/T變異的長串。位于CpG位點的引物可以選擇性地擴增甲基化或非甲基化片段,可能在最終的甲基化分析中產(chǎn)生偏差。
EpigenDx在PCR和檢測設計方面具有專業(yè)知識,使用定量焦測序甲基化技術驗證檢測條件,以確保甲基化和非甲基化DNA以相同的效率擴增。EpigenDx為客戶提供完整的引物組和檢測條件,針對亞硫酸氫鹽測序和其他DNA甲基化應用(如COBRA和HRM實時PCR)進行了優(yōu)化。
EpigenDx預驗證的甲基化測定內(nèi)容:
定制引物組套件,100次反應*
PCR擴增的檢測條件
艾美捷EpigenDx預驗證的甲基化測定:
超過12,000種現(xiàn)成驗證的檢測和引物組套件,用于:
1、亞硫酸鹽測序
2、MS-HRM(熔解曲線高分辨率熔解分析)
3、焦磷酸測序
4、靶向亞硫酸鹽次世代測序(NGS)
5、DNA甲基化分析
6、人類、小鼠、大鼠、猴子等
7、專為特異性擴增亞硫酸鹽轉(zhuǎn)化的DNA而準備。
EpigenDx專注于疾病生物標記物發(fā)現(xiàn)、驗證和分子診斷的基因組和表觀基因組研究領域。EpigenDx擁有廣泛的知識和經(jīng)驗,擅長于Pyrosequencing、靶向下一代測序、亞硫酸鹽測序等表觀基因組研究分析技術和方法。艾美捷科技是EpigenDx的中國代理商,為科研工作者提供優(yōu)質(zhì)的產(chǎn)品與服務。
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