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UbcH5c(也稱(chēng)為泛素結(jié)合酶E2 D3,UBE2D3)是UbcH5蛋白家族的E2結(jié)合泛素蛋白。E2結(jié)合泛素蛋白以ATP依賴(lài)的方式從E1接收泛素并將其轉(zhuǎn)移到E3。UbcH5c調(diào)節(jié)核因子κB(NF-κB)和p53腫瘤抑制因子等轉(zhuǎn)錄因子的泛素化,從而參與風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎(RA)和癌癥等疾病。UbcH5c的小分子抑制劑具有其他p53表達(dá)水平和活性,因此是癌癥治療中有前途的候選治療藥物。
UbcH5c TR-FRET檢測(cè)試劑盒是一種均勻、靈敏的TR-FRET(時(shí)間分辨熒光共振能量轉(zhuǎn)移)檢測(cè)試劑盒,旨在測(cè)量UbcH5b(泛素結(jié)合酶E2 D3)泛素化活性。該試劑盒使用生物素標(biāo)記的泛素和鋱標(biāo)記的抗體識(shí)別His標(biāo)記的UbcH5c蛋白,以完成TR-FRET配對(duì)。該試劑盒包含足夠的純化的UbcH5 c、純化的UBE1、生物素泛素、抗His-Tb標(biāo)記的供體、染料標(biāo)記的受體和400個(gè)反應(yīng)的測(cè)定緩沖液。
圖1:UbcH5c TR-FRET檢測(cè)試劑盒示意圖。
鋱標(biāo)記的抗His抗體結(jié)合His標(biāo)記的E2結(jié)合蛋白,而染料標(biāo)記的鏈霉抗生物素蛋白受體結(jié)合生物素泛素。當(dāng)泛素轉(zhuǎn)移到E2酶時(shí),復(fù)合物形成,TR-FRET信號(hào)使用能夠測(cè)量時(shí)間分辨熒光共振能量轉(zhuǎn)移的熒光板讀數(shù)器進(jìn)行測(cè)量。TR-FRET信號(hào)與UbcH5c活性成正比
艾美捷UBCH 5c TR-FRET檢測(cè)試劑盒:
貨號(hào): BPS-79901
檢測(cè)試劑盒格式: TR-FRET
物種: 人類(lèi)
需自備材料:
能夠測(cè)量時(shí)間分辨熒光共振能量轉(zhuǎn)移(TR-FRET)的熒光微孔板閱讀器
可調(diào)節(jié)的微量移液管和無(wú)菌吸頭
軌道搖床
UniProt #UBE1: P22314; UBCH5c: P61077
儲(chǔ)存/穩(wěn)定性: 如果按照指示儲(chǔ)存材料,該檢測(cè)試劑盒從收到之日起最佳性能可維持長(zhǎng)達(dá)6個(gè)月。
應(yīng)用: 篩選抑制Ubch5c活性的分子,在藥物發(fā)現(xiàn)高通量篩選(HTS)應(yīng)用中。
運(yùn)輸溫度: -80°C
禁忌: UbcH5c TR-FRET檢測(cè)試劑盒與高達(dá)1%最終DMSO濃度兼容。我們建議在U2檢測(cè)緩沖液中以不超過(guò)10% DMSO溶液準(zhǔn)備抑制劑,并每個(gè)孔使用2 μl。
避免凍融循環(huán)。
文獻(xiàn)參考:
1. Saville, M.K., et al., J. Biol. Chem. 2004; 279(40): 42169-81.
2. Kim, J.-H., et al., BMB Rep. 2015; 48(1): 25-29.
相關(guān)產(chǎn)品:
UbcH5c, His-Tag (Human) Recombinant
UbcH5a (UBE2D1), His-tag Recombinant
UBCH13 TR-FRET Assay Kit
UBCH5b TR-FRET Assay Kit
UBCH5a TR-FRET Assay Kit
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