CD40:CD40L TR-FRET檢測(cè)測(cè)定原理說(shuō)明

CD40是一種主要表達(dá)在B細(xì)胞、單核細(xì)胞、巨噬細(xì)胞和某些樹突細(xì)胞表面的共刺激分子。它通過(guò)與CD40配體（CD40L，也稱為CD154）結(jié)合，發(fā)揮其生物學(xué)功能，主要參與免疫應(yīng)答的調(diào)節(jié)，特別是在T細(xì)胞依賴的B細(xì)胞激活和抗體產(chǎn)生過(guò)程中。

CD40-CD40L的相互作用是免疫系統(tǒng)中一個(gè)關(guān)鍵的信號(hào)通路，它促進(jìn)B細(xì)胞的增殖、分化和存活，同時(shí)增強(qiáng)抗體的類別轉(zhuǎn)換。此外，CD40信號(hào)還參與樹突細(xì)胞和巨噬細(xì)胞的成熟過(guò)程，從而影響T細(xì)胞的激活和整個(gè)適應(yīng)性免疫反應(yīng)。

CD40在多種疾病的發(fā)病機(jī)制中扮演著角色，包括自身免疫疾病、炎癥性疾病和某些類型的癌癥。例如，在某些自身免疫疾病中，CD40信號(hào)的異常激活可能導(dǎo)致B細(xì)胞功能失調(diào)，進(jìn)而產(chǎn)生自身抗體。

鑒于CD40在免疫調(diào)節(jié)中的核心作用，它已成為治療某些疾病的潛在靶點(diǎn)。通過(guò)靶向CD40或其配體的生物制劑，可以調(diào)節(jié)免疫反應(yīng)，治療如風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、系統(tǒng)性紅斑狼瘡等自身免疫疾病。

CD40:CD40L TR-FRET檢測(cè)試劑盒旨在測(cè)量CD40（分化簇40）與CD40L（CD40配體）的結(jié)合活性，用于使用TR-FRET（時(shí)間分辨熒光共振能量轉(zhuǎn)移）進(jìn)行篩選和分析應(yīng)用。它使用鋱標(biāo)記的供體和標(biāo)記的受體來(lái)完成TR-FRET配對(duì)。CD40:CD40L TR-FRET檢測(cè)試劑盒采用方便的384孔格式，含有足夠的重組生物素化CD40（氨基酸21-193）、重組CD40L（氨基酸116-261）、Tb標(biāo)記的供體、染料標(biāo)記的受體和用于384反應(yīng)的檢測(cè)緩沖液。

圖1:CD40:CD40L TR-FRET檢測(cè)試劑盒示意圖

將含有鋱標(biāo)記供體、染料標(biāo)記受體、CD40、CD40L和抑制劑的樣品孵育90分鐘。然后使用熒光閱讀器測(cè)量熒光強(qiáng)度。在CD40與CD40L結(jié)合的情況下，由于供體和受體的接近，會(huì)發(fā)生能量轉(zhuǎn)移。結(jié)合的破壞導(dǎo)致能量傳遞的減少。λ=665 nm處的熒光強(qiáng)度直接對(duì)應(yīng)于CD40與CD40L的結(jié)合。

艾美捷CD40:CD40L TR-FRET檢測(cè)：

貨號(hào)：BPS-79258

同義詞：T細(xì)胞抗原Gp39，腫瘤壞死因子相關(guān)激活蛋白，TRAP，腫瘤壞死因子配體超家族成員5，TNFSF5，CD154，CD40，CD40分子

試劑盒格式：TR-FRET（時(shí)間分辨熒光共振能量轉(zhuǎn)移）

物種：人類

提供形式：該試劑盒以方便的384孔格式提供。

未提供的必需材料：

能夠測(cè)量時(shí)間分辨熒光共振能量轉(zhuǎn)移（TR-FRET）的熒光微孔板閱讀器

可調(diào)節(jié)的微量移液器和無(wú)菌吸頭

UniProt #CD40: P25942; CD40L: P29965

存儲(chǔ)/穩(wěn)定性：如果按照指示存儲(chǔ)材料，該試劑盒在收到日期起的6個(gè)月內(nèi)將表現(xiàn)最佳。

使用說(shuō)明：詳見(jiàn)試劑盒數(shù)據(jù)表的詳細(xì)協(xié)議

應(yīng)用：

研究酶動(dòng)力學(xué)。

在高通量篩選（HTS）應(yīng)用中篩選小分子抑制劑。

運(yùn)輸溫度：-80°C

CD40:CD40L TR-FRET檢測(cè)文獻(xiàn)參考：

Annis A., et al., 2004 J. Amer. Chem. Soc. 126(4): 15495-15503.

Yan, T., et al., 2001 J. Cellular Biochem. 83(2): 320-325.

Tang T., et al., 2021 Pharmacol The 219:107709.

相關(guān)產(chǎn)品：

CD40/NF-κB Luciferase Reporter HEK293 Cell Line

CD40:CD40L[Biotinylated] Inhibitor Screening Assay Kit

CD40, Fc fusion (Human) Recombinant

CD40L (CD154), His-tag (Human) Recombinant

CD40 - HEK293 Cell Line

CD40, Fc Fusion (IgG1) Avi-Tag, Biotin Labeled Recombinant