幽門螺桿菌IgM ELISA試劑盒檢測(cè)程序說明

幽門螺桿菌（Helicobacter pylori）是一種螺旋形細(xì)菌，由B.J. Marshall在1982年從人體胃粘膜中培養(yǎng)出來。研究表明，幽門螺桿菌的存在與多種胃腸道疾病有關(guān)，包括胃炎、十二指腸和胃潰瘍、非潰瘍性消化不良以及胃腺癌和淋巴瘤。在十二指腸潰瘍患者中，該細(xì)菌的存在率為95-98%，在胃潰瘍患者中為60-90%。研究還表明，通過抗微生物治療去除這種細(xì)菌與癥狀的緩解和疾病的治愈相關(guān)。

患有與胃腸道相關(guān)的臨床癥狀的患者可以通過兩種方法診斷幽門螺桿菌感染：(1) 侵入性技術(shù) - 包括活檢后進(jìn)行培養(yǎng)或活檢標(biāo)本的組織學(xué)檢查，或直接檢測(cè)尿素酶活性。(2) 非侵入性技術(shù) - 包括尿素呼氣試驗(yàn)和血清學(xué)方法。所有在活檢樣本上進(jìn)行的檢測(cè)都可能受到采樣誤差和污染細(xì)菌干擾的影響。酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（ELISA）檢測(cè)幽門螺桿菌特異性IgM抗體是血清學(xué)檢測(cè)的推薦技術(shù)，因?yàn)樗臏?zhǔn)確性和簡(jiǎn)單性。

Calbiotech幽門螺桿菌（H.pylori）IgM ELISA試劑盒用于檢測(cè)人血清或血漿中幽門螺桿菌的IgMantibody。

艾美捷Calbiotech-幽門螺桿菌IgM ELISA試劑盒：

目錄編號(hào)：HP015M

產(chǎn)品類型：酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（ELISA）

數(shù)量：96次測(cè)試（12x8可拆卸條狀孔板）

樣本體積：每孔10微升

物種：人類

儲(chǔ)存與穩(wěn)定性：產(chǎn)品應(yīng)儲(chǔ)存在2-8攝氏度。

注意事項(xiàng)：僅供研究使用。不用于診斷程序。

幽門螺桿菌IgM ELISA試劑盒檢測(cè)原理：

純化的幽門螺桿菌抗原被包被在微孔板的表面。將稀釋后的人體血清加入孔中，如果存在幽門螺桿菌IgM特異性抗體，它就會(huì)與抗原結(jié)合。所有未結(jié)合的物質(zhì)都被洗去。然后加入酶結(jié)合物，它與抗體-抗原復(fù)合物結(jié)合。多余的酶結(jié)合物被洗掉，接著加入TMB試劑溶液。在特定的時(shí)間，酶結(jié)合物的催化反應(yīng)被終止。產(chǎn)生的色度強(qiáng)度與樣本中IgM特異性抗體的數(shù)量成正比。結(jié)果通過微孔板讀取器讀取，并與校準(zhǔn)品和對(duì)照品平行比較。

幽門螺桿菌IgM ELISA試劑盒檢測(cè)程序：

1. 在架上固定所需數(shù)量的包被孔。

2. 通過向樣本稀釋液中加入5 µL的樣本來準(zhǔn)備測(cè)試樣本、陰性對(duì)照、陽性對(duì)照和校準(zhǔn)品的1:40稀釋液?；旌暇鶆颉?/span>

3. 向相應(yīng)的孔中分配100 µL的稀釋血清、校準(zhǔn)品和對(duì)照品。對(duì)于試劑空白，在1A孔位置分配100 µL的樣本稀釋液。輕敲架子以去除液體中的氣泡，并混合10秒鐘。

4. 在室溫下孵育30分鐘。

5. 在孵育期結(jié)束時(shí)，清除所有孔中的液體。用稀釋的洗滌緩沖液（1×）沖洗并甩干微孔板4次，然后用蒸餾水沖洗1次。（請(qǐng)不要使用自來水。）

6. 向每個(gè)孔中分配100 µL的酶結(jié)合物。輕輕混合10秒鐘。

7. 在室溫下孵育30分鐘。

8. 清除所有孔中的酶結(jié)合物。用稀釋的洗滌緩沖液（1×）沖洗并甩干微孔板4次，然后用蒸餾水沖洗1次。

9. 向每個(gè)孔中加入100 µL的TMB試劑。輕輕混合10秒鐘。

10. 在室溫下孵育20分鐘。

11. 向每個(gè)孔中加入100 µL的終止溶液，包括2個(gè)空白孔。

12. 輕輕混合30秒鐘。確保所有的藍(lán)色w全變?yōu)辄S色非常重要。

13. 在15分鐘內(nèi)使用微孔板讀取器讀取450 nm處的光密度。

注意：洗滌程序至關(guān)重要。洗滌不充分會(huì)導(dǎo)致顏色發(fā)展不當(dāng)。

幽門螺桿菌IgM ELISA試劑盒文獻(xiàn)參考：

1. Cutler AF; Prasad VM; Santogade P. Four-year trends in Helicobacter pylori IgG serology following successful eradication. Am J Med 1998;105(1):18-20  

2. Holtmann G; Talley NJ; Mitchell H; Hazell S. Antibody response to specific H. pylori antigens in functional dyspepsia, duodenal ulcer disease, and health. Am J Gastroenterol 1998; 93(8):1222-7.  

3. Parsonnet J; Replogle M; Yang S; Hiatt R. Seroprevalence of CagA-positive strains among Helicobacter pylori-infected, healthy young adults. J Infect Dis 1997;175(5):1240-2.  

4. Klaamas K; Held M; Wadstr¨om T; Lipping A; Kurtenkov O. IgG immune response to Helicobacter pylori antigens in patients with gastric cancer as defined by ELISA and immunoblotting. Int J Cancer 1996; 67(1):1-5.  

5. Matsukura N; Onda M; Tokunaga A; Kato S; Yoshiyuki T; Hasegawa H; Yamashita K; Tomtitchong P; Hayashi A. Role of Helicobacter pylori infection in perforation of peptic ulcer: an age- and gender-matched case-control study. J Clin Gastroenterol 1997;10:S235-9.  

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