幽門螺桿菌IgM ELISA試劑盒檢測程序說明

幽門螺桿菌（Helicobacter pylori）是一種螺旋形細菌，由B.J. Marshall在1982年從人體胃粘膜中培養(yǎng)出來。研究表明，幽門螺桿菌的存在與多種胃腸道疾病有關，包括胃炎、十二指腸和胃潰瘍、非潰瘍性消化不良以及胃腺癌和淋巴瘤。在十二指腸潰瘍患者中，該細菌的存在率為95-98%，在胃潰瘍患者中為60-90%。研究還表明，通過抗微生物治療去除這種細菌與癥狀的緩解和疾病的治愈相關。

患有與胃腸道相關的臨床癥狀的患者可以通過兩種方法診斷幽門螺桿菌感染：(1) 侵入性技術 - 包括活檢后進行培養(yǎng)或活檢標本的組織學檢查，或直接檢測尿素酶活性。(2) 非侵入性技術 - 包括尿素呼氣試驗和血清學方法。所有在活檢樣本上進行的檢測都可能受到采樣誤差和污染細菌干擾的影響。酶聯免疫吸附試驗（ELISA）檢測幽門螺桿菌特異性IgM抗體是血清學檢測的推薦技術，因為它的準確性和簡單性。

Calbiotech幽門螺桿菌（H.pylori）IgM ELISA試劑盒用于檢測人血清或血漿中幽門螺桿菌的IgMantibody。

艾美捷Calbiotech-幽門螺桿菌IgM ELISA試劑盒：

目錄編號：HP015M

產品類型：酶聯免疫吸附試驗（ELISA）

數量：96次測試（12x8可拆卸條狀孔板）

樣本體積：每孔10微升

物種：人類

儲存與穩(wěn)定性：產品應儲存在2-8攝氏度。

注意事項：僅供研究使用。不用于診斷程序。

幽門螺桿菌IgM ELISA試劑盒檢測原理：

純化的幽門螺桿菌抗原被包被在微孔板的表面。將稀釋后的人體血清加入孔中，如果存在幽門螺桿菌IgM特異性抗體，它就會與抗原結合。所有未結合的物質都被洗去。然后加入酶結合物，它與抗體-抗原復合物結合。多余的酶結合物被洗掉，接著加入TMB試劑溶液。在特定的時間，酶結合物的催化反應被終止。產生的色度強度與樣本中IgM特異性抗體的數量成正比。結果通過微孔板讀取器讀取，并與校準品和對照品平行比較。

幽門螺桿菌IgM ELISA試劑盒檢測程序：

1. 在架上固定所需數量的包被孔。

2. 通過向樣本稀釋液中加入5 µL的樣本來準備測試樣本、陰性對照、陽性對照和校準品的1:40稀釋液?；旌暇鶆?。

3. 向相應的孔中分配100 µL的稀釋血清、校準品和對照品。對于試劑空白，在1A孔位置分配100 µL的樣本稀釋液。輕敲架子以去除液體中的氣泡，并混合10秒鐘。

4. 在室溫下孵育30分鐘。

5. 在孵育期結束時，清除所有孔中的液體。用稀釋的洗滌緩沖液（1×）沖洗并甩干微孔板4次，然后用蒸餾水沖洗1次。（請不要使用自來水。）

6. 向每個孔中分配100 µL的酶結合物。輕輕混合10秒鐘。

7. 在室溫下孵育30分鐘。

8. 清除所有孔中的酶結合物。用稀釋的洗滌緩沖液（1×）沖洗并甩干微孔板4次，然后用蒸餾水沖洗1次。

9. 向每個孔中加入100 µL的TMB試劑。輕輕混合10秒鐘。

10. 在室溫下孵育20分鐘。

11. 向每個孔中加入100 µL的終止溶液，包括2個空白孔。

12. 輕輕混合30秒鐘。確保所有的藍色w全變?yōu)辄S色非常重要。

13. 在15分鐘內使用微孔板讀取器讀取450 nm處的光密度。

注意：洗滌程序至關重要。洗滌不充分會導致顏色發(fā)展不當。

幽門螺桿菌IgM ELISA試劑盒文獻參考：

1. Cutler AF; Prasad VM; Santogade P. Four-year trends in Helicobacter pylori IgG serology following successful eradication. Am J Med 1998;105(1):18-20  

2. Holtmann G; Talley NJ; Mitchell H; Hazell S. Antibody response to specific H. pylori antigens in functional dyspepsia, duodenal ulcer disease, and health. Am J Gastroenterol 1998; 93(8):1222-7.  

3. Parsonnet J; Replogle M; Yang S; Hiatt R. Seroprevalence of CagA-positive strains among Helicobacter pylori-infected, healthy young adults. J Infect Dis 1997;175(5):1240-2.  

4. Klaamas K; Held M; Wadstr¨om T; Lipping A; Kurtenkov O. IgG immune response to Helicobacter pylori antigens in patients with gastric cancer as defined by ELISA and immunoblotting. Int J Cancer 1996; 67(1):1-5.  

5. Matsukura N; Onda M; Tokunaga A; Kato S; Yoshiyuki T; Hasegawa H; Yamashita K; Tomtitchong P; Hayashi A. Role of Helicobacter pylori infection in perforation of peptic ulcer: an age- and gender-matched case-control study. J Clin Gastroenterol 1997;10:S235-9.  

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