ALPCO-大鼠超敏胰島素ELISA檢測(cè)原理和樣本處理方案

ALPCO大鼠超敏胰島素ELISA用于定量測(cè)定大鼠血清和血漿中的胰島素。

該試劑盒設(shè)計(jì)用于5µL或25µL的樣本量。適用于該測(cè)定的五個(gè)標(biāo)準(zhǔn)品和兩個(gè)對(duì)照品將根據(jù)所使用的樣本量來確定。

艾美捷大鼠超敏胰島素ELISA（ALP-80-INSRTU-E01）檢測(cè)原理：

ALPCO大鼠超敏胰島素ELISA是一種夾心型免疫測(cè)定法。96孔微孔板涂有胰島素特異性單克隆抗體。將標(biāo)準(zhǔn)品、對(duì)照品和樣品加入到帶有共軛物的微孔板孔中。然后將微孔板在微孔板振蕩器上以700-900rpm的速度培養(yǎng)。第一次孵育完成后，用洗滌緩沖液洗滌孔并吸干。加入TMB底物，在微孔板振蕩器上以700-900rpm的速度第二次孵育微孔板。一旦第二次孵育完成，加入停止溶液，用分光光度計(jì)在450nm處測(cè)量光密度（OD）。產(chǎn)生的顏色強(qiáng)度與樣品中胰島素的量成正比。

所需材料

1用于分配5、25、75和100微升的精密移液管（帶一次性吸頭）

2用于分配75和100微升的重復(fù)或多通道移液管

3用于試劑配制的容量瓶和移液管

4用于試劑配制的蒸餾水或去離子水

5微孔板洗滌器或洗滌瓶

6能夠以700-900轉(zhuǎn)每分鐘速度振蕩的微孔板振蕩器

7帶有450納米濾光片的微孔板讀數(shù)器

8用于樣本制備的渦旋混合器

注意事項(xiàng)

1. 本試劑盒中包含的人血制品已檢測(cè)是否含有HIV（人類免疫缺陷病毒）、HBV（乙型肝炎病毒）和HCV（丙型肝炎病毒）。這些病毒的檢測(cè)方法不能保證病毒的絕對(duì)不存在；因此，所有試劑應(yīng)被視為潛在傳染性物質(zhì)。處理和處置應(yīng)符合所有適當(dāng)?shù)膰?guó)家和地方法規(guī)，以處理潛在的生物危害物質(zhì)。

2. 所有來自動(dòng)物源的材料均為BSE（瘋牛?。╆幮?。然而，所有材料應(yīng)被視為潛在傳染性物質(zhì)。

3. 避免直接接觸皮膚。

4. 本產(chǎn)品不得內(nèi)服。

5. 使用本產(chǎn)品時(shí)，避免進(jìn)食、飲水或吸煙。

6. 不要使用口吸移液管吸取任何試劑。

7. 試劑盒中的試劑是特定批次的，不得替換。

8. 不要使用超過有效期的試劑。

9. 不建議更改測(cè)試程序，可能會(huì)影響測(cè)試結(jié)果。

儲(chǔ)存條件

試劑盒應(yīng)儲(chǔ)存在2-8°C的環(huán)境中。試劑盒在盒標(biāo)簽上的有效期前是穩(wěn)定的。

樣本處理

血清和血漿樣本適用于本檢測(cè)。不需要稀釋或處理樣本。然而，如果樣本的胰島素濃度高于最高標(biāo)準(zhǔn)，應(yīng)將樣本稀釋在零標(biāo)準(zhǔn)中，并重復(fù)分析。為了減少潛在的時(shí)間相關(guān)的樣本漂移，建議在使用前c底渦旋每個(gè)樣本，并在每次移液操作中不停頓。樣本可以在分析前在2-8°C下儲(chǔ)存24小時(shí)。對(duì)于更長(zhǎng)時(shí)間，建議在<-20°C下儲(chǔ)存。避免反復(fù)凍融循環(huán)。

典型標(biāo)準(zhǔn)曲線：

以下結(jié)果僅用于演示目的，不能代替測(cè)定獲得的數(shù)據(jù)。每次分析運(yùn)行和平板測(cè)試都必須繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線

大鼠超敏胰島素ELISA文獻(xiàn)參考：

Finlay JWA, Dillard RF. Appropriate Calibration Curve Fitting in Ligand Binding Assays. AAPS Journal. 2007; 9(2): E260-E267.