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降鈣素基因相關(guān)肽(CGRP)是一種強效的血管擴張劑,同時也引發(fā)多種其他生物效應。
在正常人群中,CGRP的平均血漿水平報告為0.8 pmol/L至71 pmol/L(3 pg/mL至269 pg/mL)。在進行血液透析、懷孕、哮喘加重以及髓樣甲狀腺癌病例中,觀察到了循環(huán)CGRP水平的增加。
酶免疫測定(EIA)是一種檢測和定量樣本中抗原(蛋白質(zhì)、激素等)或抗體的技術(shù)。它依賴于抗體結(jié)合特定抗原的能力。
艾美捷Bertin Instruments-RCGRP(人)ELISA試劑盒(A05481)檢測原理:
酶聯(lián)免疫分析(EIA/ELISA)基于一種夾心技術(shù)。提供的試劑盒孔板被涂覆有特異性單克隆抗體,以捕捉降鈣素基因相關(guān)肽(CGRP)。引入孔板中的CGRP(標準品或樣本)與涂覆在板上的單克隆抗體結(jié)合,然后通過特異性針對CGRP的乙酰膽堿酯酶(AChE)-Fab’偶聯(lián)物進行檢測。
這兩種抗體通過結(jié)合在CGRP的不同表位上形成一個夾心結(jié)構(gòu)。夾心結(jié)構(gòu)固定在孔板上,剩余的試劑被洗去。CGRP的濃度通過測量固定標記物的酶活性來確定,使用Ellman試劑。AChE標記物與Ellman試劑反應生成一種在405 nm或414 nm處強烈吸收的黃色化合物。
顏色的強度通過分光光度法進行測定,與免疫反應過程中孔內(nèi)存在的CGRP的量成正比。
所需材料和設備:
除了標準實驗室設備外,還需要以下材料:
樣本準備(并非所有樣本類型都需要):
C-18反相色譜柱或Oasis® HLB提取柱
甲醇
醋酸
檢測所需:
精密微量移液器(20至1000 μL)
分光光度計讀板儀(405 nm或414 nm濾光片)
微孔板洗滌機(或洗滌瓶)
搖床微孔板
多通道移液器及一次性吸頭(30-300 µL)
UltraPure水 #A07001.1L
聚丙烯管
用于制備所有ELISA試劑和緩沖液的水必須是UltraPure水(去離子水且不含有機污染物痕跡)。
請勿使用蒸餾水、HPLC級水或滅菌水。
典型的CGRP(人)標準曲線:
艾美捷科技是Bertin Instruments的特約合作代理商,為科研工作者提供優(yōu)質(zhì)的產(chǎn)品與服務。
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