高效標記與細胞內分布Molday ION羅丹明B熒光標記物

由Benjamin Addicott等人發(fā)表于2010年的《Mesenchymal stem cell labeling and in vitro MR characterization at 1.5T of new SPIO contrast agent: Molday ION Rhodamine-B》，主要探討了新型超順磁性氧化鐵（SPIO）對比劑Molday ION Rhodamine-B（MIRB）在標記間充質干細胞（MSC）方面的應用，并通過體外MRI實驗評估了其成像特性。

方法

本研究采用了一種由Biopal公司研發(fā)的新型SPIO造影劑——Molday ION Rhodamine-B（MIRB）(BPL-CL-50Q01-6A-50，BPL-CL-50Q02-6A-50)，對間充質干細胞（MSC）進行了標記，并在1.5T臨床MRI設備上進行了體外成像特性研究。研究內容包括：

細胞培養(yǎng)：從食蟹猴（Macaca fascicularis）的髂嵴采集骨髓單核細胞，通過密度梯度離心法分離并擴增MSC。

細胞標記：將MSC與不同濃度的MIRB共孵育20小時，濃度范圍從5到100mg Fe/ml。通過普魯士藍染色和熒光顯微鏡觀察細胞內MIRB的分布，并通過流式細胞術檢測標記效率。

MSC功能評估：通過流式細胞術、基因表達分析、T細胞增殖抑制實驗以及成骨、成脂分化實驗，評估MIRB標記對MSC活力、增殖能力、表型及功能的影響。

MRI成像：構建含有MIRB標記MSC的瓊脂糖模型，使用T2加權梯度回波（GE）、T2加權快速自旋回波（FSE）和T2加權平衡穩(wěn)態(tài)自由進動（bSSFP）序列進行MRI掃描，評估不同序列對MIRB標記MSC的檢測能力。

艾美捷Molday ION羅丹明B熒光標記物的d特優(yōu)勢：

高效標記與細胞內分布：MIRB能夠被非吞噬性細胞高效內化，標記效率在MIRB濃度達到或超過20mg Fe/ml時接近95%。MIRB主要定位于MSC細胞質的核周內體中，這種定位模式有助于MRI檢測時產(chǎn)生強烈的磁敏感效應。

對細胞功能無顯著影響：研究表明，在MIRB濃度高達30mg Fe/ml時，MSC的活力、增殖能力、表型以及成骨、成脂分化能力均未受到顯著影響。此外，MIRB標記的MSC在抑制T細胞增殖方面也表現(xiàn)出與未標記MSC相似的能力。

優(yōu)異的MRI檢測性能：在體外MRI實驗中，使用長TR/TE、低帶寬和低翻轉角的梯度回波序列能夠最大限度地提高MIRB標記MSC的檢測靈敏度。研究發(fā)現(xiàn)在1.5T MRI設備上，MIRB標記的MSC在細胞數(shù)量低至約1000個時仍能被清晰檢測到，顯示出j高的檢測靈敏度。

多模態(tài)成像能力：MIRB不僅適用于MRI檢測，還因其共軛了羅丹明B（Rh-B）熒光染料而具備熒光顯微鏡檢測能力。這種多模態(tài)成像能力為科研人員提供了更多元的細胞追蹤手段。

MIRB在干細胞治療中的價值：

精準追蹤：MIRB的高標記效率和優(yōu)異的MRI檢測性能使得科研人員能夠精準地追蹤移植后的干細胞，評估其在體內的分布、遷移及存活情況。

功能評估：通過MRI監(jiān)測干細胞的功能變化，如分化狀態(tài)、增殖能力等，為干細胞治療的效果評估提供重要依據(jù)。

安全性：MIRB對干細胞功能無顯著影響，表明其在干細胞治療中具有良好的生物相容性和安全性。

結論

本研究證明了MIRB作為一種新型SPIO造影劑，在間充質干細胞標記及MRI檢測中的z越表現(xiàn)。MIRB不僅能夠高效標記干細胞且對細胞功能無顯著影響，還具備j高的MRI檢測靈敏度。這些特性使得MIRB成為干細胞治療中一種j具潛力的細胞追蹤工具。未來，隨著MIRB在更多臨床前和臨床試驗中的應用，其有望在干細胞治療領域發(fā)揮更大的作用，推動該領域的快速發(fā)展。

通過本文的研究，我們不僅展示了MIRB在MSC標記和MRI檢測中的技術優(yōu)勢，還進一步強調了Biopal品牌產(chǎn)品在干細胞追蹤領域的重要價值和廣闊應用前景。