巖藻糖Fucose--從結(jié)構(gòu)到功能的多面性解析

巖藻糖（fucose）是六碳糖的一種，又稱6- 脫氧- L- 半乳糖，并可以看做是一種甲基戊糖。自然界存在的巖藻糖絕大多數(shù)為L- 巖藻糖，D構(gòu)型的巖藻糖僅作為稀有糖，發(fā)現(xiàn)于一些糖苷類化合物中。

L- 巖藻糖較大量地存在于海藻及樹膠中，也發(fā)現(xiàn)于某些細(xì)菌的多糖中。巖藻糖作為糖蛋白中糖鏈的組成部分，廣泛存在于各類細(xì)胞表面的質(zhì)膜上。巖藻糖比一般六碳糖在第六碳原子上少一個(gè)羥基，所以巖藻糖比其他單糖親水性弱，而疏水性強(qiáng)一些。在某些血型物質(zhì)分子中的巖藻糖是一定的血型的標(biāo)記。

通常從海藻中提取巖藻糖，先用酸處理，中和后，以苯腙形式析出，除去苯肼，可得α-L- 巖藻糖結(jié)晶，熔點(diǎn)145℃。

艾美捷巖藻糖Fucose：

貨號：AS07-268

免疫原：與N-糖鏈以α1,3鍵結(jié)合的核心巖藻糖殘基

宿主：兔

克隆性：多克隆

純度：免疫原親和純化的血清，溶于pH 7.4的PBS中

形式：凍干粉

數(shù)量：50 µg

復(fù)溶方法：復(fù)溶時(shí)加入50 µl無菌水

儲(chǔ)存條件：凍干粉/復(fù)溶后于-20°C保存；復(fù)溶后請分裝，避免反復(fù)凍融。打開管子前請短暫離心，以避免因材料粘附在蓋子或管壁上而導(dǎo)致的損失。

額外信息：α(1,3)巖藻糖不僅存在于植物中，也存在于某些無脊椎動(dòng)物（如線蟲、蜜蜂等）中。然而，與這些生物的糖蛋白發(fā)生的交叉反應(yīng)比在植物中觀察到的要弱。這種糖殘基在哺乳動(dòng)物的內(nèi)源性糖蛋白中不存在。

推薦稀釋度：0.5 µg/ml（ELISA）、1:40（免疫層析）、1 µg/10 ml（Western Blot）

預(yù)期/表觀分子量：對于各種糖蛋白，分子量為10 - 100 kDa

已確認(rèn)的反應(yīng)性：高等植物、三角褐藻（Phaeodactylum tricornutum，一種硅藻）

預(yù)測的反應(yīng)性：高等植物、三角褐藻

未反應(yīng)的生物：目前尚未發(fā)現(xiàn)與預(yù)測反應(yīng)性不符的已確認(rèn)例外情況

額外信息：對照品：

蜂毒磷脂酶A2（PLA2），僅含有α1.3巖藻糖，Sigma產(chǎn)品編號P9279

Ⅱ型辣根過氧化物酶，含有β1.2木糖和α1.3巖藻糖，Sigma產(chǎn)品編號P8250

該抗體不識別α1,6巖藻糖

應(yīng)用實(shí)例：

左圖：擬南芥野生型的總細(xì)胞提取物（1）和巖藻糖基轉(zhuǎn)移酶缺陷的不同突變體的細(xì)胞提取物（2-5）（數(shù)據(jù)不是已出版）。一抗的使用濃度為10µg/10ml孵育緩沖液。使用增強(qiáng)化學(xué)發(fā)光（ECL）進(jìn)行檢測。

右圖：抗巖藻糖和抗木糖抗體與各種對照的斑點(diǎn)印跡反應(yīng)：Avidin（Fuc+/Xyl+）、胎球蛋白（Fuc-/Xyl-）、PLA2（Fuc+/Xyl-）和Mur1-2（Fuc-/Xyl+）。將2µl每種提取物點(diǎn)在硝化纖維膜上，放置在2個(gè)WHATMAN過濾器（一個(gè)浸在TBS-T中）的頂部 在室溫下干燥1.5小時(shí)。用TBS-T中的2%低脂奶粉（0.1%吐溫20）封閉膜30分鐘，并用抗巖藻糖（1）（AS072681:1000）或抗木糖（2）（AS07 2671:1000）30分鐘，然后用二抗兔（1:1000）抗體（ALP 結(jié)合的推薦二抗AS09 607）。在反應(yīng)展開之前，用TBS-T洗滌膜3 x 10分鐘，使用 堿性磷酸酶試劑BCIP®/NTB預(yù)混溶液（Sigma，編號B6404）。