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串聯(lián)泛素結(jié)合實(shí)體(TUBEs)的使用正在成為泛素研究中需要的策略(1, 2)。第一代TUBEs能夠與K48和K63連接的四聚泛素鏈結(jié)合,其解離常數(shù)(Kds)在個(gè)位數(shù)納摩爾范圍內(nèi),比單體UBAs的結(jié)合強(qiáng)度高出約100到1000倍。TUBEs還可以在沒(méi)有通常用于阻斷此類活性的抑制劑的情況下,保護(hù)蛋白質(zhì)免受去泛素化酶(DUBs)和蛋白酶體的降解。這使得在比上述條件更不易改變細(xì)胞生理學(xué)的情況下,能夠高效地從細(xì)胞系、組織和器官中分離天然多泛素鏈及其附著的蛋白質(zhì)。TUBE 1和TUBE 2最近已被證明能夠富集所有多泛素鏈連接類型,且不加區(qū)分,即使目標(biāo)蛋白的連接類型未知,這些試劑也適用。
K63 TUBE的開發(fā)是為了對(duì)K63連接的多泛素鏈(約20納摩爾)顯示出比所有其他連接類型(>2微摩爾)更高的選擇性。它可以單獨(dú)使用,也可以與我們的其他TUBE產(chǎn)品(特別是K48 TUBE HF和M1(線性)TUBE)結(jié)合使用,以研究底物蛋白中的多泛素鏈連接類型。磁性TUBEs是直接與磁性珠子偶聯(lián)的TUBE部分,用于通過(guò)Western blotting和/或下游蛋白質(zhì)組學(xué)研究來(lái)鑒定和表征多泛素化蛋白。磁性TUBEs便于實(shí)現(xiàn)多泛素化蛋白的便捷“一步"捕獲。
艾美捷K63 TUBE(磁珠):
貨號(hào):UM-0404M-1000
分子量:不適用
物理狀態(tài):液體
數(shù)量:1 mL
濃度:可變
儲(chǔ)存:+4℃,避免在此溫度以下儲(chǔ)存
K63 TUBE(磁珠)應(yīng)用:
從細(xì)胞和組織提取物中分離和富集K63多泛素化蛋白
分離K63多泛素化蛋白用于蛋白質(zhì)組學(xué)研究
K63 TUBE(磁珠)優(yōu)勢(shì):
對(duì)K63多泛素鏈的偏好性比其他所有連接類型高出100倍
TUBEs對(duì)多泛素的親和力高于大多數(shù)泛素抗體
避免過(guò)度表達(dá)用于捕獲的表位標(biāo)簽泛素
K63 TUBE(磁珠)文獻(xiàn)參考:
Hershko, A., and Ciechanover, A. (1998) The ubiquitin-proteasome pathway, Ann Rev Biochem 67, 425- 479.
Messick, T. E., and Greenberg, R. A. (2009) The ubiquitin landscape at DNA double-strand breaks, J Cell Biol 187, 319-326.
Balut, C. M., Loch, C. M., and Devor, D. C. (2011) Role of ubiquitylation and USP8-dependent
deubiquitylation in the endocytosis and lysosomal targeting of plasma membrane KCa3.1, FASEB J 25,3938-3948.
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Olzman, J. A., and Chin, L. S. (2008) Parkin-mediated K63-linked polyubiquitination. A signal for targeting misfolded proteins to the aggresome-autophagy pathway, Autophagy 4, 85-87.
Tan, Y. K., Vu, H. A., Kusuma, C. M., and Wu, A. (2009) Implications of autophagy in anthrax
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Lim, K. L., and Lim, G. G. (2011) k63-linked ubiquitination and neurodegeneration, Neurobiol Dis 43, 9-16.
Hjerpe, R., Aillet, F., Lopitz-Otsoa, F., Lang, V., England, P., and Rodriguez, M. S. (2009) Efficient protection and isolation of ubiquitylated proteins using tandem ubiquitin-binding entities, EMBO Rep 10, 1250-1258.
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