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基于免疫電泳和/或ELISA的結(jié)果,該抗體與人IgG重鏈的Fc部分發(fā)生反應(yīng),但不與人IgG的Fab部分發(fā)生反應(yīng)。未檢測(cè)到針對(duì)人IgM或IgA的抗體,也未檢測(cè)到針對(duì)非免疫球蛋白血清蛋白的抗體。該抗體已經(jīng)通過(guò)ELISA和/或固相吸附進(jìn)行測(cè)試,以確保與牛、馬和小鼠血清蛋白的交叉反應(yīng)最小,但可能會(huì)與其他物種的免疫球蛋白發(fā)生交叉反應(yīng)。
完整的IgG抗體是通過(guò)免疫親和層析從抗血清中分離出來(lái)的完整分子。它們具有一個(gè)Fc部分和兩個(gè)通過(guò)二硫鍵連接在一起的抗原結(jié)合Fab部分,因此它們是雙價(jià)的。其平均分子量報(bào)告約為160kDa。完整的IgG形式的抗體適用于大多數(shù)免疫檢測(cè)程序,并具成本效益。
艾美捷辣根過(guò)氧化物酶HRP標(biāo)記親和純化山羊抗人IgG二抗,與Fcγ片段特異性反應(yīng)(經(jīng)牛,馬,小鼠血清蛋白吸附):
貨號(hào):109-035-098
靶標(biāo):人
宿主:山羊
抗體形式:完整IgG
特異性:IgG,特異性針對(duì)Fcγ片段
最小交叉反應(yīng)性:牛、馬、小鼠血清蛋白
偶聯(lián)物:辣根過(guò)氧化物酶
產(chǎn)品類別:完整IgG親和純化抗體
克隆性:多克隆
偶聯(lián)物:辣根過(guò)氧化物酶
物理狀態(tài):凍干固體
儲(chǔ)存和復(fù)溶:將凍干固體儲(chǔ)存于2-8°C。按照產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)指示的體積用去離子水復(fù)溶,如果溶液不澄清,可以離心。在使用當(dāng)天準(zhǔn)備工作液。產(chǎn)品作為未稀釋的液體在2-8°C下可穩(wěn)定保存約6周。
復(fù)溶后的長(zhǎng)期儲(chǔ)存:分裝并置于-70°C或更低溫度下冷凍保存。避免反復(fù)凍融。或者,加入等體積的甘油(ACS級(jí)或更優(yōu)),使最終濃度達(dá)到50%,并以液體形式在-20°C下保存。
有效期:從復(fù)溶日期起一年。如果測(cè)試結(jié)果符合預(yù)期用途,有效期可以延長(zhǎng)。
純度:抗體通過(guò)免疫親和層析從抗血清中純化,使用與瓊脂糖珠偶聯(lián)的抗原進(jìn)行純化。
緩沖液:0.01M磷酸鈉,0.25M氯化鈉,pH7.6
穩(wěn)定劑:15mg/ml牛血清白蛋白(無(wú)IgG,無(wú)蛋白酶)
防腐劑:無(wú)(警告:使用疊d化鈉作為防腐劑將顯著抑制辣根過(guò)氧化物酶的酶活性。)
建議的工作濃度或稀釋范圍:
-免疫組織化學(xué)/細(xì)胞化學(xué):1:500-1:5,000
-使用比色底物的ELISA和Westernblot:1:5,000-1:100,000
-使用ECL底物的Westernblot:1:10,000-1:200,000
稀釋因子以范圍形式呈現(xiàn),因?yàn)樽罴严♂尪仁嵌喾N因素的函數(shù),例如抗原密度、通透性等。實(shí)際使用的稀釋度必須通過(guò)實(shí)驗(yàn)確定。
辣根過(guò)氧化物酶(HRP)偶聯(lián)物是通過(guò)改良的Nakane和Kawaoi方法制備的(《組織化學(xué)與細(xì)胞化學(xué)雜志》1974年,第22卷,第1084頁(yè))。過(guò)氧化物酶偶聯(lián)物常用于免疫組織化學(xué)、Westernblot和ELISA??捎糜跈z測(cè)辣根過(guò)氧化物酶抗原或放大含有HRP的試劑信號(hào)的抗辣根過(guò)氧化物酶及其偶聯(lián)物。對(duì)于哺乳動(dòng)物細(xì)胞的免疫染色,使用抗辣根過(guò)氧化物酶的一個(gè)優(yōu)勢(shì)是背景較低,因?yàn)樵摽贵w不會(huì)識(shí)別這些細(xì)胞中存在的內(nèi)源性類過(guò)氧化物酶。
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