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AP(Alkaline Phosphatase,,堿性磷酸酶)屬于同源二聚體蛋白,分子量為56KDa。堿性磷酸酶是一種能夠?qū)?duì)應(yīng)底物去磷酸化的酶,即通過(guò)水解磷酸單酯將底物分子上的磷酸基團(tuán)除去,并生成磷酸根離子和自由的羥基,這類底物包括核酸、蛋白、生物堿等。而該脫去磷酸基團(tuán)的過(guò)程被稱為去磷酸化或脫磷酸化。堿性磷酸酶也是目前免疫診斷試劑產(chǎn)品常用的標(biāo)記酶之一。與辣根過(guò)氧化物酶(HRP)相比,AP用作標(biāo)記酶的優(yōu)點(diǎn)是:穩(wěn)定性高、靈敏度高,缺點(diǎn)是成本高,標(biāo)記困難。堿性磷酸酶的色原底物常用的是對(duì)硝基苯磷酸鹽(pNPP)。pNPP在堿性磷酸酶的作用下生成對(duì)硝基酚(pNP),其在405nm處有最大吸收。BCIP/NBT也是堿性磷酸酯酶的常用底物。在堿性磷酸酯酶的催化下,BCIP會(huì)被水解產(chǎn)生強(qiáng)反應(yīng)性的產(chǎn)物,該產(chǎn)物會(huì)和NBT發(fā)生反應(yīng),形成不溶性的深藍(lán)色至藍(lán)紫色的NBT-formazan。
艾美捷堿性磷酸酶AP標(biāo)記親和純化F(ab')2片段化山羊抗人IgG(H+L)二抗:
貨號(hào):109-056-003
靶標(biāo):人
宿主:山羊
抗體形式:F(ab')2片段
特異性:IgG(H+L)
偶聯(lián)物:堿性磷酸酶
產(chǎn)品類別:F(ab')2片段親和純化抗體
克隆性:多克隆
物理狀態(tài):凍干固體
儲(chǔ)存和復(fù)溶:將凍干固體儲(chǔ)存于2-8°C。按照產(chǎn)品說(shuō)明書指示的體積用去離子水復(fù)溶,如果溶液不澄清,可以離心。在使用當(dāng)天準(zhǔn)備工作液。產(chǎn)品作為未稀釋的液體在2-8°C下可穩(wěn)定保存約6周。
復(fù)溶后的長(zhǎng)期儲(chǔ)存:加入等體積的甘油(ACS級(jí)或更優(yōu)),使最終濃度達(dá)到50%,并以液體形式在-20°C下保存。
有效期:從復(fù)溶日期起一年。如果測(cè)試結(jié)果符合預(yù)期用途,有效期可以延長(zhǎng)。
純度:抗體通過(guò)胃蛋白酶消化和免疫親和層析從抗血清中純化,使用與瓊脂糖珠偶聯(lián)的抗原進(jìn)行純化。Fc片段和完整的IgG分子已被去除。
緩沖液:0.01MTris-HCl,0.25M氯化鈉,pH8.0
穩(wěn)定劑:15mg/ml牛血清白蛋白(無(wú)IgG,無(wú)蛋白酶)
防腐劑:0.05%疊d化鈉
建議的工作濃度或稀釋范圍:
-ELISA:1:5,000-1:50,000
-Westernblot:1:5,000-1:50,000
稀釋因子以范圍形式呈現(xiàn),因?yàn)樽罴严♂尪仁嵌喾N因素的函數(shù),例如抗原密度、通透性等。實(shí)際使用的稀釋度必須通過(guò)實(shí)驗(yàn)確定。
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