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精氨酸組蛋白瓜氨酸化是眾多重要的表觀遺傳標(biāo)記之一,對于表觀遺傳染色質(zhì)重塑和免疫細胞的胞外陷阱過程的調(diào)控至關(guān)重要。組蛋白 H3(精氨酸 2、8、17)的瓜氨酸化調(diào)節(jié)基因表達,主要由肽基精氨酸脫亞胺酶 4(PAD4)催化。此外,組蛋白的瓜氨酸化,尤其是組蛋白 H3,被揭示為多種炎癥信號的匯聚點,這些信號觸發(fā)中性粒細胞對感染的響應(yīng)。有報道稱,瓜氨酸化組蛋白 H3 可能是早期診斷膿毒癥休克的潛在血清生物標(biāo)志物。多發(fā)性硬化癥和類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎等更多免疫疾病似乎也與組蛋白 H3 瓜氨酸化的變化有關(guān)。通過抑制或激活 PADs,可以改變循環(huán)組蛋白 H3 瓜氨酸化水平。因此,定量檢測循環(huán)組蛋白 H3 瓜氨酸化水平將為更好地理解基因激活和沉默的表觀遺傳調(diào)控提供有用信息,并有助于開發(fā)針對 PAD 的藥物。
EpiQuik™ 循環(huán)組蛋白 H3 瓜氨酸化 ELISA 試劑盒(比色法) 是一套經(jīng)過優(yōu)化的緩沖液和試劑組合,專門用于定量檢測血漿和血清中的循環(huán)組蛋白 H3cit。
艾美捷EpiQuik循環(huán)組蛋白H3瓜氨酸ELISA試劑盒(比色法)(#P-3097-48)優(yōu)勢與特點:
快速高效:整個過程可在 2.5 小時內(nèi)完成。
高靈敏度和特異性:檢測限低至每孔 0.5 ng,血漿/血清在 1–20 ng/孔范圍內(nèi)具有動態(tài)范圍。僅識別 H3cit,與未修飾的 H3 或同一精氨酸位點的其他修飾無交叉反應(yīng)。
方便的對照:試劑盒中包含對照,用于定量 H3cit。
靈活的條孔微孔板格式:可手動或高通量操作。
簡單、可靠且一致的檢測條件。
圖:通過抗 H3cit 抗體實現(xiàn)對 H3cit 檢測的高靈敏度和特異性的展示。分別將不同濃度的 H3cit、未修飾的 H3 以及在精氨酸位點 2、8 和 17 處甲基化的 H3 加入檢測孔中,然后使用 EpiQuik™ 循環(huán)組蛋白 H3 瓜氨酸化 ELISA 試劑盒(比色法)中所用的抗 H3cit 抗體進行測量。
原理與流程:
本試劑盒旨在測量血漿或血清中的總 H3cit。在檢測中,血漿/血清樣本中的瓜氨酸化組蛋白被固定在條孔中,條孔預(yù)先包被了抗瓜氨酸化 H3 抗體。捕獲的瓜氨酸化 H3 可被檢測抗體識別,并通過顯色試劑進行檢測。H3cit 的比例與吸光度強度成正比。通過與標(biāo)準(zhǔn)對照比較,可以定量 H3cit 的絕對含量。
起始材料:
輸入材料應(yīng)為血漿或血清。每孔的血漿或血清用量為 10–40 uL,最佳用量為 30 uL。
文獻引用:
Ragot H et. al. (July 2024). Citrullinated Histone H3, a Marker for Neutrophil Extracellular Traps, Is Associated with Poor Prognosis in Cutaneous Squamous Cell Carcinoma Developing in Patients with Recessive Dystrophic Epidermolysis Bullosa. Cancers (Basel). 16(13)
Petrozziello T et. al. (July 2020). Neuroinflammation and histone H3 citrullination are increased in X-linked Dystonia Parkinsonism post-mortem prefrontal cortex. Neurobiol Dis. :105032.
Ito H et. al. (July 2020). NLRP3 Inflammasome Activation in Lung Vascular Endothelial Cells Contributes to Intestinal Ischemia/Reperfusion-Induced Acute Lung Injury. J Immunol.
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