生化試劑PEPC丨磷酸烯醇丙酮酸羧化酶方案 返回列表頁

PEPC（磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶），EC=4.1.1.31，屬于羧基裂解酶家族，催化向磷酸烯醇式丙酮酸（PEP）中添加二氧化碳以形成草酰乙酸。備選名稱：PEPCase 1、PEPCase 3、PEPC 1、PEPC 3

PEPC丨磷酸烯醇丙酮酸羧化酶免疫原：

KLH結(jié)合合成肽高度保守PEPC1和來自不同植物物種的序列，包括擬南芥Q9MAH0、At1g53310（PEPC 1）、Q84VW9、At3g14940（PEPC 3）。選擇用于誘導(dǎo)該抗體的肽在該酶NP_177043.2（PEPC 4）的細(xì)菌類型中也*保守。

艾美捷PEPC丨磷酸烯醇丙酮酸羧化酶 應(yīng)用實(shí)例：

在4-12%NuPage（Invitrogen）LDS-PAGE上分離（1）用蛋白質(zhì)提取緩沖液提取的擬南芥葉、用PEB提取的菠菜總細(xì)胞、用PEB提取的大麥總細(xì)胞、用PEB提取的玉米總細(xì)胞中的5µg總蛋白，并在PVDF上雜交1h。在室溫下攪拌，在20 mM Tris、137 mM氯化鈉pH 7.6和0.1%（v/v）吐溫-20（TBS-T）中加入2%封閉試劑（GE Healthcare）1小時(shí)后，立即封閉印跡。在室溫下攪拌，以1:10000的稀釋度在一級抗體中培養(yǎng)印跡1h。傾析抗體溶液，將印跡短暫沖洗兩次，然后在室溫下攪拌，在TBS-T中洗滌一次15分鐘，洗滌3次5分鐘。在室溫下，在2%封閉溶液中稀釋至1:50 000的二級抗體（抗兔IgG-辣根過氧化物酶結(jié)合物）中攪拌1小時(shí)，培育印跡。按照上述方法清洗印跡，并根據(jù)制造商說明使用化學(xué)發(fā)光檢測試劑顯影5分鐘。使用CCD成像儀（FluorSMax，Bio-Rad）和Quantity One軟件（Bio-Rad）獲得斑點(diǎn)圖像。

Agrisera公司提供的植物領(lǐng)域的抗體涵蓋擬南芥、萊茵衣藻、藍(lán)藻、松柏類、硅藻、大豆、大麥、蒺藜苜蓿等等。艾美捷科技是Agrisera的中國代理商，為科研工作者提供優(yōu)質(zhì)的PEPC丨磷酸烯醇丙酮酸羧化酶。