Sphingosine 瓊脂糖珠(蛋白標(biāo)準(zhǔn)品) 返回列表頁

脂質(zhì)包被珠被設(shè)計用于蛋白質(zhì)下拉實驗。用于檢測純化蛋白質(zhì)、細(xì)胞裂解物中蛋白質(zhì)的脂質(zhì)結(jié)合，或放射性標(biāo)記的體外翻譯產(chǎn)物的結(jié)合。

S1P珠由瓊脂糖組成，每毫升珠含有10納摩爾的結(jié)合鞘氨醇1-磷酸（S1P），足以進行幾次蛋白質(zhì)結(jié)合實驗。每1mL S1P珠粒包括少量對照珠粒。更多數(shù)量的控制珠也可供購買。

作為Biogradetech-d家代理，艾美捷科技強烈推薦Biogradetech熱銷產(chǎn)品Sphingosine 瓊脂糖珠。產(chǎn)品僅用于科研，不可用于臨床診斷。

Sphingosine 是一種關(guān)鍵的生物活性脂質(zhì)，其在細(xì)胞內(nèi)信號傳導(dǎo)中的作用日益受到重視。Sphingosine 瓊脂糖珠作為一種實驗工具，為研究Sphingosine的功能及其與蛋白質(zhì)的相互作用提供了新的途徑。本文介紹了Sphingosine 瓊脂糖珠的原理、應(yīng)用以及在生物醫(yī)學(xué)研究中的潛力。

Sphingosine 在細(xì)胞生理和病理過程中扮演著重要角色，但其在生物體內(nèi)的動態(tài)變化和作用機制仍需進一步研究。Sphingosine 瓊脂糖珠的開發(fā)為研究者提供了一種新的實驗工具，有助于深入理解Sphingosine的生物學(xué)功能。

Sphingosine 瓊脂糖珠的原理

Sphingosine 瓊脂糖珠通過將Sphingosine固定在瓊脂糖珠上，利用其與特定蛋白質(zhì)的親和性，實現(xiàn)對目標(biāo)蛋白的捕獲和純化。這種技術(shù)可以用于研究Sphingosine與其受體或結(jié)合蛋白的相互作用。

Sphingosine 瓊脂糖珠的應(yīng)用

Sphingosine 瓊脂糖珠在生物醫(yī)學(xué)研究中有多種應(yīng)用，包括：

研究Sphingosine與蛋白質(zhì)的相互作用。

篩選Sphingosine受體的激動劑或拮抗劑。

從復(fù)雜樣品中純化Sphingosine結(jié)合蛋白。

作為藥物開發(fā)中的篩選工具。

Sphingosine 瓊脂糖珠的操作流程

使用Sphingosine 瓊脂糖珠進行實驗通常包括以下步驟：

樣品準(zhǔn)備：收集細(xì)胞或組織樣品。

結(jié)合Sphingosine：將Sphingosine固定在瓊脂糖珠上。

蛋白質(zhì)捕獲：將樣品與Sphingosine 瓊脂糖珠混合，捕獲目標(biāo)蛋白。

洗滌和分離：去除未結(jié)合的蛋白質(zhì)，分離出結(jié)合的蛋白。

檢測和分析：通過質(zhì)譜、ELISA等方法分析捕獲的蛋白質(zhì)。

脂質(zhì)珠^TM測定注意事項：

脂質(zhì)包被珠有1 mL和0.1 mL兩種規(guī)格，以1X PBS緩沖液中的50%漿液形式提供。

訂購1 mL的產(chǎn)品會附帶200 µL的對照珠。對照珠也可單獨購買，建議使用它們進行分析。

儲存在2-8°C。產(chǎn)品對溫度和光線敏感，請勿冷凍。

以1,000 x g或更低的速度離心珠。不要高速離心珠，因為這可能會壓碎珠。

每1 mL珠中有總計10毫摩爾的結(jié)合脂質(zhì)。

珠的直徑范圍在45-165微米之間。

對每種蛋白質(zhì)使用50-100 µL的50%漿液脂質(zhì)包被珠和對照珠。

了解陽性對照蛋白列表。

脂質(zhì)珠^TM - 蛋白質(zhì)拉下協(xié)議：

我們提供以下協(xié)議作為指南，并強烈鼓勵研究人員查閱科學(xué)文獻并進行優(yōu)化實驗，以確定對其感興趣的蛋白質(zhì)最有利的條件。

充分混合珠（不要渦旋）。將50-100 µL的50%珠漿液轉(zhuǎn)移到0.5-1.5 mL的管中。

以1,000 x g或更低的速度離心珠以沉淀。小心移除上清液，避免丟失珠。

用洗滌緩沖液的10倍過量洗滌珠。輕輕混合，孵育1-2分鐘。重復(fù)洗滌步驟兩次。

小心移除洗滌上清液，并將珠在含有您的蛋白質(zhì)的結(jié)合緩沖液中重新懸浮。 a. 對于純化的蛋白質(zhì)，使用1-10 µg的蛋白質(zhì)，用足夠的結(jié)合緩沖液稀釋形成50%脂質(zhì)珠漿液。 b. 對于細(xì)胞裂解物、提取物、亞細(xì)胞組分：使用大約1 mg的總蛋白質(zhì)對1 mL結(jié)合緩沖液。將整個1 mL準(zhǔn)備好的樣品加入到您洗滌過的珠中。

將蛋白質(zhì)-珠溶液孵育1-3小時。孵育可以在室溫或4°C下進行，取決于您蛋白質(zhì)的穩(wěn)定性。需要連續(xù)運動以保持珠懸浮。

沉淀珠并小心移除上清液。如果需要，上清液可以用來監(jiān)測未結(jié)合的蛋白質(zhì)。

用洗滌緩沖液的10倍過量洗滌珠。輕輕混合，孵育1-2分鐘。重復(fù)洗滌步驟五次。如果您選擇在結(jié)合緩沖液中使用牛血清白蛋白（BSA），請確保在進入下一步之前將其c底洗出。

在最后一次洗滌后，通過向珠中加入等體積的2X Laemmli樣品緩沖液（或類似物）并加熱至70°C 10分鐘來洗脫結(jié)合的蛋白質(zhì)。

加熱后，沉淀珠并移除上清液。將上清液儲存在4°C下，直到分析。丟棄珠。

蛋白質(zhì)可以通過SDS-PAGE分離，并通過凝膠的Coomassie藍(lán)染色、蛋白質(zhì)轉(zhuǎn)移和免疫印跡檢測感興趣的蛋白質(zhì)，或進行自顯影。

文獻參考：

1) Alvarez, S. E., et al. (2010). “Sphingosine-1-phosphate is a missing cofactor for the E3 ubiquitin ligase TRAF2." Nature 465(7301): 1084.

2) Takasugi, N., et al. (2011). “BACE1 activity is modulated by cell-associated sphingosine-1-phosphate." J Neurosci 31(18): 6850-6857

3) Parham, K. A., et al. (2015). “Sphingosine 1-phosphate is a ligand for peroxisome proliferator-activated receptor-γ that regulates neoangiogenesis." The FASEB Journal 29(9): 3638-3653.

4) Nair, S., et al. (2018). “Antigen-mediated regulation in monoclonal gammopathies and myeloma." JCI insight 3(8) e98259.

Biogradetech成立于2015年，總部位于美國加利福尼亞州，早期以產(chǎn)品技術(shù)研發(fā)服務(wù)起家，逐步發(fā)展了廣泛的產(chǎn)品線，并將其商業(yè)化銷售，包括蛋白質(zhì)、抗體、酶、培養(yǎng)基、試劑盒和儀器。適用于細(xì)胞生物學(xué)、蛋白質(zhì)組學(xué)、分子生物學(xué)、免疫學(xué)、微生物學(xué)、診斷學(xué)、生物化學(xué)、神經(jīng)科學(xué)、血液分析和高通量藥物篩選等領(lǐng)域。

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