耐藥超敏EIA(96孔)試劑盒 返回列表頁(yè)

Resistin，一種富含半p氨酸的11.3 kDa蛋白質(zhì)（1），最初在小鼠中被發(fā)現(xiàn)（2），與RELM、RELMβ和RELM一起構(gòu)成抗素樣分子（RELM）蛋白家族。在人類中，只發(fā)現(xiàn)了resistin和RELMβ（1），但沒(méi)有發(fā)現(xiàn)RELM家族的其他蛋白質(zhì)。人類resistin與小鼠蛋白的同源性為53%（4）。它含有11個(gè)半p氨酸殘基，作為108個(gè)氨基酸的前體合成，并以二聚體形式分泌，具有半p氨酸殘基的二硫鍵。除了這個(gè)分子間的二硫鍵，還存在5個(gè)額外的分子內(nèi)二硫鍵。通過(guò)尺寸排除色譜法證明了多聚體和寡聚體的形成。由此表明，寡聚體的形成對(duì)SDS不敏感，但可以被β巰基乙醇抑制，因此可能是由二硫鍵引起的（1）。此外，resistin結(jié)構(gòu)似乎還取決于濃度，因?yàn)閳A二色譜分析顯示了從α-螺旋到β-折疊結(jié)構(gòu)的濃度依賴性轉(zhuǎn)變（1）。已在小鼠的白色脂肪組織、垂體和胰島以及大鼠的棕色脂肪組織中證明了resistin的表達(dá)。在人類中，可以在脂肪細(xì)胞中檢測(cè)到resistin的表達(dá)，但僅在非常低的水平。然而，在體外已顯示非脂肪細(xì)胞的脂肪組織中resistin的表達(dá)。人類resistin基因也在胰島、前脂肪細(xì)胞、巨噬細(xì)胞和骨髓中表達(dá)。因此，resistin與炎癥過(guò)程以及脂質(zhì)代謝相關(guān)。大多數(shù)研究涉及小鼠模型。在這里，證明了血清中三聚體和六聚體resistin的存在。與脂聯(lián)素生物學(xué)相比，不同的resistin寡聚體具有不同的生物學(xué)功能是非?？赡艿摹Ｔ谛∈笾?，經(jīng)驗(yàn)性地發(fā)現(xiàn)了脂肪性、胰島素抵抗和resistin表達(dá)之間的相關(guān)性。在人類中，研究結(jié)果并不明確——一些研究顯示resistin血清濃度與脂肪性或胰島素抵抗相關(guān)。但其他研究未能證實(shí)這些結(jié)果。因此，需要有效和可重復(fù)的測(cè)定resistin血清濃度。resistin在能量代謝之外的生理過(guò)程中的相關(guān)性已通過(guò)幾種不同的方法進(jìn)行了研究。與內(nèi)皮細(xì)胞的實(shí)驗(yàn)給出了有趣的結(jié)果。在這里，resistin被證明可以增強(qiáng)VCAM-1和ICAM-1的表達(dá)。因此，resistin可能能夠影響內(nèi)皮炎癥，從而影響動(dòng)脈粥樣硬化。這些結(jié)果通過(guò)在小鼠中的實(shí)驗(yàn)得到了驗(yàn)證，在那里內(nèi)皮素-1被證明可以調(diào)節(jié)resistin的分泌。在最近的研究中，人類resistin被證明可以增加前脂肪細(xì)胞的增殖和成熟脂肪細(xì)胞的脂解。通過(guò)調(diào)節(jié)MAPK信號(hào)傳導(dǎo)途徑，resistin對(duì)能量代謝施加關(guān)鍵影響。

作為ALPCO在中國(guó)的區(qū)域總代理，艾美捷科技強(qiáng)烈推薦ALPCO熱銷產(chǎn)品耐藥超敏EIA(96孔)。產(chǎn)品僅用于科研，不可用于臨床診斷。

耐藥超敏EIA(96孔)檢測(cè)原理：

抵抗素的酶免疫測(cè)定是一種所謂的夾心法。它利用了一種涂在微量滴定板孔上的特異性高親和力多克隆兔抗血清。樣品中的抵抗素與固定化抗血清定量結(jié)合。在接下來(lái)的步驟中，生物s化的檢測(cè)試劑依次與抵抗素結(jié)合。洗滌后，加入鏈霉抗生物s蛋白-過(guò)氧化物酶-酶偶聯(lián)物，并與結(jié)合的檢測(cè)抗體上的生物s結(jié)合。在封閉底物反應(yīng)中，顏色變化將根據(jù)樣品的抵抗素水平定量催化。

樣本

1 樣本類型

血清和血漿樣本均適用。在相應(yīng)的血清、肝素血漿、EDTA血漿和檸檬酸血漿樣本中未發(fā)現(xiàn)resistin水平的顯著偏差。必須考慮抗凝劑可能對(duì)樣本造成的稀釋。通過(guò)特殊的樣本緩沖液，測(cè)定前不需要外部樣本準(zhǔn)備（見(jiàn)下文）。

2 樣本收集

血清制備的血液樣本應(yīng)按照標(biāo)準(zhǔn)化的靜脈穿刺程序獲取。樣本應(yīng)無(wú)抗凝劑儲(chǔ)存。必須避免溶血。血液必須凝固，并且在w全凝固后，通過(guò)離心分離出血清。

3 所需樣本體積：15 ?L

4 樣本儲(chǔ)存

在緊閉的塑料管中儲(chǔ)存。

- 在20 - 25 °C下最多儲(chǔ)存2天

- 在–20°C下最少儲(chǔ)存2年

在–20°C下儲(chǔ)存樣本2年以上對(duì)測(cè)量值無(wú)影響。應(yīng)盡量減少樣本的凍融循環(huán)。

5 干擾

在100mg/mL、100 ?g/mL和1 mg/mL的濃度下分別測(cè)試了樣本中的甘油三酯、d紅素和溶血產(chǎn)物。溶血樣本似乎會(huì)顯示錯(cuò)誤的高resistin水平，應(yīng)批判性地檢查使用此類樣本。用戶應(yīng)驗(yàn)證使用溶血、脂血或黃疸樣本。

6 血清和血漿樣本稀釋

稀釋：1:21與樣本緩沖液（SB）。

在PE/PP管中移液300 ?L樣本緩沖液SB（在大量系列中推薦使用多步移液器），加入15 ?L血清或血漿樣本（稀釋1:21）?；旌虾?，可以使用兩個(gè)100 ?L樣本在測(cè)定中雙重評(píng)估樣本。根據(jù)預(yù)期的resistin水平，可能需要調(diào)整稀釋比例。樣本可以稀釋在1:5到1:400之間。樣本緩沖液的配方是為了允許正確測(cè)定resistin。建議樣本至少用樣本緩沖液稀釋1:5！

文獻(xiàn)參考：

1. Aruna B, Ghosh S, Singh AK, Mande SC, Srinivas V, Chauhan R, Ehtesham NZ. Humanrecombinant resistin protein displays a tendency to aggregate by forming intermoleculardisulfide linkages. Biochemistry 2003;42(36):10554-9.

2. Steppan CM, Lazar MA. Resistin and obesity-associated insulin resistance. Trends EndocrinolMetab 2002;13(1):18-23.

3. Yang RZ, Huang Q, Xu A, McLenithan JC, Eisen JA, Shuldiner AR, Alkan S, Gong DW, EisonJA. Comparative studies of resistin expression and phylogenomics in human and mouse.Biochem Biophys Res Commun 2003;310(3):927-35.

4. Banerjee RR, Lazar MA. Resistin: molecular history and prognosis. J Mol Med 2003;81(4):218-26.

5. Banerjee RR, Lazar MA. Dimerization of resistin and resistin-like molecules is determined by asingle cysteine. J Biol Chem 2001;276(28):25970-3

ALPCO產(chǎn)品種類多樣，可測(cè)樣品來(lái)源包括人、大/小鼠、豚鼠、兔、豬、羊、狗、猴等，涉及神經(jīng)生物學(xué)、骨代謝、心血管疾病和氧化應(yīng)激、細(xì)胞因子與信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)、糖尿病和肥胖癥、內(nèi)分泌學(xué)、甲狀腺功能、腸胃病學(xué)、免疫學(xué)、生殖激素、抗體和抗原、分子診斷等多個(gè)研究領(lǐng)域，尤以糖尿病和肥胖癥研究領(lǐng)域見(jiàn)長(zhǎng)。

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