超靈敏人生長激素ELISA試劑盒 返回列表頁

人類生長激素（hGH，也稱為生長素）的內(nèi)分泌系統(tǒng)極為復(fù)雜。hGH是位于染色體17上的GH-1基因的產(chǎn)物，在垂體細(xì)胞中表達(dá)。80%的hGH是一種非糖基化的22千道爾頓（kDa）蛋白質(zhì)，由191個氨基酸組成。大約20%的hGH是由替代剪接產(chǎn)生的20 kDa的變體形式。此外，還可以在血液循環(huán)中發(fā)現(xiàn)幾種更小的變體，以及翻譯后修飾的蛋白質(zhì)和不同程度的蛋白質(zhì)聚集。生長激素的生物活性由特定結(jié)合蛋白（GHBP）調(diào)節(jié)，GHBP由細(xì)胞膜上的GH受體的細(xì)胞外部分形成。這些修飾允許對hGH的半衰期及其生物活性進(jìn)行嚴(yán)格控制。除了合成和翻譯后修飾，hGH的分泌也受到嚴(yán)格調(diào)節(jié)。自發(fā)的脈沖式分泌每3小時發(fā)生一次，夜間睡眠期間分泌量最大。生理壓力或低血糖等不同因素會導(dǎo)致額外的hGH分泌，這是由下丘腦激素生長y素和生長激素釋放激素（GHRH）誘導(dǎo)的。研究表明，分泌的GH量受到多種因素的影響（參考文獻(xiàn)2-5）。

一種用于定量測量血清和血漿（肝素，EDTA）中人類生長激素的酶免疫分析法。僅供研究使用。不用于診斷程序。

作為ALPCO在中國的區(qū)域總代理，艾美捷科技強烈推薦ALPCO熱銷產(chǎn)品超靈敏人生長激素ELISA。產(chǎn)品僅用于科研，不可用于臨床診斷。

超靈敏人生長激素ELISA檢測原理：

超靈敏的人類生長激素ELISA是一種夾心測定法。它利用了一種涂在微量滴定板孔上的特異性、高親和力的多克隆兔抗血清。樣品中的hGH與固定化抗血清定量相關(guān)。在接下來的步驟中，生物s化抗體與hGH結(jié)合。洗滌后，加入鏈霉抗生物s蛋白-過氧化物酶偶聯(lián)物，其與抗體的生物s高度特異性結(jié)合，并根據(jù)樣品的hGH水平催化底物定量變色

樣本類型

血清和血漿

血清和肝素/EDTA血漿產(chǎn)生可比的值。檸檬酸血漿樣本中的hGH水平會降低，因為抗凝劑的量相對較多。除了血清和血漿樣本，hGH還可以在其他體液（如尿液和唾液）中測定，在各種人類細(xì)胞系的細(xì)胞培養(yǎng)上清液中進(jìn)行研究。此外，這種超敏感hGH ELISA還可以用來測量濾紙上干血斑樣本中的hGH，這已經(jīng)過外部驗證（9）。

樣本收集

? 研究表明，人類生長激素在日間/夜間呈脈沖式分泌。

? 血液采樣應(yīng)使用標(biāo)準(zhǔn)靜脈穿刺。避免溶血樣本。

所需樣本體積：10 ?L

樣本穩(wěn)定性

在密封樣本瓶中：

? 20-25°C下儲存：3天

? -20°C下儲存：至少2年

在-20°C下儲存樣本超過2年對結(jié)果沒有影響。應(yīng)盡量減少樣本的凍結(jié)和融化。五次凍融循環(huán)對樣本沒有影響。

樣本稀釋

? 血清/血漿稀釋：用稀釋緩沖液DIL稀釋1:26

? 在PE/PP管中用移液管取250 ?L稀釋緩沖液DIL（在大批量系列中建議使用多步移液器）；加入10 ?L樣本（稀釋1:26）?；旌虾笤跈z測中使用2x 100?L的該稀釋液。

? 稀釋后樣本的穩(wěn)定性：在20-25°C下最多1小時。

? 在血清和血漿以外的樣本中，hGH水平可能有很大差異，用戶必須自行找到最佳的稀釋比例。

干擾

樣本中的甘油三酯和膽紅s在100 mg/mL和200 ?g/mL的濃度下不會干擾。然而，應(yīng)由用戶驗證溶血、脂血或黃疸樣本的使用。

試驗比較研：

究Langkamp等人將用于人類生長激素測量的內(nèi)部試驗與該試驗進(jìn)行了比較（9）。結(jié)果顯示了非常好的可比性（見下圖）。

文獻(xiàn)參考：

1. Hauffa BP, Lehmann N, Bettendorf M, Mehls O, D?rr H-G, Partsch C-J, Schwarz HP, Stahnke N,Steinkamp H, Said E, Sander S, Ranke MB and participating Members of the German KIGS/IGLU StudyGroup (2004); Central reassessment of Growth hormone concentrations measured at local treatmentcenters in children with impaired growth: consequences for patient management. European Journal ofEndocrinology 150: 291 – 297

2. Baumann G (1991); Growth Hormone heterogeneity: Genes, Isohormones, variants and bindingprotein. Endocr Rev 12:424-449

3. Clemmons DR, Chihara K, Freda PU, Ho KKY, Klibanski A, Melmed S, Shalet S, Strasburger CJ,Trainer PJ, Thorner MO (2003); Optimizing control of acromegaly: Integrating a Growth Hormonereceptor antagonist into the treatment algorithm. J Clin Ebdocrinol Metab 88:4759-4767

ALPCO產(chǎn)品種類多樣，可測樣品來源包括人、大/小鼠、豚鼠、兔、豬、羊、狗、猴等，涉及神經(jīng)生物學(xué)、骨代謝、心血管疾病和氧化應(yīng)激、細(xì)胞因子與信號轉(zhuǎn)導(dǎo)、糖尿病和肥胖癥、內(nèi)分泌學(xué)、甲狀腺功能、腸胃病學(xué)、免疫學(xué)、生殖激素、抗體和抗原、分子診斷等多個研究領(lǐng)域，尤以糖尿病和肥胖癥研究領(lǐng)域見長。

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