快速DNA連接試劑盒

快速DNA連接試劑盒（Rapid DNA Ligation Kit） 是研發(fā)的一種把DNA段在短至5-10分鐘內(nèi)快速插入到載體（vector）中的連接試劑盒。對(duì)于雙粘端DNA段的插入僅需5-10分鐘即可完成，對(duì)于雙平端DNA段的插入僅需15分鐘即可完成。同時(shí)本試劑盒也可以用于其它各種常規(guī)的雙鏈DNA連接反應(yīng)。連接30分鐘即可達(dá)到Z佳效果，與連接過(guò)夜的效果*。

快速DNA連接試劑盒(Rapid DNA Ligation Kit) 是上海雅吉研發(fā)的一種把DNA段在短至5-10分鐘內(nèi)快速插入到載體(vector)中的連接試劑盒。對(duì)于雙粘端DNA段的插入僅需5-10分鐘即可完成，對(duì)于雙平端DNA段的插入僅需15分鐘即可完成。同時(shí)本試劑盒也可以用于其它各種常規(guī)的雙鏈DNA連接反應(yīng)。連接30分鐘即可達(dá)到*效果，與連接過(guò)夜的效果*。
      本試劑盒可以用于PCR片段和載體的連接、酶切產(chǎn)物和載體的連接、linker和載體的連接、linker和linker的連接等各種雙鏈DNA的連接。
      為了獲得快速高效的連接效果，本試劑盒采用了一種特殊的高活力Rapid T4 DNA Ligase以及相應(yīng)的快速連接緩沖液，確保在短時(shí)間內(nèi)可以獲得很好的連接效果。連接30分鐘和連接過(guò)夜的效果相當(dāng)，通常只須連接5-10分鐘即可滿足常規(guī)用途(圖1)。

     

圖1.快速DNA連接試劑盒實(shí)測(cè)效果圖。雙酶切后的載體室溫自連30min(A)或16℃自連過(guò)夜(D)作為陰性對(duì)照；雙酶切后的載體與待插入片段室溫連接10min(B)、30min(C)或者16℃連接過(guò)夜(E)，隨后轉(zhuǎn)化細(xì)菌涂板，并于第二天取平板觀察拍照。
      在確保連接效果的同時(shí)，確保完成連接后不必進(jìn)行任何純化即可直接轉(zhuǎn)化細(xì)菌。另外，快速連接緩沖液中已經(jīng)含有ATP、鎂離子等各種必需物質(zhì)，無(wú)需再添加其它任何試劑。
      用于總體積為10μl的連接體系時(shí)可以進(jìn)行100個(gè)連接反應(yīng)，用于總體積為20μl的連接體系時(shí)可以進(jìn)行50個(gè)連接反應(yīng)。
包裝清單：
產(chǎn)品編號(hào)    產(chǎn)品名稱    包裝
D7002-1    快速連接緩沖液(2X)    0.5ml
D7002-2    Rapid T4 DNA ligase    50μl
—    說(shuō)明書    1份
保存條件：
      -20℃保存。
注意事項(xiàng)：
      連接反應(yīng)完成后即可直接轉(zhuǎn)化細(xì)菌，請(qǐng)勿采用加熱方法失活Rapid T4 DNA ligase。加熱處理會(huì)導(dǎo)致后續(xù)的轉(zhuǎn)化效率顯著下降。
      對(duì)于載體單酶切插入外源片段的情況，需注意對(duì)載體進(jìn)行脫磷處理，以避免質(zhì)粒自連。
      快速連接緩沖液(2X)使用前一定要*溶解并混勻，加入到連接體系后也須注意混勻。
      僅限于專業(yè)人員的科學(xué)研究用，不得用于臨床診斷或治療，不得用于食品或藥品，不得存放于普通住宅內(nèi)。
      為了您的安全和健康，請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。