詳細(xì)介紹
生物素3'末端DNA標(biāo)記試劑盒(Biotin 3' End DNA Labeling Kit)是一種通過(guò)Terminal Deoxynucleotidyl Transferase(TdT)把生物素標(biāo)記的dUTP添加到生物素3' 末端DNA標(biāo)記試劑盒。通常DNA的3'末端被標(biāo)記后不會(huì)干擾雜交反應(yīng),也不會(huì)干擾基于序列特異性蛋白結(jié)合的EMSA檢測(cè);因此生物素標(biāo)記的DNA探針可以用于常規(guī)的Northern、Southern、EMSA(即gel shift)以及colony hybridization或原位雜交等。
Terminal Deoxynucleotidyl Transferase(TdT)可以在不依賴(lài)于模板的情況下催化在DNA的3'-OH端加上dNTP的反應(yīng)。關(guān)于TdT催化雙鏈DNA末端加dNTP的反應(yīng)效率,3'端突出的雙鏈DNA要比平端或3'端縮進(jìn)的雙鏈DNA高很多。TdT催化單鏈DNA末端加dNTP的反應(yīng)效率要比雙鏈DNA高很多。在適當(dāng)?shù)臈l件下,TdT也可以催化RNA 3'末端加NTP的反應(yīng)。
本試劑盒適合標(biāo)記純化的單鏈DNA,如果用于標(biāo)記EMSA探針,可以在單鏈標(biāo)記后再進(jìn)行退火。
生物素3' 末端DNA標(biāo)記試劑盒中提供了已經(jīng)用生物素標(biāo)記好的Biotin-Control Oligo,可以用作檢測(cè)DNA標(biāo)記效率的對(duì)照。
如果每個(gè)標(biāo)記反應(yīng)的探針量為5pmol,本試劑盒可以用于20個(gè)標(biāo)記反應(yīng)。
包裝清單:
產(chǎn)品編號(hào) 產(chǎn)品名稱(chēng) 包裝
D3106-1 TdT Buffer(5X) 250μl
D3106-2 TdT(10U/μl) 20μl
D3106-3 Biotin-11-dUTP(5μM) 100μl
D3106-4 Biotin-Control Oligo(0.4μM) 100μl
D3106-5 Ultrapure water 1ml
D3106-6 探針標(biāo)記終止液 200μl
D3106-7 TE 15ml
— 說(shuō)明書(shū) 1份
保存條件:
-20℃保存。
注意事項(xiàng):
需自備用于檢測(cè)探針標(biāo)記效率的帶正電荷尼龍膜,以及用于生物素檢測(cè)的相關(guān)試劑。帶正電荷尼龍膜(FFN12/FFN16)可以向碧云天訂購(gòu)。
生物素3' 末端DNA標(biāo)記試劑盒僅限于專(zhuān)業(yè)人員的科學(xué)研究用,不得用于臨床診斷或治療,不得用于食品或藥品,不得存放于普通住宅內(nèi)。
為了您的安全和健康,請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。