II cDNA*鏈合成試劑盒（RNase H-）

上海雅吉的BeyoRT™ II cDNA*鏈合成試劑盒（RNase H-），即BeyoRT™II First Strand cDNA Synthesis Kit （RNase H minus），是一種采用了經(jīng)過改造和優(yōu)化的BeyoRT™ II M-MLV反轉(zhuǎn)錄酶（RNase H-），用于以總RNA、mRNA等為模板反轉(zhuǎn)錄合成cDNA*鏈的試劑盒。

上海雅吉的BeyoRT™ II cDNA*鏈合成試劑盒(RNase H-)，即BeyoRT™II First Strand cDNA Synthesis Kit (RNase H minus)，是一種采用了經(jīng)過改造和優(yōu)化的BeyoRT™ II M-MLV反轉(zhuǎn)錄酶(RNase H-)，用于以總RNA、mRNA等為模板反轉(zhuǎn)錄合成cDNA*鏈的試劑盒。本試劑盒包含了進(jìn)行cDNA*鏈合成所需的各種試劑。
      使用本試劑盒合成的*鏈，可以直接用于后續(xù)的常規(guī)PCR、real-time PCR也稱定量
PCR(quantitative PCR, qPCR)、cDNA的第二鏈合成以及cDNA文庫的構(gòu)建等。
      BeyoRT™ II cDNA*鏈合成試劑盒(RNase H-)可以輕松完成長度為8 kb及以下基因的反轉(zhuǎn)錄(參考圖1)，反轉(zhuǎn)錄的zui大長度可以超過10 kb。在采用BeyoRT™ II M-MLV反轉(zhuǎn)錄酶(RNase H-)的情況下，由于缺失了RNase H酶活性，RNA和DNA雙鏈復(fù)合物中的RNA不會被降解，這樣反轉(zhuǎn)錄出來的cDNA的長度就會更長，并且產(chǎn)量更高。

 

圖1. 使用本試劑盒對總RNA反轉(zhuǎn)錄后，對于不同長度的cDNA進(jìn)行PCR擴(kuò)增后的電泳效果圖。圖中可見對于0.2-8kb的cDNA可以非常高效地被反轉(zhuǎn)錄。
      本試劑盒中的BeyoRT™ II M-MLV反轉(zhuǎn)錄酶(RNase H-)熱穩(wěn)定性高，zui適反應(yīng)溫度為42-45℃，但當(dāng)溫度達(dá)到50℃時仍具有很高活性，且可獲得較高產(chǎn)量的cDNA。
     BeyoRT™ II cDNA*鏈合成試劑盒(RNase H-)中提供了RNase Inhibitor，確保在反轉(zhuǎn)錄過程中的RNA不會被RNA酶所降解并取得較好的反轉(zhuǎn)錄效果。
      試劑盒還提供了Oligo(dT)18和random hexamer這兩種引物，前者適合用于帶有Poly(A)尾的mRNA的反轉(zhuǎn)錄，后者進(jìn)行反轉(zhuǎn)錄時不需要poly(A)尾。也可以自行采用基因特異性引物進(jìn)行cDNA*鏈的合成。
      用于體積為20微升的cDNA*鏈合成反應(yīng)時，不同包裝的本試劑盒足夠分別進(jìn)行20個，100個及500個cDNA*鏈樣品的合成。
包裝清單：

裝清單：
產(chǎn)品編號    產(chǎn)品名稱    包裝
D7168L-1    BeyoRT™ II M-MLV反轉(zhuǎn)錄酶(RNase H-)    500μl
D7168L-2    Reaction Buffer (5X)    2.5ml
D7168L-3    RNase Inhibitor (20U/μl)    500μl
D7168L-4    dNTP Mix (10 mM each)    1ml
D7168L-5    Oligo(dT)18 Primer (0.5μg/μl)    500μl
D7168L-6    Random Hexamer Primer (0.2μg/μl)    500μl
D7168L-7    DEPC-treated Water    7.5ml
—    說明書    1份
保存條件：
      -20℃保存。
注意事項：
      對于GC含量比較高的RNA的反轉(zhuǎn)錄，產(chǎn)品的使用說明中都給予了特別說明，請予以關(guān)注。
      BeyoRT™ II cDNA*鏈合成試劑盒(RNase H-)僅限于專業(yè)人員的科學(xué)研究用，不得用于臨床診斷或治療，不得用于食品或藥品，不得存放于普通住宅內(nèi)。
      為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。