一氧化氮合成酶檢測(cè)試劑盒（熒光法）

一氧化氮合成酶檢測(cè)試劑盒(熒光法)(Nitric Oxide Synthase Assay Kit)可以檢測(cè)活細(xì)胞內(nèi)總的一氧化氮合成酶的活性。如果和特異性的一氧化氮合成酶抑制劑配合使用，也可以檢測(cè)不同類(lèi)型的一氧化氮合成酶的活性。
      本試劑盒提供了一種在生理?xiàng)l件下通過(guò)熒光檢測(cè)活細(xì)胞內(nèi)一氧化氮合成酶活性的方法，不需要使用傳統(tǒng)方法所需的放射性同位素。本試劑盒采用了可以穿透細(xì)胞膜的一代一氧化氮熒光檢測(cè)探針DAF-FM DA(3-amino,4-aminomethyl-2',7'-difluorescein, diacetate)，在提供充足的底物的條件下檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)的一氧化氮合成酶可以催化產(chǎn)生的一氧化氮量，從而檢測(cè)出一氧化氮合成酶的活性。詳細(xì)的檢測(cè)原理參考圖1。采用一些一氧化氮合成酶的抑制劑則可以測(cè)定出特定類(lèi)型的一氧化氮合成酶的活性。例如，采用iNOS抑制劑，未加iNOS抑制劑測(cè)定出來(lái)的酶活力減去加了iNOS抑制劑測(cè)定出來(lái)的酶活力就是iNOS的酶活力。

 
本試劑盒是目前為止世界上進(jìn)的一種一氧化氮合成酶檢測(cè)試劑盒。和Calbiochem等多年前就開(kāi)始提供的一氧化氮合成酶檢測(cè)試劑盒相比無(wú)需使用同位素，和Sigma等zui近推出的基于熒光的一氧化氮合成酶檢測(cè)試劑盒相比采用了一代的熒光探針，靈敏度更高，特異性更好。本試劑盒的缺點(diǎn)是和其它熒光法一氧化氮合成酶檢測(cè)試劑盒一樣，僅能提供一氧化氮合成酶的相對(duì)活性。
      一氧化氮合成酶檢測(cè)試劑盒(熒光法)和檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)一氧化氮水平的不同之處在于提供了充足的底物L(fēng)-Arginine和一些可以穿透細(xì)胞膜的反應(yīng)輔助因子，確保一氧化氮合成酶的催化的一氧化氮合成不會(huì)受底物的量或輔助因子的量的限制，從而可以測(cè)定出細(xì)胞內(nèi)一氧化氮合成酶活力。
      本試劑盒用于貼壁的細(xì)胞或組織的一氧化氮合成酶的檢測(cè)，對(duì)懸浮細(xì)胞也可以進(jìn)行檢測(cè)。
      本試劑盒可以測(cè)定100個(gè)樣品。
包裝清單：
產(chǎn)品編號(hào)    產(chǎn)品名稱(chēng)    包裝
S0025-1    NOS檢測(cè)緩沖液(2X)    15ml
S0025-2    精氨酸溶液    600μl
S0025-3    NADPH    2.3mg
S0025-4    DAF-FM DA(5mM)    20μl
—    說(shuō)明書(shū)    1份
保存條件：
      -20℃保存，DAF-FM DA需避光保存，半年有效。
一氧化氮合成酶檢測(cè)試劑盒(熒光法)注意事項(xiàng)：
      RPMI 1640等含有較高濃度硝酸鹽的培養(yǎng)液容易對(duì)本試劑盒的檢測(cè)產(chǎn)生干擾，請(qǐng)盡量避免。
      由于檢測(cè)過(guò)程中有還原反應(yīng)，凡是影響還原反應(yīng)的氧化或還原試劑要注意避免，例如常用的還原劑DTT和巰基乙醇。
      DAF-FM DA在4℃、冰浴等較低溫度情況下會(huì)凝固而粘在離心管管底、管壁或管蓋內(nèi)，可以20-25℃水浴溫育片刻至全部融解后使用。
      本產(chǎn)品僅限于專(zhuān)業(yè)人員的科學(xué)研究用，不得用于臨床診斷或治療，不得用于食品或藥品，不得存放于普通住宅內(nèi)。
      為了您的安全和健康，請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。