詳細(xì)介紹
總谷胱甘肽檢測試劑盒(Total Glutathione Assay Kit)是一種簡單易行的檢測總谷胱甘肽(GSSG+GSH)的試劑盒。通過谷胱甘肽還原酶把氧化型谷胱甘肽(GSSG)還原成還原型谷胱甘肽(GSH),而GSH可以和生色底物DTNB反應(yīng)產(chǎn)生黃色的TNB和GSSG。適當(dāng)配制反應(yīng)體系,前后兩個反應(yīng)合并起來后,總谷胱甘肽(GSSG+GSH)就相當(dāng)于一個顏色產(chǎn)生的限速因素,總谷胱甘肽的量就決定了黃色的TNB形成量。從而通過測定A412就可以計算出總谷胱甘肽的量。
本試劑盒的具體反應(yīng)原理如下:
兩個反應(yīng)相合并:
還原型谷胱甘肽是絕大多數(shù)活細(xì)胞中巰基的主要來源,對于維護(hù)蛋白巰基適當(dāng)?shù)难趸€原狀態(tài)有重要作用,并且是動物細(xì)胞中關(guān)鍵的抗氧化劑。總谷胱甘肽中通常90-95%為還原型谷胱甘肽。
本試劑盒可以檢測動物組織、血漿、紅細(xì)胞、和培養(yǎng)細(xì)胞或其它適當(dāng)樣品中總谷胱甘肽的含量。
本試劑盒提供了蛋白去除試劑S,可以更加準(zhǔn)確地測定出含有蛋白的樣品中的總谷胱甘肽的量。
總谷胱甘肽檢測試劑盒的檢測下限為1μM。一個試劑盒共可以進(jìn)行100次檢測。
包裝清單:
產(chǎn)品編號 產(chǎn)品名稱 包裝
S0052-1 總谷胱甘肽檢測緩沖液 60ml
S0052-2 谷胱甘肽還原酶 150μl
S0052-3 還原型谷胱甘肽(GSH) 4.5mg
S0052-4 DTNB 4.5mg
S0052-5 蛋白去除試劑S 0.4g
S0052-6 NADPH 4mg
S0052-7 DMSO 1.5ml
— 說明書 1份
保存條件:
-20℃保存,一年有效。還原型谷胱甘肽配制成溶液后,需適當(dāng)分裝,-20℃保存至少3個月有效。DTNB溶解在DMSO中后,需適當(dāng)分裝,-20℃保存至少3個月有效。蛋白去除試劑S配制成溶液后可以4℃保存。NADPH溶解后,適當(dāng)分裝,-70℃保存。
注意事項:
本試劑盒檢測時牽涉到氧化還原反應(yīng),所有氧化劑或還原劑都會干擾本試劑盒的測定。特別是DTT、巰基乙醇等含有巰基的試劑會嚴(yán)重干擾本試劑盒的測定,請盡量避免。
一定要嚴(yán)格控制反應(yīng)時的溫度和反應(yīng)時間,否則需每次都做標(biāo)準(zhǔn)曲線。
NADPH等試劑不太穩(wěn)定,要嚴(yán)格按照后續(xù)說明操作,謹(jǐn)防失活。
DMSO在4℃、冰浴等較低溫度情況下會凝固,可以20-25℃水浴溫育片刻至全部融解后使用。
僅限于專業(yè)人員的科學(xué)研究用,不得用于臨床診斷或治療,不得用于食品或藥品,不得存放于普通住宅內(nèi)。
為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。