詳細介紹
抗氟離子酸性磷酸酶檢測試劑盒(Fluoride Resistant Acid Phosphatase Assay Kit)是一種用于快速、便捷地檢測細胞或組織樣品的裂解或勻漿產物的上清液、血漿、血清、尿液等樣品中內源性的抗氟離子酸性磷酸酯酶活性的試劑盒。
酸性磷酸酶(Acid Phosphatase),也稱酸性磷酸酯酶,在酸性條件下可以催化磷酸酯鍵的水解。酸性磷酸酶是一個蛋白家
族,哺乳動物中其分子量從18kD到100kD不等。酸性磷酸酶主要分為兩類,一類為抗酒石酸酸性磷酸酶(tartrate resistant acid phosphatase, TRAP),一類為抗氟離子酸性磷酸酶(fluoride resistant acid phosphatase, FRAP)。
抗氟離子酸性磷酸酶包括在絕大多數(shù)細胞的溶酶體中表達的溶酶體酸性磷酸酶、前列腺(prostate gland)、腦、肝臟、脾臟和血小板中表達的酸性磷酸酶。抗氟離子酸性磷酸酶在前列腺中的表達水平非常高,當前列腺發(fā)生癌變并出現(xiàn)轉移時抗氟離子的前列腺特異性酸性磷酸酶(prostatic acid phosphatase)活性水平zui高。當前列腺發(fā)生病變時會導致血液中抗氟離子酸性磷酸酶活性顯著升高。同時,血液中檢測到抗氟離子酸性磷酸酶活性升高時,通常是前列腺發(fā)生病變。因此,血清或血漿中抗氟離子酸性磷酸酶活性水平的升高,常被用作前列腺癌等前列腺病變的指標。溶酶體儲存性疾病(lysosomal storage diseases)如Gaucher's
disease等,也會導致血液中抗氟離子酸性磷酸酶活性水平一定程度的升高。
抗氟離子酸性磷酸酶檢測試劑盒可以檢測血漿、血清、尿液、細胞或組織的裂解液或勻漿液或純化的酶樣品等中的抗氟離子酸性磷酸酶活性。
Para-nitrophenyl phosphate (pNPP)是一種常用的磷酸酶顯色底物,在酸性條件下,可在酸性磷酸酶作用下生成
para-nitrophenol。para-nitrophenol (p-nitrophenol)在堿性條件下,呈黃色產物,可以在400-415nm檢測吸光度。產物黃色越深,說明酸性磷酸酶檢活性越高,反之則酶活性越低。據(jù)此通過比色分析就可以計算出酸性磷酸酶活性水平。在適量的氟離子存在的情況下進行酸性磷酸酶的活性檢測,檢測得到的酸性磷酸酶活性就是抗氟離子酸性磷酸酶活性。
包括標準品和空白對照,本試劑盒共可進行120個樣品的檢測。
包裝清單:
產品編號 產品名稱 包裝
P0335-1 檢測緩沖液 15ml
P0335-2 顯色底物 2管
P0335-3 氟離子溶液 1ml
P0335-4 p-nitrophenol溶液(10mM) 0.1ml
P0335-5 反應終止液 20ml
— 說明書 1份
保存條件:
-20℃保存,一年有效。顯色底物和p-nitrophenol溶液需避光保存。
注意事項:
如果希望進行酶活性的定量,進行酶反應時必須注意精確計時。此時推薦采用孵育30分鐘等較長的時間,以減小操作過程中的時間誤差。同時如果樣品中酶活性較高,則可以預先適當稀釋樣品。
樣品溶液中須避免出現(xiàn)各種酸性磷酸酶抑制劑。
一管顯色底物配制后需當日使用完畢,因此請注意適當多準備一些樣品一起檢測,以避免試劑盒浪費。
氟離子溶液和p-nitrophenol溶液對人體有害,操作時請小心,并注意有效防護以避免直接接觸人體或吸入體內。反應終止液有腐蝕性,操作時請小心,并注意有效防護以避免直接接觸人體或腐蝕其他物品。
僅限于專業(yè)人員的科學研究用,不得用于臨床診斷或治療,不得用于食品或藥品,不得存放于普通住宅內。
為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。