詳細(xì)介紹
人基質(zhì)細(xì)胞衍生因子1a(SDF-1a)Elisa試劑盒優(yōu)點如下:
1、快速簡便:速率法,20分鐘可完成20-40例樣本的測定。
2、取樣量微:取樣量僅為50l左右
3、穩(wěn)定性好:試劑盒2~8℃存放6個月有效。
4、再現(xiàn)性好:變異系數(shù)CV=1.7%。
5、回收試驗: X =102%。
6、受外界影響因素?。焊蓴_因素少,重復(fù)性強。
7、測試面廣:可測各種動物血清(漿)、組織等
人基質(zhì)細(xì)胞衍生因子1a(SDF-1a)Elisa試劑盒植物組織樣本的前處理:
1、勻漿介質(zhì):
一般采用磷酸鹽緩沖液(0.1mol/L pH 7.4)或生理鹽水(0.86%或0.9%),客戶可根據(jù)樣本及測定指標(biāo)的情況自行設(shè)定濃度,目的是保持樣本的等滲環(huán)境。
2、組織勻漿液的制備:
①、手工勻漿:取組織塊(0.2g~0.5g)在冰冷的勻漿介質(zhì)中漂洗,濾紙拭干,準(zhǔn)確稱重,放入勻漿管中,按重量(g):體積(ml)=1:4的比例加入4倍體積的勻漿介質(zhì)于勻漿管中,冰水浴條件下,用眼科小剪盡快剪碎組織塊,將玻璃勻漿管置于冰水浴條件,手動勻漿,30秒/次,間隔30秒,重復(fù)6~8次,制成20%的勻漿液。
②、機器勻漿:取組織塊(0.2g~0.5g)在冰冷的勻漿介質(zhì)中漂洗,濾紙拭干,準(zhǔn)確稱重,放入勻漿管中,按重量(g):體積(ml)=1:4的比例加入4倍體積的勻漿介質(zhì)于勻漿管中,冰水浴條件下,用眼科小剪盡快剪碎組織塊,機械式勻漿機(組織搗碎機或內(nèi)切式勻漿機),10000~15000轉(zhuǎn)/分,冰水浴條件下,15秒/次,間隙30秒,連續(xù)3~5次,制成20%的勻漿液。
③、液氮研磨:取組織塊(0.2g~0.5g)在冰冷的勻漿介質(zhì)中漂洗,濾紙拭干,準(zhǔn)確稱重,放
入研缽中,用眼科小剪盡快剪碎組織塊,加入液氮研磨至粉末狀(研磨要迅速),加入勻漿
介質(zhì),充分抽提,制備成20%的勻漿液。
鏡檢觀察:取少量組織勻漿作涂片,顯微鏡下觀察細(xì)胞是否破碎,若沒有則可延長勻漿時間。
勻漿上清液的制備:將制備好的20%勻漿液用普通離心機或低溫低速離心機3500轉(zhuǎn)/分左右,離心10~15分鐘,取上清液進行測定(測定相應(yīng)指標(biāo)的同時需測一下相應(yīng)樣本的蛋白濃度,總蛋白測試盒本所有售)。
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