詳細(xì)介紹
【原理】
人γ肽(Pγ)Elisa試劑盒采用免疫膠體金層析技術(shù)制成,可快速檢測(cè)豬血清中的豬瘟病毒抗體。將豬瘟病毒抗原包被在硝酸纖維素膜的檢測(cè)線(T)上,抗豬瘟病毒抗體包被在硝酸纖維素膜的質(zhì)控線(C)上,用膠體金標(biāo)記的豬瘟病毒抗原干燥后置于玻璃纖維素膜下端。當(dāng)血清加入加樣孔內(nèi),由于層析的原理,血清開始沿紙條移動(dòng),當(dāng)遇上干燥的金標(biāo)抗原,將其溶解,并帶著金標(biāo)抗原繼續(xù)往上移動(dòng),至硝酸纖維素膜的檢測(cè)線。如果樣品中有豬瘟病毒抗體存在時(shí),包被在檢測(cè)線上的豬瘟病毒抗原和金標(biāo)豬瘟病毒抗原與樣品中的豬瘟病毒抗體將會(huì)在檢測(cè)線上形成一個(gè)夾心的免疫復(fù)合物,呈一條紫紅色線,判定為陽(yáng)性。樣品中的抗體效價(jià)越高,色線顏色越深。如果樣品中沒有豬瘟病毒抗體,檢測(cè)線(T)上沒有色帶出現(xiàn),判定為陰性。樣品和金標(biāo)抗原繼續(xù)往上移至質(zhì)控線時(shí),此處的抗豬瘟病毒抗體將會(huì)同金標(biāo)豬瘟病毒抗原結(jié)合,在質(zhì)控線(C)上形成一條紫紅色線,證明本檢測(cè)試劑有效。
【血清制備】
按常規(guī)方法抽取2-3ml血液置潔凈干燥的試管中,靜置0.5-1小時(shí)待血液凝固后于4000轉(zhuǎn)/分鐘離心10分鐘(也可將血液靜置1-2小時(shí),待血液凝固自然析出血清),分離血清。要求血清清亮,無溶血、無污染。血清樣品短期可于2~8℃保存,長(zhǎng)期需置-20℃保存。
【人γ肽(Pγ)Elisa試劑盒操作方法】
1.在檢測(cè)卡的加樣孔內(nèi)加入2滴(約80ul)待檢血清樣品。
2. 將檢測(cè)卡平放于桌面上,在室溫下靜置5-20分鐘內(nèi)判定結(jié)果,超過20分鐘的結(jié)果只能作為參考。
【結(jié)果判斷】
1. 陰性:在觀察孔內(nèi),只有對(duì)照線區(qū)(C)出現(xiàn)一條紫紅色線。
2. 陽(yáng)性:在觀察孔內(nèi),檢測(cè)線區(qū)(T)及對(duì)照線區(qū)(C)同時(shí)出現(xiàn)紫紅色線??贵w滴度越高,檢測(cè)線(T)顏色越深。
3. 弱陽(yáng)性:在觀察孔內(nèi),檢測(cè)線區(qū)(T)及對(duì)照線區(qū)(C)同時(shí)出現(xiàn)紫紅色線,但檢測(cè)線區(qū)(T)出現(xiàn)的顏色很淺。
4. 失效:在觀察孔內(nèi),對(duì)照線區(qū)(C)和檢測(cè)線區(qū)(T)都不出現(xiàn)色線;或僅檢測(cè)線區(qū)(T)出現(xiàn)色線。
【診斷參考】
1.如果該豬未接種過豬瘟病毒疫苗:
a) 當(dāng)被檢樣品檢測(cè)線(T)處無明顯色帶出現(xiàn),說明被檢測(cè)樣品中沒有豬瘟病毒抗體。如果豬群健康,應(yīng)當(dāng)及時(shí)進(jìn)行豬瘟病毒疫苗接種。
b) 當(dāng)被檢樣品檢測(cè)線(T)處有明顯色帶出現(xiàn),則該豬有可能為野毒感染,應(yīng)進(jìn)一步觀察驗(yàn)證。
2.如果該豬已接種過豬瘟病毒疫苗:
c) 當(dāng)被檢樣品檢測(cè)線(T)條帶的色澤≥對(duì)照卡中1:16效價(jià)時(shí),說明豬瘟病毒抗體的滴度較高,已達(dá)到抵御強(qiáng)度攻擊的保護(hù)水平。
b) 當(dāng)被檢樣品檢測(cè)線(T)條帶的色澤<對(duì)照卡中1:16效價(jià)時(shí),說明豬瘟病毒抗體效價(jià)未達(dá)到抵御豬瘟病毒強(qiáng)度攻擊的zui低保護(hù)滴度,建議進(jìn)行疫苗補(bǔ)種。
【人γ肽(Pγ)Elisa試劑盒注意事項(xiàng)】
1.檢測(cè)前請(qǐng)仔細(xì)閱讀說明書,本產(chǎn)品提供的各種試劑僅供本實(shí)驗(yàn)用;
2.檢測(cè)卡從冰箱中取出時(shí)應(yīng)恢復(fù)到室溫后打開,打開的檢測(cè)卡應(yīng)盡快使用以免受潮后檢測(cè)卡將失效;
3.待檢血清樣品應(yīng)新鮮清亮,溶血或腐的樣品不可用于檢測(cè);
4.實(shí)驗(yàn)的廢棄物應(yīng)按污染物處理規(guī)定妥善處理。
【儲(chǔ)存及有效期】人γ肽(Pγ)Elisa試劑盒保存于干燥陰涼處(2-30℃),保質(zhì)期24個(gè)月。