詳細(xì)介紹
人食欲素受體(OXR)Elisa試劑盒是一種敏感性高,特異性強(qiáng),重復(fù)性好的實驗方法。由于其試劑穩(wěn)定、易保存,操作簡便,結(jié)果判斷較客觀等因素,已廣泛應(yīng)用在免疫學(xué)檢驗的各領(lǐng)域中。
實驗原理:
上海雅吉生物試劑盒檢測方法有:雙抗體夾心法、間接法、競爭法
標(biāo)本要求
1.血清:
室溫血液自然凝固10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
2.血漿:
應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成應(yīng)再次離心。
3.尿液:
用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實行。
4.細(xì)胞培養(yǎng)上清:
檢測分泌性的成份時,用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。
5.培養(yǎng)細(xì)胞:
檢測細(xì)胞內(nèi)的成份時,用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細(xì)胞懸液,細(xì)胞濃度達(dá)到100萬/ml左右。通過反復(fù)凍融或加入組織蛋白萃取試劑,以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
6.組織標(biāo)本:
切割標(biāo)本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆?。?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),或組織蛋白萃取試劑, 用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿化。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。分裝后一份待檢測,其余冷凍備用。
7.標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取,提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行,提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實驗。若不能馬上進(jìn)行試驗,可將標(biāo)本放于-20℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融
8.不能檢測含NaN3的樣品,因NaN3抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。
操作步驟
標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋:人麻疹病毒IgM(MV-IgM)Elisa試劑盒提供原倍標(biāo)準(zhǔn)品一支,用戶可按照下列圖表在小試管中進(jìn)行稀釋。
2000pg/ml 5號標(biāo)準(zhǔn)品 150μl的原倍標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
1000pg/ml 4號標(biāo)準(zhǔn)品 150μl的5號標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
500pg/ml 3號標(biāo)準(zhǔn)品 150μl的4號標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
250pg/ml 2號標(biāo)準(zhǔn)品 150μl的3號標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
125pg/ml 1號標(biāo)準(zhǔn)品 150μl的2號標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
加樣:分別設(shè)空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑,其余各步操作相同)、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測樣品孔。在酶標(biāo)包被板上標(biāo)準(zhǔn)品準(zhǔn)確加樣50μl,待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測樣品10μl(樣品zui終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻。
溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。
配液:將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用
洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復(fù)5次,拍干。
加酶:每孔加入酶標(biāo)試劑50μl,空白孔除外。
溫育:操作同3。
洗滌:操作同5。
顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色10分鐘.
終止:每孔加終止液50μl,終止反應(yīng)(此時藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色)。
測定:以空白空調(diào)零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值)。 測定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進(jìn)行。
操作程序總結(jié):
計算
以標(biāo)準(zhǔn)物的濃度為橫坐標(biāo),OD值為縱坐標(biāo),在坐標(biāo)紙上繪出標(biāo)準(zhǔn)曲線,根據(jù)樣品的OD值由標(biāo)準(zhǔn)曲線查出相應(yīng)的濃度;再乘以稀釋倍數(shù);或用標(biāo)準(zhǔn)物的濃度與OD值計算出標(biāo)準(zhǔn)曲線的直線回歸方程式,將樣品的OD值代入方程式,計算出樣品濃度,再乘以稀釋倍數(shù),即為樣品的實際濃度。
人食欲素受體(OXR)Elisa試劑盒注意事項
1.試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30分鐘后方可使用,酶標(biāo)包被板開封后如未用完,板條應(yīng)裝入密封袋中保存。
2.濃洗滌液可能會有結(jié)晶析出,稀釋時可在水浴中加溫助溶,洗滌時不影響結(jié)果。
3.各步加樣均應(yīng)使用加樣器,并經(jīng)常校對其準(zhǔn)確性,以避免試驗誤差。一次加樣時間很好控制在5分鐘內(nèi),如標(biāo)本數(shù)量多,推薦使用排槍加樣。
請每次測定的同時做標(biāo)準(zhǔn)曲線,很好做復(fù)孔。如標(biāo)本中待測物質(zhì)含量過高(樣本OD值大于標(biāo)準(zhǔn)品孔*孔的OD值),請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)(n倍)后再測定,計算時請zui后乘以總稀釋倍數(shù)(×n×5)。
封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。
6.底物請避光保存。
7.嚴(yán)格按照說明書的操作進(jìn)行,試驗結(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn).
8.所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理。
9.本試劑不同批號組分不得混用。
保存條件及有效期
1.試劑盒保存:;2-8℃。
2.有效期:6個月
本說明書48T同樣適用
上海雅吉生物ELISA試劑盒特點體現(xiàn):
一、高效、靈敏、特異---采用全進(jìn)口材料和抗體
二、穩(wěn)定的重復(fù)性和可靠性---的科技水平
三、吸附性能好,空白值低,孔底透明度高的固相載體---嚴(yán)格的生產(chǎn)流程和規(guī)范操作
ELISA試劑盒適用范圍:
一.適用血清、血漿、組織勻漿液、細(xì)胞培養(yǎng)上清液、尿液等等多種標(biāo)本類型;
二.可檢測動物類型豐富:人、猴、大鼠、小鼠、豚鼠、兔、豬、犬、牛、綿羊、雞、蝦、魚等
三.可檢測指標(biāo)齊全:白介素,干擾素,血管緊張素,肺炎衣原體,趨化因子、生長因子基質(zhì)金屬蛋白酶、炎癥因子、血管生成素 等等 指標(biāo)
人食欲素受體(OXR)Elisa試劑盒免費代測服務(wù):
1.每個指標(biāo)需提供100微升樣品,如做復(fù)孔則200微升
2、標(biāo)本離心處理后請使用泡沫箱加冰袋郵寄至我司;
2、樣本在一周內(nèi)使用,保存條件2-8度;
3、代測服務(wù)只反饋實驗結(jié)果原數(shù)據(jù)信息,不再提供相應(yīng)試劑盒;
4、需支付相應(yīng)試劑盒費用,代測不產(chǎn)生任何費用;
上海雅吉生物科技有限公司坐落于上海松江科技技園區(qū),現(xiàn)擁有來自人、小鼠、大鼠、兔、豬等種屬的試劑盒5000余種,還可根據(jù)客戶要求定做試劑盒,提供免費代測服務(wù)。質(zhì)量好,使我們擁有*的客戶;價格低,薄利多銷是我們生存的優(yōu)勢?;服務(wù)好,讓我們在業(yè)界擁有很好的口碑。我們將一如既往堅持質(zhì)量*,誠信為本的理念。?感謝新老客戶的博愛??!
人食欲素受體(OXR)Elisa試劑盒相關(guān)產(chǎn)品如下:
犬肌酸激酶(CK)試劑盒 | 30-692.6U/L |
犬肌酸激酶同工酶MB(CK-MB)試劑盒 | 3-83.4U/L |
犬乳酸脫氫酶(LDH)試劑盒 | 1.0-46.5IU/L |
犬6-酮前列腺素F1α (6-K-PGF1α)試劑盒 | 11.25-312.7ng/L |
犬血栓素B2(TXB2)ELISA試劑盒 | 30-710.8 ng/L |
犬一氧化氮(NO)試劑盒 | 2.5-82.5μmol/L |
犬內(nèi)皮素(ET)ELISA試劑盒 | 2-58.7μg/L |
大鼠肌酸激酶(CK)試劑盒 | 20-493.4U/L |
大鼠肌酸激酶同工酶MB(CK-MB)試劑盒 | 15-392.3U/L |
大鼠乳酸脫氫酶(LDH)試劑盒 | 1.0-42.6 IU/L |
大鼠超氧化物歧化酶(SOD)試劑盒 | 10-269.2 U/mL |
大鼠丙二醛(MDA)試劑盒 | 0.75-32.9nmol/L |
大鼠谷胱甘肽(GSH)試劑盒 | 100-2122.4ng/L |
大鼠谷胱甘肽過氧化物酶(GSH-PX)試劑盒 | 100-2206.9U/L |
大鼠細(xì)胞間粘附分子1(ICAM-1)試劑盒 | 30-741.6 ng/L |
大鼠血管內(nèi)皮細(xì)胞粘附分子1(VCAM-1)試劑盒 | 100-2340.6μg/L |
大鼠白介素1β(IL-1β)試劑盒 | 5-162.4 ng/L |
大鼠白介素6(IL-6)試劑盒 | 15-383.2pg/ml |
大鼠腫瘤壞死因子α(TNF-α)試劑盒 | 45-1000.2ng/L |
大鼠幽門螺桿菌(HP) | 25-598ng/L |