大鼠胱天蛋白酶9（Casp-9）Elisa試劑盒

大鼠胱天蛋白酶9(Casp-9)Elisa試劑盒ELISA的基礎是抗原或抗體的固相化及抗原或抗體的酶標記。結(jié)合在固相載體表面的抗原或抗體仍保持其免疫學活性，酶標記的抗原或抗體既保留其免疫學活性，又保留酶的活性。在測定時，受檢標本（測定其中的抗體或抗原）與固相載體表面的抗原或抗體起反應。用洗滌的方法使固相載體上形成的抗原抗體復合物與液體中的其他物質(zhì)分開。再加入酶標記的抗原或抗體，也通過反應而結(jié)合在固相載體上。此時固相上的酶量與標本中受檢物質(zhì)的量呈一定的比例。加入酶反應的底物后，底物被酶催化成為有色產(chǎn)物，產(chǎn)物的量與標本中受檢物質(zhì)的量直接相關，故可根據(jù)呈色的深淺進行定性或定量分析。

規(guī)格：48T   96T

檢 測 范 圍 ：7pg/ml-220pg/ml
使 用 目 的 ：本試劑盒用于測定山羊血清、血漿及相關液體樣本中小反芻獸疫抗體(PPRAb)含量。

標 本 要 求
1．標本采集后盡早進行提取，提取按相關文獻進行，提取后應盡快進行實驗。若不能
馬上進行試驗，可將標本放于-20℃保存，但應避免反復凍融
2．不能檢測含 NaN3 的樣品，因 NaN3 抑制辣根過氧化物酶的（HRP）活性。

大鼠胱天蛋白酶9(Casp-9)Elisa試劑盒試劑及試劑配制
 1. 抗原及酶標記抗體 
①抗原： IgG 
②酶標抗抗體：羊抗鼠IgG-HRP 
2.包被液（CBS）：Na2CO3   0.8g，NaHCO3  1.46g，水溶解，定容500ml。  
3. 封閉液（3％BSA+CBS 或5％牛奶+CBS）：含3％牛血清白蛋白（BSA）：10mL CBS中加入0.3g BSA。含5％荷蘭牛奶：10mL CBS中加入0.5g牛奶 。 
4. 洗滌液（PBST 10*）：KH2PO4   4g，Na2HPO4·12H2O    58g，NaCl   160g， KCl  4g，Tween-20 10mL  加水定容2L。  
5. 洗滌液(1*PBS)： PBST：H2O=1：9 
6. 底物溶液（4甲基酰苯氨） ①TMB底物緩沖液(0.005mol/LPH3.6醋酸鈉-檸檬酸緩沖液)：稱NaAc·3H2O：1.13g，C6H8O7·H2O ：1.05g，用蒸餾水溶解，定容至1000mL，調(diào)PH=3.6。 ② TMB底物液：稱3,3',5,5'-四甲基聯(lián)苯胺（TMB）0.08g 溶于40mL 二甲基亞砜（DMSO）中，加60 mL 甲醇，混勻，加100mL 底物緩沖液，在暗處避光攪拌2小時至溶解，4℃避光保存。 ③H2O2 底物液：取140μL過氧化氫（H2O2）加入200mL底物緩沖液混勻。 ④底物應用液：現(xiàn)用現(xiàn)配，TMB:H2O2=1:1混勻。 
7. 終止液：2mol/L H2SO4 

四、大鼠胱天蛋白酶9(Casp-9)Elisa試劑盒操作步驟
 ①抗原包被過夜（12h以上）： IgG抗原，用包被液（CBS）稀釋，100μL/孔加入聚苯乙烯96孔反應板中。4℃放置過夜。 抗原用量：0.1μg*100N/抗原濃度 （N為板數(shù)）
②封閉：棄上清 加300μL/孔封閉液，37℃放置2h。 
③洗滌：用洗滌液洗3次 
④加一抗(待測樣品為細胞培養(yǎng)上清)：將含單克降抗體的細胞培養(yǎng)上清100μL /孔加到已包被的板上，空白培養(yǎng)基作為陰性對照，已知樣品血清（1：200稀釋于1%BSA+PBST中）作為陽性對照。37℃恒溫箱溫育2h。 測免疫效價待測樣品為小鼠血清時：采小鼠血液于常溫20min左右后放4℃至析出血清，3000r 10min離心。將含抗體的血清在已包被的板上用1%BSA+PBST連續(xù)倍比稀釋(按照1：200開始)，100μL /孔。每個樣品平行做兩份，小鼠陰性血清或空白培養(yǎng)基作為陰性對照，已知樣品作為陽性對照。37℃恒溫箱溫育2h。 
⑤洗滌：用洗滌液洗5次。 
⑥加二抗（酶標抗抗體）：羊抗鼠IgG-HRP，用1%BSA+PBST l ：10000稀釋，100μL／孔， 37℃恒溫箱溫育1h。
⑦洗滌：用洗滌液洗5次， 
⑧顯色：加新鮮配制的底物溶液(TMB:H2O2=1:1)100μL/孔，37℃恒溫箱放置10min，顯示藍色。 
⑨終止反應、比色：加30μL/孔H2SO4終止液．顏色變黃；用酶標儀測定450nm  630nm處各孔的吸光值，陽性反應的zui大稀釋度為待測樣品的效價。

大鼠胱天蛋白酶9(Casp-9)Elisa試劑盒相關產(chǎn)品如下：

YX06652B    豬肉堿脂酰轉(zhuǎn)移酶(CACT)Elisa試劑盒
YX06653B    豬沙門氏菌抗體（Salmonella-Ab）Elisa試劑盒
YX06654B    豬偽狂犬抗體（PRV-Ab）Elisa試劑盒
YX06655B    豬生長激素（GH）Elisa試劑盒
YX06656B    豬胃動素(MTL)Elisa試劑盒
YX06657B    豬瘟（CSF）Elisa試劑盒
YX06658B    豬瘟病毒抗體（CSFV-Ab）Elisa試劑盒
YX06659B    豬戊型肝炎病毒抗原(HEV)Elisa試劑盒
YX06660B    豬細胞色素氧化酶(CC0)Elisa試劑盒
YX06661B    豬細小病毒（PPV）Elisa試劑盒
YX06662B    豬腺苷脫氨酶(ADA)Elisa試劑盒
YX06663B    豬血管活性腸肽(VIP)Elisa試劑盒
YX06664B    豬血管細胞粘附分子1(VCAM-1)Elisa試劑盒
YX06665B    豬血液硫代巴比妥酸反應物(TBARS)Elisa試劑盒
YX06666B    豬氧化低密度脂蛋白（ox-LDL）Elisa試劑盒
YX06667B    豬氧化型谷胱甘肽(GSSG)Elisa試劑盒
YX06668B    豬胰高血糖素樣肽1(GLP-1)Elisa試劑盒
YX06669B    豬乙酰膽堿酯酶（AchE)Elisa試劑盒
YX06670B    豬異檸檬酸脫氫酶(ICD)Elisa試劑盒
YX06671B    豬誘導型一氧化氮合酶（iNOS）Elisa試劑盒
YX06672B    豬脂肪酶(Lipase)Elisa試劑盒
YX06673B    大鼠狂犬病毒抗體(RV-Ab)Elisa試劑盒
YX06674B    魚磷酸烯醇式丙酮酸羧激酶(PEPCK)Elisa試劑盒
YX06675B    魚葡萄糖（Glu）Elisa試劑盒
YX06676B    魚總脂酶（TLP）Elisa試劑盒
YX06677B    魚谷胱甘肽過氧化物酶（GPX）Elisa試劑盒
YX06678B    牛雄激素(androgen)Elisa試劑盒
YX06679B    小鼠多聚組氨酸標簽（HIS-Tag）試劑盒
YX06680B    人11β羥基類固醇脫氫酶1（11βHSD1）Elisa試劑盒
YX06681B    人華支睪吸蟲IgG(Cs-IgG)Elisa試劑盒
YX06682B    牛巴氏桿菌A型抗體（Pasteurella-A Ab）試劑盒
YX06683B    牛巴氏桿菌B型抗體（Pasteurella-B Ab）明書
YX06684B    豬戊肝病毒抗原Elisa試劑盒
YX06685B    人凝血因子IV(FIV)試劑盒
YX06686B    小鼠微粒體甘油三酸酯轉(zhuǎn)運蛋白(MTTP)試劑盒
YX06687B    小鼠溶血卵磷脂(LPC)Elisa試劑盒