大鼠高敏甲狀腺素（u-T4）Elisa試劑盒

大鼠高敏甲狀腺素(u-T4)Elisa試劑盒ELISA的基礎是抗原或抗體的固相化及抗原或抗體的酶標記。結合在固相載體表面的抗原或抗體仍保持其免疫學活性，酶標記的抗原或抗體既保留其免疫學活性，又保留酶的活性。在測定時，受檢標本（測定其中的抗體或抗原）與固相載體表面的抗原或抗體起反應。用洗滌的方法使固相載體上形成的抗原抗體復合物與液體中的其他物質分開。再加入酶標記的抗原或抗體，也通過反應而結合在固相載體上。此時固相上的酶量與標本中受檢物質的量呈一定的比例。加入酶反應的底物后，底物被酶催化成為有色產(chǎn)物，產(chǎn)物的量與標本中受檢物質的量直接相關，故可根據(jù)呈色的深淺進行定性或定量分析。

規(guī)格：48T   96T

檢 測 范 圍 ：7pg/ml-220pg/ml
使 用 目 的 ：本試劑盒用于測定山羊血清、血漿及相關液體樣本中小反芻獸疫抗體(PPRAb)含量。

標 本 要 求
1．標本采集后盡早進行提取，提取按相關文獻進行，提取后應盡快進行實驗。若不能
馬上進行試驗，可將標本放于-20℃保存，但應避免反復凍融
2．不能檢測含 NaN3 的樣品，因 NaN3 抑制辣根過氧化物酶的（HRP）活性。

大鼠高敏甲狀腺素(u-T4)Elisa試劑盒試劑及試劑配制
 1. 抗原及酶標記抗體 
①抗原： IgG 
②酶標抗抗體：羊抗鼠IgG-HRP 
2.包被液（CBS）：Na2CO3   0.8g，NaHCO3  1.46g，水溶解，定容500ml。  
3. 封閉液（3％BSA+CBS 或5％牛奶+CBS）：含3％牛血清白蛋白（BSA）：10mL CBS中加入0.3g BSA。含5％荷蘭牛奶：10mL CBS中加入0.5g牛奶 。 
4. 洗滌液（PBST 10*）：KH2PO4   4g，Na2HPO4·12H2O    58g，NaCl   160g， KCl  4g，Tween-20 10mL  加水定容2L。  
5. 洗滌液(1*PBS)： PBST：H2O=1：9 
6. 底物溶液（4甲基酰苯氨） ①TMB底物緩沖液(0.005mol/LPH3.6醋酸鈉-檸檬酸緩沖液)：稱NaAc·3H2O：1.13g，C6H8O7·H2O ：1.05g，用蒸餾水溶解，定容至1000mL，調PH=3.6。 ② TMB底物液：稱3,3',5,5'-四甲基聯(lián)苯胺（TMB）0.08g 溶于40mL 二甲基亞砜（DMSO）中，加60 mL 甲醇，混勻，加100mL 底物緩沖液，在暗處避光攪拌2小時至溶解，4℃避光保存。 ③H2O2 底物液：取140μL過氧化氫（H2O2）加入200mL底物緩沖液混勻。 ④底物應用液：現(xiàn)用現(xiàn)配，TMB:H2O2=1:1混勻。 
7. 終止液：2mol/L H2SO4 

大鼠高敏甲狀腺素(u-T4)Elisa試劑盒操作步驟
 ①抗原包被過夜（12h以上）： IgG抗原，用包被液（CBS）稀釋，100μL/孔加入聚苯乙烯96孔反應板中。4℃放置過夜。 抗原用量：0.1μg*100N/抗原濃度 （N為板數(shù)）
②封閉：棄上清 加300μL/孔封閉液，37℃放置2h。 
③洗滌：用洗滌液洗3次 
④加一抗(待測樣品為細胞培養(yǎng)上清)：將含單克降抗體的細胞培養(yǎng)上清100μL /孔加到已包被的板上，空白培養(yǎng)基作為陰性對照，已知樣品血清（1：200稀釋于1%BSA+PBST中）作為陽性對照。37℃恒溫箱溫育2h。 測免疫效價待測樣品為小鼠血清時：采小鼠血液于常溫20min左右后放4℃至析出血清，3000r 10min離心。將含抗體的血清在已包被的板上用1%BSA+PBST連續(xù)倍比稀釋(按照1：200開始)，100μL /孔。每個樣品平行做兩份，小鼠陰性血清或空白培養(yǎng)基作為陰性對照，已知樣品作為陽性對照。37℃恒溫箱溫育2h。 
⑤洗滌：用洗滌液洗5次。 
⑥加二抗（酶標抗抗體）：羊抗鼠IgG-HRP，用1%BSA+PBST l ：10000稀釋，100μL／孔， 37℃恒溫箱溫育1h。
⑦洗滌：用洗滌液洗5次， 
⑧顯色：加新鮮配制的底物溶液(TMB:H2O2=1:1)100μL/孔，37℃恒溫箱放置10min，顯示藍色。 
⑨終止反應、比色：加30μL/孔H2SO4終止液．顏色變黃；用酶標儀測定450nm  630nm處各孔的吸光值，陽性反應的zui大稀釋度為待測樣品的效價。

大鼠高敏甲狀腺素(u-T4)Elisa試劑盒相關產(chǎn)品如下：

人鼻咽癌細胞    CNE1
人鼻咽癌細胞    CNE2
人卵巢癌細胞    CoC1
人結腸癌細胞    COLO205
人結直腸腺癌細胞    COLO320
人結直腸腺癌細胞    COLO320 DM 
人結直腸腺癌細胞    COLO320 HSR
人結腸癌細胞    CW-2
人巨核細胞白血病細胞    DAMI
人結直腸腺癌細胞    DLD-1
人前列腺癌細胞    DU145
人臍靜脈細胞融合細胞    EA.hy926
人食管癌細胞    Eca-109
人膀胱癌細胞    ECV-304
人膀胱癌細胞    EJ
人卵巢透明細胞癌細胞    ES-2
人腺癌細胞系    F56
人T淋巴瘤白血病細胞    H9/HTLV-IIIB
人永生化表皮細胞    hacat
人永生化表皮細胞    Hacat
人整合SV40基因的乳腺上皮細胞    HBL-100
人腦周細胞    HBVP
人非小細胞肺癌細胞    HCC827
人非小細胞肺癌細胞    HCC827
人非小細胞肺癌細胞    HCC-827
人子宮鱗癌細胞(高分化)     HCC-94
永生化人腦微血管內皮細胞    HCMEC/D3外來
人結腸癌細胞    HCT116
人結腸癌細胞    hct-15
人結腸癌細胞    hct-15
人結直腸癌癌細胞    HCT-8
人結直腸癌氟尿嘧啶耐藥株    HCT-8/FU
人結直腸癌紫杉醇耐藥株    HCT-8/Taxol
人子宮內膜腺癌細胞    HEC-1-A
人子宮膜腺癌細胞    HEC-1-B
人胚腎細胞    HEK-293（293）外來
人胚腎細胞    HEK-293A
人紅白細胞白血病細胞    HEL
人子宮頸癌細胞    HELA XB
人宮頸癌細胞    hela（chang liver）
人宮頸癌細胞    HeLa.S3
人宮頸癌細胞    HELA-S3
人子宮頸癌細胞    HELA外來
人肝癌細胞    Hep G2
人肝癌(HBV)     Hep G2.2.15
人 SV40  轉染成骨細胞    HFOB1.19
人胃癌細胞    HGC-27
人腎皮質近曲小管上皮細胞    HK-2
人腎上皮細胞    HKb20
人早幼粒白血病細胞    HL60
人微血管內皮細胞株    HMEC-1
人骨肉瘤細胞    HOS
人胰腺癌細胞    HPAC
人肺動脈平滑肌    HPASMC