大鼠環(huán)孢素A（CsA）Elisa試劑盒

大鼠環(huán)孢素A(CsA)Elisa試劑盒ELISA的基礎(chǔ)是抗原或抗體的固相化及抗原或抗體的酶標(biāo)記。結(jié)合在固相載體表面的抗原或抗體仍保持其免疫學(xué)活性，酶標(biāo)記的抗原或抗體既保留其免疫學(xué)活性，又保留酶的活性。在測定時(shí)，受檢標(biāo)本（測定其中的抗體或抗原）與固相載體表面的抗原或抗體起反應(yīng)。用洗滌的方法使固相載體上形成的抗原抗體復(fù)合物與液體中的其他物質(zhì)分開。再加入酶標(biāo)記的抗原或抗體，也通過反應(yīng)而結(jié)合在固相載體上。此時(shí)固相上的酶量與標(biāo)本中受檢物質(zhì)的量呈一定的比例。加入酶反應(yīng)的底物后，底物被酶催化成為有色產(chǎn)物，產(chǎn)物的量與標(biāo)本中受檢物質(zhì)的量直接相關(guān)，故可根據(jù)呈色的深淺進(jìn)行定性或定量分析。

規(guī)格：48T   96T

檢 測 范 圍 ：7pg/ml-220pg/ml
使 用 目 的 ：本試劑盒用于測定山羊血清、血漿及相關(guān)液體樣本中小反芻獸疫抗體(PPRAb)含量。

標(biāo) 本 要 求
1．標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取，提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行，提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。若不能
馬上進(jìn)行試驗(yàn)，可將標(biāo)本放于-20℃保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融
2．不能檢測含 NaN3 的樣品，因 NaN3 抑制辣根過氧化物酶的（HRP）活性。

大鼠環(huán)孢素A(CsA)Elisa試劑盒試劑及試劑配制
 1. 抗原及酶標(biāo)記抗體 
①抗原： IgG 
②酶標(biāo)抗抗體：羊抗鼠IgG-HRP 
2.包被液（CBS）：Na2CO3   0.8g，NaHCO3  1.46g，水溶解，定容500ml。  
3. 封閉液（3％BSA+CBS 或5％牛奶+CBS）：含3％牛血清白蛋白（BSA）：10mL CBS中加入0.3g BSA。含5％荷蘭牛奶：10mL CBS中加入0.5g牛奶 。 
4. 洗滌液（PBST 10*）：KH2PO4   4g，Na2HPO4·12H2O    58g，NaCl   160g， KCl  4g，Tween-20 10mL  加水定容2L。  
5. 洗滌液(1*PBS)： PBST：H2O=1：9 
6. 底物溶液（4甲基酰苯氨） ①TMB底物緩沖液(0.005mol/LPH3.6醋酸鈉-檸檬酸緩沖液)：稱NaAc·3H2O：1.13g，C6H8O7·H2O ：1.05g，用蒸餾水溶解，定容至1000mL，調(diào)PH=3.6。 ② TMB底物液：稱3,3',5,5'-四甲基聯(lián)苯胺（TMB）0.08g 溶于40mL 二甲基亞砜（DMSO）中，加60 mL 甲醇，混勻，加100mL 底物緩沖液，在暗處避光攪拌2小時(shí)至溶解，4℃避光保存。 ③H2O2 底物液：取140μL過氧化氫（H2O2）加入200mL底物緩沖液混勻。 ④底物應(yīng)用液：現(xiàn)用現(xiàn)配，TMB:H2O2=1:1混勻。 
7. 終止液：2mol/L H2SO4 

大鼠環(huán)孢素A(CsA)Elisa試劑盒操作步驟
 ①抗原包被過夜（12h以上）： IgG抗原，用包被液（CBS）稀釋，100μL/孔加入聚苯乙烯96孔反應(yīng)板中。4℃放置過夜。 抗原用量：0.1μg*100N/抗原濃度 （N為板數(shù)）
②封閉：棄上清 加300μL/孔封閉液，37℃放置2h。 
③洗滌：用洗滌液洗3次 
④加一抗(待測樣品為細(xì)胞培養(yǎng)上清)：將含單克降抗體的細(xì)胞培養(yǎng)上清100μL /孔加到已包被的板上，空白培養(yǎng)基作為陰性對照，已知樣品血清（1：200稀釋于1%BSA+PBST中）作為陽性對照。37℃恒溫箱溫育2h。 測免疫效價(jià)待測樣品為小鼠血清時(shí)：采小鼠血液于常溫20min左右后放4℃至析出血清，3000r 10min離心。將含抗體的血清在已包被的板上用1%BSA+PBST連續(xù)倍比稀釋(按照1：200開始)，100μL /孔。每個(gè)樣品平行做兩份，小鼠陰性血清或空白培養(yǎng)基作為陰性對照，已知樣品作為陽性對照。37℃恒溫箱溫育2h。 
⑤洗滌：用洗滌液洗5次。 
⑥加二抗（酶標(biāo)抗抗體）：羊抗鼠IgG-HRP，用1%BSA+PBST l ：10000稀釋，100μL／孔， 37℃恒溫箱溫育1h。
⑦洗滌：用洗滌液洗5次， 
⑧顯色：加新鮮配制的底物溶液(TMB:H2O2=1:1)100μL/孔，37℃恒溫箱放置10min，顯示藍(lán)色。 
⑨終止反應(yīng)、比色：加30μL/孔H2SO4終止液．顏色變黃；用酶標(biāo)儀測定450nm  630nm處各孔的吸光值，陽性反應(yīng)的zui大稀釋度為待測樣品的效價(jià)。

大鼠環(huán)孢素A(CsA)Elisa試劑盒相關(guān)產(chǎn)品如下：

人胎盤細(xì)胞（有限細(xì)胞系）    Hs 815.Pl 
人乳腺癌細(xì)胞    HS578T
人腦膠質(zhì)瘤細(xì)胞    HS683
人皮膚成纖維細(xì)胞    HSF
人纖維肉瘤細(xì)胞    HT-1080
人膀胱癌細(xì)胞    HT-1376
人結(jié)腸癌細(xì)胞    HT-29
人眼小梁網(wǎng)細(xì)胞    HTMC
人肝癌細(xì)胞    huh-7
人肝癌細(xì)胞    huh-7
人肝癌細(xì)胞    huh-7.5.1
人十二脂腸腺癌    HUTU-80
人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞（永生化）    HUVEC
人子宮內(nèi)膜癌細(xì)胞    Ishikawa
人子宮內(nèi)膜癌細(xì)胞    Ishikawa
人急性T細(xì)胞白血病細(xì)胞    J.gamma1
人膀胱移行細(xì)胞癌    J82
人胰腺癌細(xì)胞    JF-305
人T淋巴細(xì)胞白血病細(xì)胞    Jurkat（clone E6-1）
人慢性骨髓性白血病細(xì)胞系    K562
人慢性骨髓性白血病細(xì)胞系    K562
人K562耐阿霉素細(xì)胞株    K562/ADR 
    K562R
人口腔表皮癌細(xì)胞    KB
人腦膠質(zhì)細(xì)胞瘤細(xì)胞    KNS-89
人外周血嗜堿性白血病細(xì)胞    KU812
人食道癌細(xì)胞    kyse30
人膠質(zhì)瘤細(xì)胞    LN229
人前列腺癌細(xì)胞（癌轉(zhuǎn)移）    LNCap / LNCap.FGC/ LNCaP clone FGC 
人結(jié)直腸腺癌細(xì)胞    LS174T
人肝星形細(xì)胞    LX-2
人乳腺上皮細(xì)胞    MCF-10A
人乳腺癌細(xì)胞    MCF-7
人乳腺癌阿霉素耐藥細(xì)胞株    Mcf-7/adr
人乳腺細(xì)胞    MDA-KB2
人乳腺癌細(xì)胞    MDA-MB-231
人三陰性乳腺癌    MDA-MB-231+luciferase
人乳腺癌細(xì)胞    MDA-MB-361
人乳腺癌細(xì)胞    MDA-MB-435S
人乳腺癌細(xì)胞    MDA-MB-453
人乳腺癌細(xì)胞    MDA-MB-453
人乳腺癌細(xì)胞    MDA-MB-468
人膜間皮細(xì)胞    MET-5A
人骨肉瘤細(xì)胞    MG63
人骨肉瘤細(xì)胞    MG-63
人胃癌細(xì)胞    MGC-803
人高轉(zhuǎn)移性肝癌細(xì)胞    MHCC-97H
人胰腺癌細(xì)胞    MIA-PACA-2
人胃癌細(xì)胞    MKN-1
人急性淋巴母細(xì)胞性白血病細(xì)胞    MOLT-4
人胚肺成纖維細(xì)胞    MRC-5
人急性淋巴母細(xì)胞白血病細(xì)胞    MT-4
人乳腺癌細(xì)胞    MX-1
人非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞    NCI-H1299
人非小細(xì)胞肺腺癌細(xì)胞    NCI-H157
人非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞     NCI-H1650
人肺腺癌細(xì)胞    NCI-H1975
人肺腺癌細(xì)胞    NCI-H1975 [H-1975, H1975]